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水瓊脂平板

來源: 發(fā)布時間:2024-11-27

嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)瓊脂培養(yǎng)基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一種專門用于滅菌與消毒鑒定試驗的微生物培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點和用途:1.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和瓊脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可發(fā)酵的糖類,作為碳源;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值為7.1±0.2(25℃),為嗜熱脂肪桿菌的生長提供了適宜的環(huán)境。3.**用途**:主要用于滅菌與消毒鑒定試驗,通過觀察嗜熱脂肪桿菌在該培養(yǎng)基上的生長情況來判斷滅菌和消毒的效果。4.**使用方法**:稱取35g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,然后在115℃下高壓滅菌30分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用嗜熱脂肪桿菌ATCC7953作為質(zhì)控菌株,培養(yǎng)條件為56±1℃,24小時,生長率應(yīng)達到PR≥0.7,表現(xiàn)為生長良好。6.**儲存條件與保質(zhì)期**:貯存于避光、干燥處,未開封的保質(zhì)期為三年。7.**注意事項**:在稱量時應(yīng)注意防塵,佩戴口罩操作以避免呼吸道不適;使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊;質(zhì)檢報告可以登錄相關(guān)網(wǎng)站下載。通過接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌、普通變形桿菌和鼠傷寒沙門氏菌等,培養(yǎng)后觀察菌落生長。水瓊脂平板

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濾膜腸球菌瓊脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一種用于分離和計數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。它通常用于水或其他樣品中腸球菌的濾膜法分離或計數(shù)。**特點**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、疊氮化鈉和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,疊氮化鈉作為抑菌劑抑制非腸球菌生長,TTC作為顯色劑使腸球菌菌落呈現(xiàn)紅色。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為腸球菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:適用于水和污水中腸球菌的檢測,也可用于食品樣本中腸球菌的分離和計數(shù)。4.**配制方法**:稱取培養(yǎng)基42g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,冷卻至45-50℃時傾入無菌平皿,備用。無需高壓滅菌。5.**結(jié)果觀察**:腸球菌在濾膜腸球菌瓊脂上通常形成紅色菌落,便于識別和計數(shù)。濾膜腸球菌瓊脂因其高選擇性和特異性,是檢測水和食品樣本中腸球菌污染的重要工具。TSA+青霉素酶預(yù)裝培養(yǎng)皿明膠的凝固點在28℃左右,受運輸過程的溫度及震蕩影響,出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀,此為正?,F(xiàn)象。

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輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)輕型唾液鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是使用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)進行細菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養(yǎng)基**:-稱取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。2.**接種樣本**:-將待測樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進行適當?shù)南♂尅?將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養(yǎng)**:-將接種后的培養(yǎng)皿置于35-37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48小時。4.**觀察菌落生長**:-觀察培養(yǎng)基上生長的菌落,注意菌落的顏色、形態(tài)和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進行純化培養(yǎng)。6.**進行生化試驗**:-對純化后的菌株進行一系列的生化試驗,如糖發(fā)酵試驗、CAMP試驗、膽汁七葉苷試驗等,以進一步鑒定菌種。7.**結(jié)果分析**:-根據(jù)菌落特征和生化試驗結(jié)果,結(jié)合菌株的形態(tài)學特征,進行菌種的鑒定。8.**報告結(jié)果**:-將鑒定結(jié)果整理成報告,包括菌株的名稱、數(shù)量和相關(guān)的生化特性。

酪蛋白瓊脂是一種專門用于微生物學研究的培養(yǎng)基,尤其適用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酪蛋白瓊脂的基礎(chǔ)成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、瓊脂和溴百里香酚蘭。其中,酪蛋白作為主要的氮源和蛋白分解能力的指示劑,牛肉浸粉提供額外的氮源和維生素,氯化鈉維持滲透壓平衡,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,瓊脂作為凝固劑,溴百里香酚蘭作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃),以保證細菌在比較好pH環(huán)境下生長。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘,以確保無菌。4.**使用方法**:稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入到1升蒸餾水中,加熱至完全溶解,然后進行滅菌處理。冷卻至適當溫度后倒入培養(yǎng)皿中,待凝固后用于微生物的培養(yǎng)。5.**培養(yǎng)特征**:在酪蛋白瓊脂上,蠟樣芽孢桿菌能產(chǎn)生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周圍的培養(yǎng)基形成透明圈。這種透明圈的形成是鑒定蠟樣芽孢桿菌的重要依據(jù)。同時,溴百里香酚蘭的顏色變化(由綠變藍)也有助于觀察結(jié)果。6.**質(zhì)量控制**:通過接種質(zhì)控菌株并觀察培養(yǎng)特征來驗證培養(yǎng)基的質(zhì)量。木糖明膠培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明膠、木糖、磷酸氫二鈉和酚紅等。

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使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。

卵磷脂和吐溫80的加入使得培養(yǎng)基能夠中和樣品中的防腐劑,這對于化妝品等含有防腐劑的樣品尤為重要。纖維素分解菌培養(yǎng)皿

CASO AGAR+20g/L尿素是一種用于巴氏芽孢桿菌的培養(yǎng)基,其成分包括酪蛋白胨、氯化鈉和瓊脂,pH值為7.3 。水瓊脂平板

疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)(AzideBloodAgarBase)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于從糞便、污水和其他樣本中分離和檢測鏈球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特點和配制方法:**特點**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化鈉、疊氮鈉和瓊脂等成分,其中疊氮鈉作為選擇性抑制劑,對大多數(shù)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,但允許某些革蘭氏陽性菌如鏈球菌和葡萄球菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**應(yīng)用**:除了用于分離培養(yǎng)鏈球菌和葡萄球菌,疊氮鈉血瓊脂基礎(chǔ)還可用于測定溶血反應(yīng)。4.**溶血反應(yīng)**:在該培養(yǎng)基上,可以觀察到α溶血(培養(yǎng)基變綠)、β溶血(菌落周圍培養(yǎng)基變透明)和γ溶血(培養(yǎng)基無變化)。**配制方法**:1.稱取33.2g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解。3.121℃高壓滅菌15分鐘。4.冷卻至50℃左右,加入50mL無菌羊血,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸疊氮鈉,配制時應(yīng)在通風櫥中進行,并佩戴適當?shù)膫€人防護裝備。-培養(yǎng)基中含有的疊氮鈉具有劇毒,應(yīng)妥善處理和保存。水瓊脂平板

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