月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LaurylSulfateTryptoseBroth,簡稱LST)是一種選擇性液體培養(yǎng)基,主要用于檢測食品、水、奶制品中的大腸菌群和大腸埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**試驗(yàn)原理**:LST培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,滿足細(xì)菌生長需求;氯化鈉維持滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀作為pH緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制非大腸菌群細(xì)菌的生長。2.**培養(yǎng)基配方**:每升培養(yǎng)基包含胰蛋白胨20.0g、氯化鈉5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氫鉀2.75g、磷酸氫二鉀2.75g、月桂基硫酸鈉0.1g,pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2(25℃)。3.**試驗(yàn)方法**:稱取35.6克LST培養(yǎng)基,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝到帶有倒立發(fā)酵管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。4.**質(zhì)量控制和典型特征**:在36±1℃培養(yǎng)48±2小時(shí),大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細(xì)菌產(chǎn)生氣體,在小倒管內(nèi)有氣泡;其他細(xì)菌無氣泡。5.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:接種特定的質(zhì)控菌株,如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、陰溝腸桿菌ATCC23355、大腸埃希氏菌ATCC8739、糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí),觀察結(jié)果。結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)皿是一種常用的選擇性培養(yǎng)基,用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中對腸道病原菌的檢測和分離。RVR10瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基是一種專門用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營養(yǎng)成分**:培養(yǎng)基中含有蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖和牛肉浸粉等成分,其中蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,葡萄糖提供碳源。2.**pH值**:pH值控制在7.2±0.2(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于硫酸鏈霉素等抗生物質(zhì)的無菌檢查,也用于消毒效果生物監(jiān)測評價(jià)中指示菌的培養(yǎng)。4.**制備方法**:稱取23.0g培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,然后在121℃高壓下滅菌15分鐘,備用。5.**貯存條件**:需要防潮、避光、陰涼處保存。6.**微生物靈敏度試驗(yàn)**:通過接種質(zhì)控菌株,如枯草桿菌黑色變種芽孢,進(jìn)行生長情況的觀察,以確保培養(yǎng)基的適用性。7.**質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)**:遵循中國藥典2020版、USP、EP等標(biāo)準(zhǔn)。8.**包裝規(guī)格**:市面上有多種規(guī)格的0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基產(chǎn)品,如250g/瓶。9.**注意事項(xiàng)**:在配制和使用過程中,需要保證器材潔凈,穿著實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,以確保實(shí)驗(yàn)的安全性和準(zhǔn)確性。這些特點(diǎn)使得0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基在藥品檢測和微生物學(xué)研究中具有重要應(yīng)用。纖維素剛果紅預(yù)裝培養(yǎng)皿在分子生物學(xué)研究中,BHI Agar用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌,以便進(jìn)行質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和克隆。
葉酸測定培養(yǎng)基是一種專門用于測定食品中葉酸含量的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營養(yǎng)成分**:該培養(yǎng)基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作為氮源和碳源,乙酸鈉作為選擇劑和能量物質(zhì),以及氯化鈉、硫酸錳等鹽離子和多種維生素成分,為鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2,以適應(yīng)特定微生物的生長需求。3.**用途**:主要用于食品中葉酸的微生物測定,如GB5009.211-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中葉酸的測定》中所述。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水或去離子水混合,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝試管中,每管5ml,加入標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品,用無菌蒸餾水或去離子水調(diào)整體積至10ml,121℃高壓滅菌5分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株(如鼠李糖乳桿菌ATCC7469)接種待測試培養(yǎng)基,在36±1℃下培養(yǎng)20-40小時(shí),觀察生長情況,如肉湯混濁和試管呈梯度渾濁。6.**儲存條件**:應(yīng)在避光、干燥處儲存,未開封保質(zhì)期通常為三年。7.**注意事項(xiàng)**:在配制和使用過程中,應(yīng)遵循無菌操作,避免污染,確保水的潔凈程度,因?yàn)樗械娜~酸殘留或容器的污染直接影響試驗(yàn)結(jié)果。
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑是一種用于吲哚(靛基質(zhì))試驗(yàn)的試劑,其特點(diǎn)如下:1.**應(yīng)用領(lǐng)域**:主要用于鑒定腸系細(xì)菌,如大腸桿菌等,通過檢測細(xì)菌分解色氨酸生成的吲哚來進(jìn)行鑒定。2.**反應(yīng)原理**:某些細(xì)菌能夠分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚與試劑中的對二甲氨基苯甲醛結(jié)合,形成玫瑰吲哚,產(chǎn)生紅色化合物,從而進(jìn)行顯色反應(yīng)。3.**操作步驟**:首先將純培養(yǎng)物接種于適宜的培養(yǎng)基中,如色氨酸肉湯或胰蛋白水培養(yǎng)基,然后在36±1℃下培養(yǎng)24±2小時(shí)。之后加入2-4滴Kovacs試劑,混勻后立即觀察或放置室溫5-10分鐘觀察結(jié)果。4.**結(jié)果判斷**:陽性反應(yīng)表現(xiàn)為培養(yǎng)基上部有一紅色環(huán),而陰性反應(yīng)則為黃色、桔黃色或棕色。5.**試劑盒組成**:Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒包含溶液A,配制依據(jù)是將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后緩慢加入25mL濃鹽酸。6.**產(chǎn)品規(guī)格與價(jià)格**:以青島海博生物提供的產(chǎn)品為例,產(chǎn)品規(guī)格為5ml*2,價(jià)格為35元,保質(zhì)期為一年。7.**應(yīng)用范圍**:除了用于病原細(xì)菌的鑒定,還可用于食品衛(wèi)生檢測、環(huán)境控制、食品毒性檢測、水中大腸桿菌檢測、食品過敏性檢測、食品生產(chǎn)環(huán)境的清潔檢測、菌落計(jì)數(shù)及控制系統(tǒng)。乙酰胺瓊脂培養(yǎng)皿由對乙酰胺、大豆胨、瓊脂等成分組成,為微生物的生長提供了營養(yǎng)和適宜的生長環(huán)境。
伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點(diǎn)介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時(shí)加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個(gè)月。
改良的配方提高了對特定微生物的選擇性,適用于特定菌株的檢測和鑒定。RVR10瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)是一種專門用于增菌培養(yǎng)的微生物培養(yǎng)基,它具有以下特點(diǎn):1.**用途**:主要用于藥品和生物制品中大腸桿菌、沙門氏菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛膽鹽、氯化鈉、磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,氯化鈉維持滲透壓,磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀作為緩沖劑,牛膽鹽和去氧膽酸鈉作為選擇性抑菌劑。3.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先將培養(yǎng)基粉末加入蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。然后,將樣品處理后加入培養(yǎng)基中,放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18至24小時(shí),必要時(shí)可延長至48小時(shí),觀察結(jié)果。5.**應(yīng)用**:膽鹽乳糖培養(yǎng)基也用于乳品中大腸菌群的快速檢測研究,通過構(gòu)建檢測片法和細(xì)胞培養(yǎng)瓶劑法,可以快速檢測乳品中的大腸菌群。6.**選擇性**:膽鹽的存在使得培養(yǎng)基能夠選擇性地促進(jìn)革蘭氏陰性菌的生長,抑制革蘭氏陽性菌的生長,這使得BL培養(yǎng)基在分離和鑒定腸道細(xì)菌中非常有用。7.**檢測乳糖發(fā)酵能力**:由于含有乳糖,該培養(yǎng)基能夠用于檢測細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力,革蘭氏陰性細(xì)菌如大腸桿菌等通常能夠?qū)⑷樘前l(fā)酵產(chǎn)生酸或氣體。RVR10瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿