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四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點(diǎn)和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-無(wú)水亞硫酸鈉:3.0g/L-十二烷基硫酸鈉:0.5g/L-豬膽粉:5.0g/L-利凡諾:0.03g/L-慶大霉素:500U/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;-氯化鈉維持均衡的滲透壓;-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長(zhǎng);-十二烷基硫酸鈉、豬膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH值可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;-霍亂弧菌對(duì)酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強(qiáng)其生長(zhǎng);-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉培養(yǎng)基,加入1L蒸餾水或去離子水,加熱煮沸充分溶解,冷卻至50℃左右,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。4.**使用方法**:-從冷藏柜中取出平板皿,并恢復(fù)至室溫。-將包裝整體送入試驗(yàn)地點(diǎn)。-試驗(yàn)或接種。-將平板從潔凈室取出,按規(guī)定的溫度和時(shí)間倒置培養(yǎng)。-觀察、計(jì)數(shù)。巴氏芽孢桿菌的芽孢具有多層保護(hù)結(jié)構(gòu),包括芽孢外殼和芽孢皮層,這些結(jié)構(gòu)由多種蛋白質(zhì)組成。TSAG平板
CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的選擇性培養(yǎng)基。其配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、氯化鈉、去氧膽酸鈉、硫酸鎂、瓊脂、Irgasan、中性紅、結(jié)晶紫和氯化鍶等成分,pH值約為7.5±0.1(25℃)。這種培養(yǎng)基通過其成分的選擇性作用,可以有效地促進(jìn)目標(biāo)菌的生長(zhǎng),同時(shí)抑制其他非目標(biāo)菌。**CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)的用途**:主要用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(GB標(biāo)準(zhǔn))。**添加劑**:每瓶需配套添加CIN-1添加劑,每200mlCIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加1支HB0269-2。**配制方法**:稱取58.0gCIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ),加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶200ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50℃左右時(shí),加入一支過濾除菌的CIN-1添加劑(含頭孢菌素3mg,新生霉素0.5mg),混勻,傾入無(wú)菌平皿。**檢驗(yàn)原理**:胰蛋白胨和酵母浸粉提供菌體生長(zhǎng)所需要的氮源、碳源和微量元素;甘露醇作為可發(fā)酵碳源;氯化鈉維持培養(yǎng)基體系滲透壓;硫酸鎂提供菌體生長(zhǎng)的微量元素;去氧膽酸鈉和結(jié)晶紫能夠抑制革蘭氏陽(yáng)性菌;中性紅作為酸堿指示劑;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。SPS預(yù)裝培養(yǎng)皿小牛浸液瓊脂的pH值通??刂圃?.4±0.2(25℃),這為微生物生長(zhǎng)提供了適宜的酸堿環(huán)境 。
BM7培養(yǎng)基(ATCCMedium2870)是一種專門用于培養(yǎng)韌皮桿菌屬(Liberibacter)的微生物培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌。以下是BM7培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:-α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate):2g-ACES緩沖液(ACES):10g-氫氧化鉀(KOH):3.75g-去離子水(DIWater):550ml-瓊脂(Agar)(如果需要固體培養(yǎng)基):15g-胎牛血清(FetalBovineSerum):150ml-TMN-FH培養(yǎng)基(SigmaT1032):300ml2.**配制方法**:-首先,將上述干粉成分溶解在550ml的去離子水中。-調(diào)節(jié)pH至6.9,并在121°C下高壓滅菌15分鐘。-冷卻后,無(wú)菌地加入胎牛血清和TMN-FH培養(yǎng)基。3.**用途**:-主要用于培養(yǎng)和維持韌皮桿菌屬(Liberibacter)的生長(zhǎng)。4.**保存條件**:-粉末固體培養(yǎng)基應(yīng)密封保存于陰涼干燥處。-液體培養(yǎng)基應(yīng)在2-8°C下避光保存。5.**注意事項(xiàng)**:-配制過程中應(yīng)避免吸入、攝入或皮膚接觸。-應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行配制,并佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備,如口罩、手套和護(hù)目鏡。這種培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著重要的應(yīng)用,尤其是在研究和診斷與韌皮桿菌相關(guān)的植物疾病方面。
乙基紫疊氮鈉肉湯(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一種用于微生物培養(yǎng)的選擇性培養(yǎng)基,特別適合于鏈球菌的增菌培養(yǎng)。以下是它的一些特點(diǎn)和用法:**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、疊氮鈉和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),為細(xì)菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉可以抑制革蘭氏陰性細(xì)菌的生長(zhǎng),特別是對(duì)變形桿菌的抑制效果好。4.**應(yīng)用**:主要用于鏈球菌的增菌培養(yǎng),也可用于其他需氧菌和兼性厭氧菌的培養(yǎng)。**配制方法**:1.稱取35.8g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水。2.加熱攪拌至完全溶解。3.分裝后,在121℃高壓下滅菌15分鐘。**質(zhì)量控制**:-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行pH值、無(wú)菌性檢查和適用性檢查。-培養(yǎng)基的保存應(yīng)避光、密封,并在已驗(yàn)證的條件下貯藏。**應(yīng)用**:-用于鏈球菌的分離培養(yǎng),通過觀察菌落的生長(zhǎng)情況和特征進(jìn)行鑒定。**注意事項(xiàng)**:-在配制和操作過程中,應(yīng)避免攝入、吸入、皮膚接觸,并在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備??耸想p糖鐵試驗(yàn)時(shí)間通??刂圃?8-24小時(shí),以確保細(xì)菌發(fā)酵充分且不過度,避免影響判斷結(jié)果。
酪蛋白瓊脂是一種專門用于微生物學(xué)研究的培養(yǎng)基,尤其適用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:酪蛋白瓊脂的基礎(chǔ)成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、瓊脂和溴百里香酚蘭。其中,酪蛋白作為主要的氮源和蛋白分解能力的指示劑,牛肉浸粉提供額外的氮源和維生素,氯化鈉維持滲透壓平衡,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,溴百里香酚蘭作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃),以保證細(xì)菌在比較好pH環(huán)境下生長(zhǎng)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無(wú)菌。4.**使用方法**:稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到1升蒸餾水中,加熱至完全溶解,然后進(jìn)行滅菌處理。冷卻至適當(dāng)溫度后倒入培養(yǎng)皿中,待凝固后用于微生物的培養(yǎng)。5.**培養(yǎng)特征**:在酪蛋白瓊脂上,蠟樣芽孢桿菌能產(chǎn)生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周圍的培養(yǎng)基形成透明圈。這種透明圈的形成是鑒定蠟樣芽孢桿菌的重要依據(jù)。同時(shí),溴百里香酚蘭的顏色變化(由綠變藍(lán))也有助于觀察結(jié)果。6.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來(lái)驗(yàn)證培養(yǎng)基的質(zhì)量。血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)可用于觀察細(xì)菌生長(zhǎng)引起的溶血現(xiàn)象,這有助于細(xì)菌的鑒定。TSAG平板
由于其營(yíng)養(yǎng)成分的豐富性,不同類型的微生物在血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)上能夠迅速生長(zhǎng),并形成明顯的菌落。TSAG平板
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點(diǎn)和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無(wú)油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營(yíng)養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長(zhǎng)所需的氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長(zhǎng),通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動(dòng)導(dǎo)致的。5.**儲(chǔ)存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲(chǔ)存。TSAG平板