MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR是具有國內自主知識產權的第三代JUE對定量PCR系統(tǒng),整套系統(tǒng)由MicroDrop-100A微滴生成儀、MicroDrop-100B微滴檢測儀以及結果數(shù)據(jù)分析設備等構成。系統(tǒng)通過自主設計的微流控芯片,利用油水相不兼容的原理,在2分鐘時間內將PCR體系分割成100,000油包水的體系,每個體系為的PCR反應體系,體積約為0.2nL,單次實驗一次可生成8個樣本的油包水體系 。由于油包水體系的分割效應,使得數(shù)字PCR受PCRYi制物的影響相對較小,有利于復雜環(huán)境樣本的實驗操作。區(qū)別于熒光定量PCR的過程性判讀方法,數(shù)字PCR結果判讀為終點法,故其對PCR擴增效率的依賴也相對較小。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,歡迎客戶來電!福建便攜式數(shù)字PCR商家
在定量PCR時,我們常常糾結一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結了,因為數(shù)字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域:拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。福建便攜式數(shù)字PCR商家浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,期待您的光臨!
數(shù)字PCR為juedui定量,qPCR為相對定量,數(shù)字PCR較qPCR更精細、更靈敏。所以說,未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補充,在部分領域逐步替代熒光定量PCR。未 來這些領域將廣泛應用到數(shù)字PCR:科研:高校(生命科學學院、環(huán)境學院、醫(yī)學院、藥學院)等。醫(yī)院:病理科、血液科、婦產科、心血管科、檢驗科、轉化醫(yī)學中心:研究院單位、疾控中心、海關(出入境檢驗檢疫)、質監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè):第三方檢測機構、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。
相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:●靈敏度可達到單個核酸分子:檢測限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實現(xiàn)靶標DNA/RNA的生物濃縮;●無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量,可對靶分子起始量進行***定量,直 接獨處DNA分子的個數(shù);●適合環(huán)境復雜樣品的檢測:終點PCR檢測,不依賴Ct值,不依賴擴增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問題,適合各類復雜環(huán)境中的樣本進行***定量,如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,有需要可以聯(lián)系我司哦!
同時,從公式也可以看出,隨著反應陽性體系數(shù)(X)的增加,體系中目標分子的拷貝數(shù)相對于X會有較大的差距,隨著X的持續(xù)增加,數(shù)字PCR結果的不確定度也隨著提高,總體來說,數(shù)字PCR陽性體系的數(shù)量不得超過總體系數(shù)量的80%。另一個方面,N的增加會使整個數(shù)字PCR體系具有較大的線性范圍,并可以提高反應的靈敏度、穩(wěn)定性以及可重復性。因此,目前dPCR都需要在成本可控的情況下,增加分配的腔室數(shù)和液滴數(shù)。商業(yè)化dPCR平臺及其特點發(fā)展到現(xiàn)在,市面上常見的dPCR主要有兩種:微滴式dPCR(dropletdPCR,ddPCR)和芯片式dPCR(chipdPCR,cdPCR)技術。由于芯片式dPCR制造芯片的成本較高,目前微滴式dPCR正越來越受到企業(yè)的認可??:?上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,有想法的可以來電咨詢!福建便攜式數(shù)字PCR商家
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要了解為什么傳統(tǒng)PCR存在限制,務必要了解PCR反應過程中發(fā)生了什么?;綪CR運行可以分為三個階段:指數(shù)期每個循環(huán)積聚的產物準確加倍(假定**反應效率)。該反應具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴增,因為所有試劑均新鮮可用,反應的動力學推動反應有利于擴增子加倍。線性期(高變異性)隨著反應繼續(xù),一些試劑因擴增而被消耗。反應開始減緩,并且每個循環(huán)的PCR產物不再加倍。平臺期(終點:使用傳統(tǒng)方法進行凝膠檢測)反應停止,不再產生更多產物,并且如果放置時間夠長,PCR產物將開始降解。因為每個樣品具有不同的反應動力學,所以每支試管或每個反應將在不同的時間點進入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內,傳統(tǒng)PCR進行測量,又稱為終點檢測。福建便攜式數(shù)字PCR商家