連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,TTB)主要是用于分離和富集沙門氏菌的選擇性富集培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通過特定的化學(xué)成分抑制非目標(biāo)細(xì)菌的生長(zhǎng),同時(shí)促進(jìn)沙門氏菌的生長(zhǎng)。它的配方中含有硫代硫酸鈉和碘液,它們反應(yīng)生成四硫磺酸鈉,這種物質(zhì)對(duì)許多腸道細(xì)菌具有抑制作用,但沙門氏菌能夠還原四硫磺酸鈉并在此培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。除了沙門氏菌,連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基也可能適用于其他具有類似代謝特性的細(xì)菌。例如,某些具有連四硫酸鹽還原酶的細(xì)菌也能在這種培養(yǎng)基中繁殖。然而,這種培養(yǎng)基的選擇性和特異性主要是針對(duì)沙門氏菌屬設(shè)計(jì)的,因此在其他類型的細(xì)菌培養(yǎng)中的應(yīng)用可能受到限制。在實(shí)際應(yīng)用中,連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基通常用于從糞便、污水等樣品中富集沙門氏菌,以便于后續(xù)的分離和鑒定。它的使用需要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。根據(jù)搜索結(jié)果,連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方通常包含胰酪蛋白胨、胃酶消化動(dòng)物組織、碳酸鈣、膽鹽、硫代硫酸鈉等成分,這些成分共同作用以實(shí)現(xiàn)對(duì)沙門氏菌的選擇性富集。具體的配方和制備方法可能會(huì)根據(jù)不同的生產(chǎn)廠家和產(chǎn)品有所差異。在使用前,應(yīng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書,以確保正確配制和使用培養(yǎng)基。NAC瓊脂培養(yǎng)皿可以用于微生物的計(jì)數(shù)和定量,通過培養(yǎng)皿計(jì)數(shù)法可以快速準(zhǔn)確地確定微生物的數(shù)量。TSA+卵磷脂+吐溫80+0.25%青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿
強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一種專為梭菌屬(Clostridium)細(xì)菌設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營養(yǎng)成分**:RCM培養(yǎng)基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化鈉、醋酸鈉和L-半胱氨酸鹽酸鹽,這些成分提供碳源、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,適合梭菌的生長(zhǎng)需求。2.**pH值**:RCM培養(yǎng)基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),為梭菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù),特別適用于厭氧條件下梭菌的培養(yǎng)。4.**抑制作用**:醋酸鈉成分有助于抑制革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng),使得RCM培養(yǎng)基更適合梭菌屬細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)。5.**穩(wěn)定性**:微量瓊脂(0.5g/L)的添加增加了培養(yǎng)基還原環(huán)境的穩(wěn)定性,有助于厭氧環(huán)境的形成,防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散。6.**生長(zhǎng)表現(xiàn)**:無動(dòng)力的細(xì)菌在RCM培養(yǎng)基中通常呈顆粒狀或條狀生長(zhǎng),便于計(jì)數(shù);而有動(dòng)力的細(xì)菌則可能呈現(xiàn)渾濁生長(zhǎng),一般不適合計(jì)數(shù)。7.**制備方法**:將RCM培養(yǎng)基粉末溶解于蒸餾水中,加熱至完全溶解后分裝,通過高壓滅菌以備使用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:RCM培養(yǎng)基適用于生孢梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等梭菌的生長(zhǎng),這些菌株在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況良好。小牛浸液瓊脂培養(yǎng)皿去氧膽酸鹽瓊脂含有去氧膽酸鹽,可以選擇性地抑制一些腸道細(xì)菌的生長(zhǎng),從而使一些其他的細(xì)菌能容易地生長(zhǎng)。
木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)是一種選擇性培養(yǎng)基,用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),以下是其特點(diǎn):1.**用途**:專門用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),也適用于其他腸道菌的選擇性分離。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-賴氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、苯酚紅和瓊脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:酵母浸粉提供維生素和輔助因子,木糖、乳糖和蔗糖作為可發(fā)酵碳源。賴氨酸的加入有助于鑒別沙門氏菌。沙門氏菌發(fā)酵木糖產(chǎn)酸,產(chǎn)生的脫羧酶使賴氨酸脫羧,導(dǎo)致pH升高。硫代硫酸鈉及檸檬酸鐵銨與硫化氫反應(yīng),產(chǎn)生黑色硫化鐵,苯酚紅作為pH指示劑,去氧膽酸鹽抑制革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng)。4.**用法**:稱取57g培養(yǎng)基,溶解在1000ml蒸餾水中,不要過分加熱,冷至50-55℃時(shí)傾入無菌平皿,部分開蓋干燥2小時(shí),然后蓋上備用。無需高壓滅菌,在24小時(shí)內(nèi)使用。5.**微生物質(zhì)控**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),如腸炎沙門氏菌CMCC50760、大腸埃希氏菌ATCC25922、福氏志賀氏菌CMCC51572等,觀察其在XLD培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征。
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BrilliantGreenLactoseBileBroth,簡(jiǎn)稱BGLB)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的確證試驗(yàn)。以下是其主要特點(diǎn)和相關(guān)信息:1.**成分**:BGLB培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛膽粉和煌綠。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,牛膽粉和煌綠則用于抑制非腸桿菌科細(xì)菌的生長(zhǎng)。2.**配方**:每升培養(yǎng)基中通常包含10.0g蛋白胨、10.0g乳糖、20.0g牛膽粉和0.0133g煌綠,pH值調(diào)節(jié)至7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:蛋白胨提供微生物生長(zhǎng)所需的碳氮源;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;煌綠是一種具有抑菌能力的染料,牛膽粉和煌綠抑制非腸桿菌科細(xì)菌。4.**使用方法**:稱取40.0gBGLB培養(yǎng)基,加入1000ml蒸餾水中,煮沸溶解,分裝到有玻璃小倒管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。5.**質(zhì)量控制**:通過接種特定的質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌ATCC25922、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、糞腸球菌ATCC29212等,進(jìn)行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。大腸埃希氏菌和弗氏檸檬酸桿菌在BGLB培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出生長(zhǎng),而糞腸球菌則應(yīng)不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)微弱。胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿也被廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,如水質(zhì)、空氣、食品等樣品的微生物檢測(cè)。
MFC瓊脂(也稱為4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷瓊脂,MUG瓊脂)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的濾膜法檢測(cè),符合中國國家標(biāo)準(zhǔn)(GB)。其配方包含多價(jià)蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三號(hào)膽鹽、氯化鈉、苯胺藍(lán)、瓊脂、玫紅酸等成分,pH值調(diào)節(jié)至7.4±0.2。這種培養(yǎng)基通過膽鹽的選擇性作用抑制革蘭氏陽性菌,同時(shí)利用乳糖作為可發(fā)酵的糖類,結(jié)合指示劑來檢測(cè)細(xì)菌的代謝活動(dòng)。MFC瓊脂的檢驗(yàn)原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發(fā)酵糖類;3號(hào)膽鹽抑制革蘭氏陽性菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;玫紅酸和苯胺藍(lán)為pH指示劑。當(dāng)細(xì)菌發(fā)酵乳糖時(shí),會(huì)產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化,從而可以觀察到產(chǎn)酸現(xiàn)象。在實(shí)際應(yīng)用中,MFC瓊脂可以用于水質(zhì)檢測(cè),特別是飲用水和水源中糞大腸菌群的測(cè)定。使用時(shí),將培養(yǎng)基加熱溶解,分裝到試管或平皿中,高壓滅菌后備用。接種樣品后,在適宜的溫度下培養(yǎng),通過觀察培養(yǎng)基上菌落的生長(zhǎng)情況和顏色變化來判斷是否存在大腸菌群。MFC瓊脂的制備和使用應(yīng)遵循相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程,以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。與傳統(tǒng)瓊脂培養(yǎng)基相比,馬鈴薯浸出液瓊脂培養(yǎng)皿中的微生物生長(zhǎng)速度更快,菌落形態(tài)更為清晰。胡蘿卜胡蘿卜浸出液葡萄瓊脂糖預(yù)裝培養(yǎng)皿
未來研究將進(jìn)一步探索改良Letheen瓊脂培養(yǎng)基在研究領(lǐng)域的優(yōu)越性能,以及在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中的靈活性。TSA+卵磷脂+吐溫80+0.25%青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿
LB瓊脂(Miller)是一種用于實(shí)驗(yàn)室的微生物培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E.coli)的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,以及作為凝固劑的瓊脂。Miller配方的特點(diǎn)是含有較高的氯化鈉濃度,這有助于選擇性地培養(yǎng)某些細(xì)菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化鈉(NaCl):10.0g-瓊脂(Agar):15.0g**制備方法**:1.將40克LB瓊脂粉末加入到1升蒸餾水中。2.加熱至沸騰,同時(shí)攪拌以確保粉末完全溶解。3.在121°C下高壓滅菌15分鐘。4.滅菌后,冷卻至50°C,然后分裝到無菌培養(yǎng)皿中。**應(yīng)用**:-適用于非選擇性培養(yǎng)大腸桿菌菌株,用于克隆、質(zhì)粒DNA制備和重組蛋白生產(chǎn)。-當(dāng)加入適當(dāng)?shù)目股镔|(zhì)時(shí),也適合選擇性培養(yǎng)。**特點(diǎn)**:-無需復(fù)雜配置,快速溶解,方便使用。-經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,適合大量培養(yǎng)基的制備。**儲(chǔ)存條件**:-通常建議在常溫(10-30℃)下儲(chǔ)存。LB瓊脂(Miller)因其營養(yǎng)豐富、制備簡(jiǎn)單的應(yīng)用,成為分子生物學(xué)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基之一。在實(shí)際使用時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作,以確保培養(yǎng)效果。TSA+卵磷脂+吐溫80+0.25%青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿