富集培養(yǎng)基是一種特殊的培養(yǎng)基,它的設(shè)計(jì)旨在促進(jìn)某類特定微生物的生長(zhǎng)和繁殖,同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。這種培養(yǎng)基常用于從環(huán)境樣品中分離和富集目標(biāo)微生物,如細(xì)菌、或古菌等。以下是富集培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**特定營(yíng)養(yǎng)添加**:富集培養(yǎng)基通常包含有利于目標(biāo)微生物生長(zhǎng)的特定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物、酸堿度調(diào)節(jié)劑、抗生物質(zhì)等。2.**選擇性抑制**:通過(guò)添加某些化學(xué)物質(zhì),如染色劑、結(jié)構(gòu)類似物和食鹽等,抑制非目標(biāo)微生物的生長(zhǎng)。3.**環(huán)境條件控制**:根據(jù)目標(biāo)微生物對(duì)pH、溫度、氧氣需求等條件的特殊要求,調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件以促進(jìn)其生長(zhǎng)。4.**促進(jìn)復(fù)蘇**:某些情況下,富集培養(yǎng)基可以用來(lái)促進(jìn)處于休眠狀態(tài)的微生物復(fù)蘇,從而提高分離效率。5.**應(yīng)用廣**:富集培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、環(huán)境保護(hù)、食品檢測(cè)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。6.**操作過(guò)程**:包括樣本采集、稀釋、選擇適當(dāng)?shù)母患囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件、以及后續(xù)的分離和鑒定。7.**連續(xù)富集培養(yǎng)**:有時(shí)需要通過(guò)連續(xù)轉(zhuǎn)移培養(yǎng)來(lái)逐步提高目標(biāo)微生物的比例,尤其是在處理難以培養(yǎng)的微生物時(shí)。水瓊脂培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究的不同領(lǐng)域,包括菌落計(jì)數(shù)、分離純培養(yǎng)、鑒定和抗生物質(zhì)敏感性測(cè)試等。藥敏試驗(yàn)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽(yáng)性球菌,常以成對(duì)或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮?dú)饧?%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長(zhǎng)良好。對(duì)于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時(shí),需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營(yíng)養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標(biāo)細(xì)菌能夠在抑制雜菌的同時(shí)良好生長(zhǎng)。例如,改良愛(ài)德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營(yíng)養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌。在實(shí)驗(yàn)室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個(gè)多步驟的過(guò)程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進(jìn)行生化試驗(yàn)和藥敏分析等。通過(guò)這些步驟,可以準(zhǔn)確地識(shí)別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。假單胞菌瓊脂F(xiàn)培養(yǎng)皿BHI培養(yǎng)基可用于從臨床標(biāo)本中進(jìn)行需氧細(xì)菌的初步分離,也可用于培養(yǎng)單增李斯特菌、葡萄球菌等。
TGY肉湯培養(yǎng)基(TryptoneGlucoseYeastBrothMedium)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于芽孢菌的培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點(diǎn)和用途:1.**配方成分**:TGY肉湯培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(或胰酪蛋白胨)、酵母浸粉、葡萄糖和瓊脂。胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、維生素和礦物質(zhì),葡萄糖作為碳源和能源,瓊脂用于固化培養(yǎng)基。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0至7.5之間,為微生物提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:TGY肉湯培養(yǎng)基主要用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別是對(duì)于需要營(yíng)養(yǎng)豐富環(huán)境的細(xì)菌,如芽孢桿菌屬的細(xì)菌。它也適用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和微生物的增菌培養(yǎng)。4.**配制方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,分裝于無(wú)菌容器中備用。5.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等,來(lái)驗(yàn)證培養(yǎng)基的性能。這些菌株在TGY肉湯培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng)特性。6.**儲(chǔ)存條件**:干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,室溫保存。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)避免光線直接照射,并保存于2-8℃。
濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于分離和計(jì)數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。它通常用于水或其他樣品中腸球菌的濾膜法分離或計(jì)數(shù)。**特點(diǎn)**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,疊氮化鈉作為抑菌劑抑制非腸球菌生長(zhǎng),TTC作為顯色劑使腸球菌菌落呈現(xiàn)紅色。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為腸球菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**應(yīng)用**:適用于水和污水中腸球菌的檢測(cè),也可用于食品樣本中腸球菌的分離和計(jì)數(shù)。4.**配制方法**:稱取培養(yǎng)基42g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至45-50℃時(shí)傾入無(wú)菌平皿,備用。無(wú)需高壓滅菌。5.**結(jié)果觀察**:腸球菌在濾膜腸球菌瓊脂上通常形成紅色菌落,便于識(shí)別和計(jì)數(shù)。濾膜腸球菌瓊脂因其高選擇性和特異性,是檢測(cè)水和食品樣本中腸球菌污染的重要工具。CAS培養(yǎng)基包含鉻天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化銨、鐵離子等成分,這些成分與微生物分泌的鐵載體反應(yīng)。
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作條件,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無(wú)菌的接種環(huán)、涂布器、無(wú)菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說(shuō)明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過(guò)熱,以免殺死細(xì)菌),此時(shí)瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無(wú)菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無(wú)菌操作,將待檢測(cè)的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí)。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長(zhǎng)情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍(lán)綠色或黃色菌落,這些可能是目標(biāo)弧菌。
KI培養(yǎng)基主要用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和乳糖的能力,以及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。藥敏試驗(yàn)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精氨酸)是一種專門用于培養(yǎng)支原體的培養(yǎng)基,它包含精氨酸作為生長(zhǎng)因子,適用于那些需要精氨酸才能生長(zhǎng)的支原體,如口腔支原體等。以下是該培養(yǎng)基的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方組成**:通常包含豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、葡萄糖、L-精氨酸和酚紅等成分。2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末,按照說(shuō)明書比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸餾水中。-加熱溶解并調(diào)節(jié)pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至室溫后,無(wú)菌操作下加入滅活小牛血清或馬血清(通常為200mL)和青霉素(通常為80萬(wàn)單位)。-混勻后分裝到無(wú)菌試管中備用。3.**用途**:主要用于藥品和生物制品中支原體的檢測(cè),特別是口腔支原體的培養(yǎng)和檢測(cè)。4.**培養(yǎng)條件**:通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)7-14天。5.**觀察指標(biāo)**:培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,支原體生長(zhǎng)時(shí)會(huì)因代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基的pH值,導(dǎo)致顏色變化。例如,口腔支原體分解精氨酸產(chǎn)堿,使培養(yǎng)基顏色由橙色變?yōu)榧t色。6.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種已知的質(zhì)控菌株來(lái)驗(yàn)證培養(yǎng)基的靈敏度和有效***敏試驗(yàn)瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿