使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細菌設(shè)計的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**營養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),以保證細菌的良好生長。3.**配方**:一個典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計數(shù),可以用于檢測和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時,以驗證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長情況。輕唾瓊脂培養(yǎng)皿血液增菌培養(yǎng)基含有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化鈉、葡萄糖、枸櫞酸鈉、對氨基苯甲酸、硫酸鎂、酚紅等成分。
四號瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-無水亞硫酸鈉:3.0g/L-十二烷基硫酸鈉:0.5g/L-豬膽粉:5.0g/L-利凡諾:0.03g/L-慶大霉素:500U/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;-氯化鈉維持均衡的滲透壓;-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長;-十二烷基硫酸鈉、豬膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH值可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;-霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強其生長;-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉培養(yǎng)基,加入1L蒸餾水或去離子水,加熱煮沸充分溶解,冷卻至50℃左右,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。4.**使用方法**:-從冷藏柜中取出平板皿,并恢復(fù)至室溫。-將包裝整體送入試驗地點。-試驗或接種。-將平板從潔凈室取出,按規(guī)定的溫度和時間倒置培養(yǎng)。-觀察、計數(shù)。
溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)研究的培養(yǎng)基,特別是在鑒定某些細菌對溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,這些成分為細菌的生長提供碳源、氮源、維生素和生長因子。此外,還需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一種能夠水解細菌細胞壁的酶,主要用于檢測細菌對溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.8±0.1(25℃),以保證細菌在比較好pH環(huán)境下生長。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝于燒瓶中,每瓶99ml,高壓滅菌后冷卻至50℃左右時,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混勻后分裝無菌試管,每管2.5ml,備用。5.**用途**:溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗,如GB4789.14-2014標準所述。它可以用來鑒定細菌是否能夠在溶菌酶存在的情況下生長,從而幫助鑒別不同的細菌種類。6.**添加劑**:每瓶培養(yǎng)基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶營養(yǎng)肉湯中。CAS培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于細菌鐵載體的篩選試驗,特別是在研究植物根際促生菌和微生物與植物相互作用的領(lǐng)域 。
Leeming-Notman培養(yǎng)基(LN培養(yǎng)基)是一種用于培養(yǎng)馬拉色菌屬(Malassezia)的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基的配方包含多種營養(yǎng)成分,能夠促進馬拉色菌的生長。以下是Leeming-Notman培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨(Bacteriologicalpeptone):10.0g-葡萄糖(Glucose):10.0g-酵母膏粉(Yeastextract):2.0g-牛膽鹽(Oxbile,desiccated):8.0g-單硬脂酸甘油酯(Glycerolmonostearate):0.5g-吐溫60(Tween60):5.0mL-橄欖油(Oliveoil):20mL-瓊脂(Agar):15g-去離子水(Deionizedwater):1.0L-pH值調(diào)整至5.6±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取培養(yǎng)基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調(diào)節(jié)pH值至指定范圍。-進行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃后,無菌加入添加劑。3.**用途**:-主要用于培養(yǎng)馬拉色菌屬的菌,這些菌與人類皮膚有共生關(guān)系,并且在醫(yī)學(xué)研究中具有重要意義。4.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期通常為兩年。5.**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)在無菌條件下操作。
CASO AGAR+20g/L尿素是一種用于巴氏芽孢桿菌的培養(yǎng)基,其成分包括酪蛋白胨、氯化鈉和瓊脂,pH值為7.3 。輕唾瓊脂培養(yǎng)皿
嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)瓊脂培養(yǎng)基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一種專門用于滅菌與消毒鑒定試驗的微生物培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點和用途:1.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和瓊脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可發(fā)酵的糖類,作為碳源;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值為7.1±0.2(25℃),為嗜熱脂肪桿菌的生長提供了適宜的環(huán)境。3.**用途**:主要用于滅菌與消毒鑒定試驗,通過觀察嗜熱脂肪桿菌在該培養(yǎng)基上的生長情況來判斷滅菌和消毒的效果。4.**使用方法**:稱取35g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,然后在115℃下高壓滅菌30分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用嗜熱脂肪桿菌ATCC7953作為質(zhì)控菌株,培養(yǎng)條件為56±1℃,24小時,生長率應(yīng)達到PR≥0.7,表現(xiàn)為生長良好。6.**儲存條件與保質(zhì)期**:貯存于避光、干燥處,未開封的保質(zhì)期為三年。7.**注意事項**:在稱量時應(yīng)注意防塵,佩戴口罩操作以避免呼吸道不適;使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊;質(zhì)檢報告可以登錄相關(guān)網(wǎng)站下載。輕唾瓊脂培養(yǎng)皿