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伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于大腸桿菌和其他腸桿菌科細(xì)菌的分離和鑒別。以下是伊紅美藍(lán)瓊脂的特點介紹:1.**成分**:伊紅美藍(lán)瓊脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、伊紅Y溶液和美藍(lán)溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,而伊紅和美藍(lán)則作為pH指示劑。2.**pH值**:伊紅美藍(lán)瓊脂的pH值為7.1,適合多數(shù)腸道細(xì)菌的生長。3.**制法**:首先將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH值后進(jìn)行高壓滅菌。使用前加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50-55℃時加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻后傾注平板。4.**用途**:主要用于大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌的分離和鑒別。大腸桿菌在該培養(yǎng)基上分解乳糖產(chǎn)酸,菌落呈深紫色并帶有金屬光澤;而產(chǎn)氣腸桿菌則可能呈現(xiàn)棕色,很少有金屬光澤。5.**保存**:伊紅美藍(lán)瓊脂應(yīng)在4℃至8℃的條件下保存,避免凍結(jié),以保持其有效性。6.**有效期**:在適當(dāng)?shù)馁A存條件下,伊紅美藍(lán)瓊脂的有效期通常為三個月。
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實驗的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶嶒灧褪痔住?準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)是一種選擇性培養(yǎng)基,用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),以下是其特點:1.**用途**:專門用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),也適用于其他腸道菌的選擇性分離。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-賴氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、苯酚紅和瓊脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**檢驗原理**:酵母浸粉提供維生素和輔助因子,木糖、乳糖和蔗糖作為可發(fā)酵碳源。賴氨酸的加入有助于鑒別沙門氏菌。沙門氏菌發(fā)酵木糖產(chǎn)酸,產(chǎn)生的脫羧酶使賴氨酸脫羧,導(dǎo)致pH升高。硫代硫酸鈉及檸檬酸鐵銨與硫化氫反應(yīng),產(chǎn)生黑色硫化鐵,苯酚紅作為pH指示劑,去氧膽酸鹽抑制革蘭氏陽性菌的生長。4.**用法**:稱取57g培養(yǎng)基,溶解在1000ml蒸餾水中,不要過分加熱,冷至50-55℃時傾入無菌平皿,部分開蓋干燥2小時,然后蓋上備用。無需高壓滅菌,在24小時內(nèi)使用。5.**微生物質(zhì)控**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗,如腸炎沙門氏菌CMCC50760、大腸埃希氏菌ATCC25922、福氏志賀氏菌CMCC51572等,觀察其在XLD培養(yǎng)基上的生長特征。
四號瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化鈉:5.0g-無水亞硫酸鈉:3.0g-十二烷基硫酸鈉:0.5g-豬膽汁粉:5.0g-雷佛奴爾:0.03g-慶大霉素:500U-瓊脂:15.0g-pH值約為8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉,加入到1L蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-冷卻至50-55℃時,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。-待凝固后備用。4.**檢驗原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子。-氯化鈉維持均衡的滲透壓。-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長。-檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉、牛膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌。-霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強其生長。-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。改良的配方提高了對特定微生物的選擇性,適用于特定菌株的檢測和鑒定。
沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)沙門氏菌和志賀氏菌的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**用途**:主要用于沙門氏菌和志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng),也適用于其他腸道致病菌如小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌等。2.**成分**:包含牛肉粉、示月胨、乳糖、三號膽鹽、枸櫞酸鈉、硫代硫酸鈉、枸櫞酸鐵、中性紅、煌綠和瓊脂,pH值控制在6.9-7.1。3.**檢驗原理**:乳糖作為可發(fā)酵糖類,三號膽鹽、枸櫞酸鈉和煌綠用于抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)大腸菌群和變形桿菌,硫代硫酸鈉和枸櫞酸鐵用于檢測硫化氫產(chǎn)生,中性紅作為pH指示劑。4.**用法**:稱取培養(yǎng)基63.53克,溶解于1000ml蒸餾水中,加熱煮沸不必高壓蒸汽滅菌,冷至45-50℃倒成平板。5.**生長現(xiàn)象**:沙門氏菌在SS培養(yǎng)基上通常表現(xiàn)為無色菌落,可能帶有黑色中心,志賀氏菌為較小的透明菌落。6.**應(yīng)用**:除了用于病原菌的分離培養(yǎng),還可用于研究多重耐藥細(xì)菌的分離鑒定及介導(dǎo)抗性基因水平轉(zhuǎn)移元件的檢測。7.**產(chǎn)品規(guī)格與價格**:市面上有250g的產(chǎn)品規(guī)格,價格為170元,保質(zhì)期為三年。
胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿是微生物學(xué)領(lǐng)域中常用的一種實驗工具,其在分離、培養(yǎng)和鑒定微生物方面發(fā)揮著重要作用。真桿菌選擇性瓊脂平板
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,具有以下特點和用途:1.**成分**:該培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉幫助維持滲透壓。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性增菌培養(yǎng),也可用于MPN值測定和消毒劑消毒效果的測試。4.**添加劑**:在使用時,需要添加多粘菌素B以抑制雜菌的生長,促進(jìn)目標(biāo)微生物蠟樣芽孢桿菌的生長。多粘菌素B的添加量根據(jù)產(chǎn)品說明進(jìn)行,例如每100ml培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培養(yǎng)基添加1支多粘菌素B(2.25萬單位)。5.**制備方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,煮沸后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后冷卻至50℃左右,加入多粘菌素B,混勻后無菌分裝于滅菌試管中備用。6.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在30℃下培養(yǎng)48小時,應(yīng)觀察到良好的生長和溶液混濁,以驗證培養(yǎng)基的有效性。