CASA,即計算機(jī)輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),相比人工檢測,CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),如前向運(yùn)動和超活化運(yùn)動,以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運(yùn)動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個精子,結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運(yùn)動的不同特性。不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大,因此,更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。上海計數(shù)精子分析VCL
美國Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學(xué)實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)板在大鼠附睪精子計數(shù)結(jié)果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺,進(jìn)行精子計數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計數(shù),比較兩種計數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)板的精子計數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價值。香港水生動物精子分析重復(fù)性高IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點,能夠捕捉到微小的細(xì)節(jié)和變化,進(jìn)一步提高了精子分析的準(zhǔn)確性。
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出。可以使用一次性的和可重復(fù)的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。
IVOS能提供:精確、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節(jié)省成本。 [1]主要功能IVOS自動精子活動、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。Hamilton Thorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)??梢詰?yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。在TOX IVOS上有**的大鼠精液分析軟件。
精子分析儀工作原理
以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動移位及運(yùn)動參數(shù),對采集圖像進(jìn)行精子密度、活動力、活動率、運(yùn)動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,由計算機(jī)處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進(jìn)行動態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測 [1]。
優(yōu)點:
操作簡便,用量少,檢測速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運(yùn)動狀態(tài)的多種參數(shù)等。
缺點:
影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。 精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。
五、精子活動力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子>0.80:**后120分鐘內(nèi)活動力為Ⅲ級以上的精子>0.60;**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動。[臨床意義]活動不良或不活動的精子增多,是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***,某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活動力下降。六、精子計數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1.精子計數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常,見于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2.精液多次未查到精子為無精癥,主要見于睪丸生精功能低下,先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結(jié)扎術(shù)2個月后精液中應(yīng)無精子,否則說明手術(shù)失敗。3.老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失。該設(shè)備還支持多種分析模式,包括精子濃度、活力、形態(tài)和DNA損傷等參數(shù)的測量,滿足用戶的多樣化需求。廣州快速運(yùn)動精子分析WOB
精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較,具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。上海計數(shù)精子分析VCL
擴(kuò)展性檢查:可以在某些情況下由實驗室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷,并且已有報道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān),精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容,已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測序內(nèi)容。臨床上,越來越多的人意識到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因,而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實驗室進(jìn)行,但一些男科實驗室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響,泌尿男科醫(yī)生可能提出對精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評估。本手冊納入了精液中白細(xì)胞介素檢測方法。上海計數(shù)精子分析VCL