無創(chuàng)產(chǎn)前檢查
鐮狀細胞貧血(sickle cell anemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴重的危害,可以導(dǎo)致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當cff-DNA濃度大于7%時,可以**的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當厲害了。
2個光電倍增管(PMT),靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD。常州微滴式數(shù)字PCR哪家好
相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:
· 能夠有效區(qū)分濃度差異微小的樣品:更好的準確度、精密度和重復(fù)性,可以用于精確測定靶基因的相對表達,基因拷貝數(shù)變異分析等。
· 數(shù)字PCR可開發(fā)針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環(huán)境提供檢測解決方案,該技術(shù)的應(yīng)用范圍廣,尤其在液體活檢領(lǐng)域,已開發(fā)針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個位點檢測試劑盒,可精細指導(dǎo)臨床***的診斷,以便患者在后續(xù)得到更及時并且適當?shù)?**方案提供。 杭州國產(chǎn)數(shù)字PCR銷售電話正壓生成油包水的液滴。
CNV(Copy Number Variations,拷貝數(shù)變異)研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異,測序方法適用于高于30%的變異率檢測,而qPCR的比較**辨在1.5倍左右,數(shù)字PCR通過直接計數(shù)目標基因與參照基因( 拷貝數(shù)為1的基因,例如RNaseP) 的數(shù)目,計算比值,直接得到目標基因的拷貝數(shù)可以達到極高的拷貝數(shù)分辨精度。
除此之外,dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待,而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標準品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應(yīng)用方向上,已經(jīng)有大量實驗數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能。
研究方向*****的實時監(jiān)控已有數(shù)篇文章報道了使用數(shù)字PCR技術(shù)對患者***過程中的循環(huán)**DNA(ctDNA)進行檢測,實時監(jiān)控疾病進展。在非小細胞肺*、乳腺*和腸*等多種**患者中都取得了令人鼓舞的結(jié)果。與影像學(xué)及其他常規(guī)指標相比,ctDNA突變及豐度改變通常會提前數(shù)月出現(xiàn),這樣就可以提醒醫(yī)生及時調(diào)整***方案,使患者得到更有效的***。隨著數(shù)字PCR熒光通道的增加和多指標檢測的成熟,數(shù)字PCR將會進入更多應(yīng)用領(lǐng)域,有力推動生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、檢驗檢疫、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的快速發(fā)展。FAM、VIC雙通道熒光檢測。
基因檢測**前沿的兩種方法是:高通量測序(NGS)和數(shù)字PCR (dPCR)。
高通量測序技術(shù)又稱“下一代”測序技術(shù),可以一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定,功能強大,但是實驗操作較復(fù)雜,數(shù)據(jù)分析難度較大,檢測周期長,成本較高。數(shù)字PCR技術(shù)是目前**精細**靈敏的基因檢測技術(shù),借助微液滴或微腔室,通過單個模板分子的PCR擴增,可實現(xiàn)不依賴于標準曲線和參照樣本的***定量。與NGS相比,數(shù)字PCR靈敏度高、檢測速度快、操作簡便、結(jié)果易讀、成本低廉等優(yōu)勢使其更適合臨床檢測,成為精細醫(yī)療實現(xiàn)平民化、大眾化的比較好選擇。
此外,數(shù)字PCR還在基因表達差異研究、拷貝數(shù)變異(CNV)研究、低豐度DNA模板分子的精確定量、甲基化含量鑒定、二代測序輔助建庫、CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗證、轉(zhuǎn)基因成分的檢測、移植排異監(jiān)控、腸道菌群分析以及***基因組檢測等眾多領(lǐng)域中有著優(yōu)異的應(yīng)用。
關(guān)于甲基化含量的鑒定。常州微滴式數(shù)字PCR哪家好
準確度不完全依賴于擴增效率。常州微滴式數(shù)字PCR哪家好
與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢:1、能夠***定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準確性。而數(shù)字PCR不受標準曲線和擴增動力學(xué)影響,可進行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個 PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個 反應(yīng)體系中,***降低了背景信號和***物對反應(yīng)的干擾,擴增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。常州微滴式數(shù)字PCR哪家好
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