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濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于分離和計(jì)數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。它通常用于水或其他樣品中腸球菌的濾膜法分離或計(jì)數(shù)。**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,疊氮化鈉作為抑菌劑抑制非腸球菌生長,TTC作為顯色劑使腸球菌菌落呈現(xiàn)紅色。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:適用于水和污水中腸球菌的檢測,也可用于食品樣本中腸球菌的分離和計(jì)數(shù)。4.**配制方法**:稱取培養(yǎng)基42g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至45-50℃時(shí)傾入無菌平皿,備用。無需高壓滅菌。5.**結(jié)果觀察**:腸球菌在濾膜腸球菌瓊脂上通常形成紅色菌落,便于識別和計(jì)數(shù)。濾膜腸球菌瓊脂因其高選擇性和特異性,是檢測水和食品樣本中腸球菌污染的重要工具。卵磷脂和吐溫80的加入使得培養(yǎng)基能夠中和樣品中的防腐劑,這對于化妝品等含有防腐劑的樣品尤為重要。卵黃氯化鈉瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細(xì)菌),此時(shí)瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)(PalcamAgarBase)是一種用于分離單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的特點(diǎn)如下:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、檸檬酸鐵銨、七葉苷、氯化鋰、酚紅和瓊脂等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為李斯特氏菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,從而提高對李斯特氏菌的選擇性。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**配制方法**:通常稱取71.9g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。使用時(shí),冷卻至50℃,加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌培養(yǎng)皿。6.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時(shí),會水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。
克羅諾桿菌篩選肉湯(CronobacterScreeningBroth,簡稱CSB培養(yǎng)基)是一種用于檢測環(huán)境和食品中克羅諾桿菌的選擇性培養(yǎng)基??肆_諾桿菌是一種重要的食源性的病原體,能夠引起新生兒和嬰兒的嚴(yán)重疾病,如壞死性小腸結(jié)腸炎、敗血癥和腦膜炎。以下是克羅諾桿菌篩選肉湯的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方**:-蛋白胨:10.0g-牛肉浸粉:3.0g-氯化鈉:5.0g-溴甲酚紫:0.004g-蔗糖:10.0g-萬古霉素:0.01g-pH:7.4+/-0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取28gCSB培養(yǎng)基粉末,用1000ml去離子水重懸。-在121°C下滅菌15分鐘。-冷卻至大約50°C時(shí),加入萬古霉素(每100ml培養(yǎng)基中加入1mg萬古霉素)。-混勻后分裝到無菌容器中。3.**工作原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源。-氯化鈉維持滲透壓平衡。-蔗糖作為克羅諾桿菌可發(fā)酵的糖類。-溴甲酚紫作為pH指示劑,其變色范圍為pH5.2(黃色)至pH6.8(紫色)。-發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸,使得培養(yǎng)基的pH下降,溴甲酚紫由紫色變?yōu)辄S色。4.**用途**:-CSB培養(yǎng)基用于檢測環(huán)境和食品中的克羅諾桿菌。CAS培養(yǎng)基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保證微生物的生長和鐵載體的活性 。
改良R2A瓊脂(ModifiedR2Amedium)是一種應(yīng)用的低營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于微生物的分離、計(jì)數(shù)和鑒定,特別是在水質(zhì)檢測中用于測定細(xì)菌總數(shù)。以下是改良R2A瓊脂的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氫二鉀-無水硫酸鎂-酸鈉-瓊脂2.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于純化水中菌落總數(shù)的測定。-適用于EP(歐洲藥典)、USP(美國藥典)、ChP(中國藥典)標(biāo)準(zhǔn)。4.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍。-進(jìn)行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。5.**保存條件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事項(xiàng)**:-在稱量和操作過程中應(yīng)注意無菌操作,避免微生物污染。-使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。7.**應(yīng)用**:-在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有廣的應(yīng)用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:質(zhì)控菌株接種后于30-35℃需氧培養(yǎng)48-120小時(shí),用于評估培養(yǎng)基的性能。改良R2A瓊脂因其營養(yǎng)豐富、操作簡便和應(yīng)用廣,成為實(shí)驗(yàn)室中常用的培養(yǎng)基之一。巴氏芽孢桿菌的芽孢因其高抵抗力和在惡劣條件下存活的能力,在生物技術(shù)領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用潛力。Dubos油酸瓊脂培養(yǎng)皿
由于雙歧桿菌是厭氧菌,PYG培養(yǎng)基需要在厭氧或微需氧條件下使用,以確保細(xì)菌的正常生長 。卵黃氯化鈉瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
CATC瓊脂是一種用于分離和培養(yǎng)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基,特別適用于食品和飲料中腸球菌的分離培養(yǎng)。以下是它的一些特點(diǎn):1.**成分**:含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氫鉀、檸檬酸鈉、吐溫80、碳酸鈉、疊氮鈉和紅四氮唑(TTC)等成分,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.0±0.2(25℃),適合腸球菌的生長。3.**選擇性**:疊氮鈉可以抑制革蘭氏陰性菌的生長,而紅四氮唑(TTC)可以作為指示劑,糞腸球菌能將TTC還原成一種酸性的偶氮染料,顯示為深紅色菌落。4.**應(yīng)用**:主要用于食品和飲料中腸球菌的分離培養(yǎng),也可用于生活飲用水中腸球菌的計(jì)數(shù)。5.**配制方法**:通常稱取58.5g的培養(yǎng)基粉末,加熱煮沸溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至50-55℃時(shí)傾入無菌平皿備用,無需高壓滅菌。6.**質(zhì)量控制**:質(zhì)控菌株如糞腸球菌(ATCC29212)和大腸埃希氏菌(ATCC25922)等在CATC瓊脂上的生長情況可以用于評估培養(yǎng)基的性能。7.**儲存條件**:CATC瓊脂通常在避光、干燥處保存,保質(zhì)期可達(dá)三年。8.**用途**:除了用于食品和飲料中腸球菌的分離外,還適用于水質(zhì)檢測中的腸球菌計(jì)數(shù)。卵黃氯化鈉瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿