NGKG瓊脂基礎是一種用于食品中蠟樣芽孢桿菌分離培養(yǎng)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:NGKG瓊脂基礎的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化鈉、甘氨酸、苯酚紅和瓊脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持滲透壓;甘氨酸提供氮源;苯酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。2.**pH調節(jié)**:NGKG瓊脂基礎的pH值通常調節(jié)在6.8±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加物**:在冷卻至50℃左右時,需要加入20%卵黃液100mL(卵黃液制備:取無菌卵黃液20mL,生理鹽水80mL,混勻)。卵黃液提供卵磷脂,產(chǎn)卵磷脂酶的細菌可水解卵磷脂,使其菌落周圍形成一個白色的沉淀環(huán)。5.**抗生物質**:每200mL培養(yǎng)基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革蘭氏陰性細菌生長。6.**用途**:NGKG瓊脂基礎主要用于食品中蠟樣芽孢桿菌的分離培養(yǎng)。7.**培養(yǎng)特征**:在30℃±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時后,典型的蠟樣芽孢桿菌在NGKG瓊脂基礎上表現(xiàn)為淺紅色菌落,邊緣不規(guī)則,有卵磷脂沉淀環(huán)。8.**質量控制**:通過接種質控菌株并觀察培養(yǎng)特征來驗證培養(yǎng)基的質量。 不同的微生物對培養(yǎng)基的要求差異較大,因此在選擇水瓊脂培養(yǎng)基時需要考慮具體的研究目的和微生物的特性。改良Campy-Cefex瓊脂平板
嗜熱脂肪桿菌恢復瓊脂培養(yǎng)基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一種專門用于滅菌與消毒鑒定試驗的微生物培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點和用途:1.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和瓊脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可發(fā)酵的糖類,作為碳源;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值為7.1±0.2(25℃),為嗜熱脂肪桿菌的生長提供了適宜的環(huán)境。3.**用途**:主要用于滅菌與消毒鑒定試驗,通過觀察嗜熱脂肪桿菌在該培養(yǎng)基上的生長情況來判斷滅菌和消毒的效果。4.**使用方法**:稱取35g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,然后在115℃下高壓滅菌30分鐘。5.**質量控制**:使用嗜熱脂肪桿菌ATCC7953作為質控菌株,培養(yǎng)條件為56±1℃,24小時,生長率應達到PR≥0.7,表現(xiàn)為生長良好。6.**儲存條件與保質期**:貯存于避光、干燥處,未開封的保質期為三年。7.**注意事項**:在稱量時應注意防塵,佩戴口罩操作以避免呼吸道不適;使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊;質檢報告可以登錄相關網(wǎng)站下載。平板計數(shù)瓊脂平板CAS培養(yǎng)基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保證微生物的生長和鐵載體的活性 。
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特點:1.**無血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,這些添加劑有助于抑制其他非目標微生物的生長,從而提高目標彎曲桿菌的分離率。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時后,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),以及瓊脂作為固化劑。這些成分為細菌的生長提供了必需的營養(yǎng)物質,并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物。6.**應用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會推薦使用,適用于從食品、動物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌。卵磷脂和吐溫80的加入使得培養(yǎng)基能夠中和樣品中的防腐劑,這對于化妝品等含有防腐劑的樣品尤為重要。
濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于分離和計數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。它通常用于水或其他樣品中腸球菌的濾膜法分離或計數(shù)。**特點**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,疊氮化鈉作為抑菌劑抑制非腸球菌生長,TTC作為顯色劑使腸球菌菌落呈現(xiàn)紅色。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應用**:適用于水和污水中腸球菌的檢測,也可用于食品樣本中腸球菌的分離和計數(shù)。4.**配制方法**:稱取培養(yǎng)基42g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至45-50℃時傾入無菌平皿,備用。無需高壓滅菌。5.**結果觀察**:腸球菌在濾膜腸球菌瓊脂上通常形成紅色菌落,便于識別和計數(shù)。濾膜腸球菌瓊脂因其高選擇性和特異性,是檢測水和食品樣本中腸球菌污染的重要工具。BHI瓊脂能夠支持包括細菌、酵母和霉菌在內(nèi)的多種微生物的生長,尤其適合培養(yǎng)營養(yǎng)苛求的細菌。平板計數(shù)瓊脂平板
DCR培養(yǎng)基通常包含酵母浸膏、酪蛋白水解物、葡萄糖、無機鹽等,這些為植物細胞提供碳源、氮源、維生素。改良Campy-Cefex瓊脂平板
胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎是一種用于微生物學實驗的培養(yǎng)基,主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測試實驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:TSSB基礎的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化鈉、無水磷酸氫二鉀、葡萄糖和瓊脂等。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化鈉5.0克、無水磷酸氫二鉀2.5克、葡萄糖2.5克和瓊脂12.0克。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加脫纖維羊血使用,以提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。5.**檢驗原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培養(yǎng)基中作為營養(yǎng)物質提供菌體生長所需的碳源、氮源、維生素及礦質元素等;無水磷酸二氫鈉作為pH緩沖體系;瓊脂作為凝固劑;脫纖維羊血提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。6.**用法**:稱取本品42.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃時,加入5-10ml無菌脫纖維羊血,混勻后傾注平板,備用。7.**質量控制和典型特征**:在30-32℃培養(yǎng)18-24小時,蠟樣芽孢桿菌典型特征為在菌落周圍呈現(xiàn)β型完全溶血的溶血環(huán)。改良Campy-Cefex瓊脂平板