酚紅葡萄糖肉湯(PhenolRedGlucoseBroth)是一種常用的微生物學培養(yǎng)基,主要用于鑒定細菌是否具有發(fā)酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酚紅葡萄糖肉湯的配方包含月示胨(或稱為蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持滲透壓;酚紅作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌10-15分鐘。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝試管,每管3ml。5.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在厭氧條件下35℃培養(yǎng)24小時,培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色,表明細菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸。6.**用途**:酚紅葡萄糖肉湯用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(SN標準),也用于檢測大腸菌群。7.**結(jié)果觀察**:如果培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色,說明細菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸;如果培養(yǎng)基顏色不變或紅色加深,說明該微生物葡萄糖發(fā)酵陰性。8.**儲存條件**:避光,密封,陰涼干燥處保存。不同的微生物對培養(yǎng)基的要求差異較大,因此在選擇水瓊脂培養(yǎng)基時需要考慮具體的研究目的和微生物的特性。MD平板
細菌固體分離培養(yǎng)基是用于分離和培養(yǎng)細菌的固體培養(yǎng)基,通常包含瓊脂作為凝固劑。這種培養(yǎng)基能夠為細菌提供穩(wěn)定的生長環(huán)境,并有助于觀察微生物的菌落特征。以下是細菌固體分離培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點:1.**成分**:細菌固體分離培養(yǎng)基通常包含蛋白質(zhì)來源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、無機鹽(如氯化鈉)和瓊脂等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值對細菌的生長至關(guān)重要,通常需要調(diào)節(jié)至適宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**滅菌**:培養(yǎng)基在制備過程中需要進行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘。4.**用途**:主要用于細菌的分離、計數(shù)和鑒定。通過稀釋倒平板法、涂布平板法或平板劃線法等技術(shù),可以從混合的微生物群體中分離出單一的細菌菌落。5.**保存**:培養(yǎng)基通常在室溫、避光、干燥的條件下保存。6.**操作**:在無菌條件下操作,避免污染。使用時,將培養(yǎng)基加熱至液態(tài),然后倒入無菌培養(yǎng)皿中,冷卻凝固后即可用于接種細菌。7.**菌落特征**:不同種類的細菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落具有特定的形態(tài)特征,如大小、形狀、顏色、邊緣等,這些特征可以用于細菌的鑒定。綜合蘇通瓊脂結(jié)核桿菌的增菌培養(yǎng)平板木醋桿菌的培養(yǎng)基通常需要含有適量的碳源,如葡萄糖、蔗糖等,以提供細菌生長和合成細菌纖維素所需的能量。
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特點:1.**無血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,這些添加劑有助于抑制其他非目標微生物的生長,從而提高目標彎曲桿菌的分離率。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時后,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),以及瓊脂作為固化劑。這些成分為細菌的生長提供了必需的營養(yǎng)物質(zhì),并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物。6.**應用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會推薦使用,適用于從食品、動物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌。由于雙歧桿菌是厭氧菌,PYG培養(yǎng)基需要在厭氧或微需氧條件下使用,以確保細菌的正常生長 。
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基。除了用于分離血鏈球菌外,TYC培養(yǎng)基也可以用于制備變形鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亞硫酸鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,瓊脂作為凝固劑,pH值調(diào)整至7.3±0.2(25℃)。TYC培養(yǎng)基通過其成分提供了細菌生長所需的氮源、碳源、維生素和生長因子。其中,L-胱氨酸和亞硫酸鈉有助于抑制某些非目標細菌的生長,而促進目標鏈球菌的生長。此外,TYC培養(yǎng)基也可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加其選擇性。在實驗室中,TYC培養(yǎng)基通常按照以下方法配制:1.稱取98.0g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。4.滅菌結(jié)束后搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。5.如有需要,培養(yǎng)基冷卻至50~55℃時,可選擇性添加過濾除菌的桿菌肽0.2U/ml以增加選擇性。TYC培養(yǎng)基在微生物學研究和臨床診斷中具有重要應用,特別是在口腔微生物的檢測和研究中。水瓊脂培養(yǎng)基的凝膠結(jié)構(gòu)在不同溫度下可能會發(fā)生變化,因此需要根據(jù)微生物的特性調(diào)控培養(yǎng)溫度。三糖鐵(TSI)瓊脂平板
PYG培養(yǎng)基的干粉應在避光、干燥處保存,未開封的保質(zhì)期通常為三年。使用后應立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊 。MD平板
M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基(M-EndoAnti-corrosionMedium)是一種用于微生物檢測的培養(yǎng)基,主要用于水中大腸菌群的膜過濾法檢測。以下是它的一些特點和配制方法:1.**配方**:M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基的配方包含胰胨、蛋白胨、酵母浸粉、乳糖、氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、硫酸十二烷基鈉、去氧膽酸鈉和亞硫酸鈉等成分,以及作為指示劑的堿性品紅。2.**配制方法**:通常稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的無水乙醇和蒸餾水,加熱至沸騰以幫助溶解。配制好的培養(yǎng)基通常需要在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:這種培養(yǎng)基專門用于檢測飲用水、廢水、乳制品和食品中的大腸菌群,是執(zhí)行標準方法的一部分,如美國公共衛(wèi)生協(xié)會(APHA)所推薦的方法。4.**貯藏條件**:配制好的培養(yǎng)基通常需要在2-8°C下避光保存,以保持其有效性。5.**結(jié)果觀察**:在M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基上,乳糖發(fā)酵型的大腸桿菌和大腸菌群會產(chǎn)生紅色至深紅色的菌落,帶有金色金屬光澤,而非乳糖發(fā)酵型微生物則產(chǎn)生無色透明菌落。6.**產(chǎn)品規(guī)格**:M-遠藤氏防腐培養(yǎng)基通常以250g/瓶的規(guī)格出售,并且有較長的保存期限,一般為3年。7.**注意事項**:在配制和使用過程中,應避免攝入、吸入和皮膚接觸,以確保操作安全。MD平板