錳鹽營養(yǎng)瓊脂(ManganeseNutrientAgar)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗。以下是它的一些主要特點和用途:1.**成分**:通常包含硫酸錳、蛋白胨、牛肉粉、氯化鈉和瓊脂。其中,硫酸錳的含量為0.0308g/L,蛋白胨為10.0g/L,牛肉粉為3.0g/L,氯化鈉為5.0g/L,瓊脂為15.0g/L。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),為微生物提供適宜的生長環(huán)境。3.**用途**:主要用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗,也可用于芽孢桿菌或梭菌的培養(yǎng)和孢子的形成。4.**檢驗原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂作為培養(yǎng)基的凝固劑;硫酸錳可促進芽孢的生成。5.**使用方法**:稱取本品33.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。需要注意的是,由于培養(yǎng)基中含有少量硫酸錳,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。6.**質量控制**:通過接種質控菌株,如短小芽孢桿菌CMCC(B)63202、枯草芽孢桿菌黑色變種ATCC9372等,放置于55℃需氧培養(yǎng)48小時,以驗證培養(yǎng)基的性能。某些細菌能產生尿素酶,將尿素分解產生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時變色(通常為粉紅色)。淀粉硫酸銨瓊脂培養(yǎng)皿
牛津瓊脂(OXA)基礎是一種用于分離培養(yǎng)李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長,特別是非李斯特氏菌。2.**應用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng),符合ISO和SN標準。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌平皿備用。4.**結果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養(yǎng)基上生長時,會形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環(huán)。牛津瓊脂基礎因其高選擇性和特異性,是檢測食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。麥芽糖酵母浸粉瓊脂培養(yǎng)皿BHI瓊脂能夠支持包括細菌、酵母和霉菌在內的多種微生物的生長,尤其適合培養(yǎng)營養(yǎng)苛求的細菌。
TGE肉湯(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉湯,是一種用于微生物培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作為指示劑的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉湯(含TTC)的主要用途和特點如下:1.**用途**:TGE肉湯主要用于水、牛奶和乳制品中異養(yǎng)細菌的計數(shù)。它適用于細菌總數(shù)的測定,也可用于檢測乳品中的耐熱細菌。2.**成分**:典型的TGE肉湯配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子,葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類提供能量。3.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常調節(jié)在7.0±0.2(25℃)。4.**制備方法**:將TGE肉湯的干粉溶解在蒸餾水中,加熱煮沸以幫助成分溶解,然后進行高壓滅菌。5.**使用**:通常取一定量的培養(yǎng)基加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌,然后用于微生物的培養(yǎng)。6.**指示劑**:TTC作為指示劑,當細菌代謝時,TTC會被還原成紅色的三苯基甲烷,從而便于觀察細菌的生長情況。7.**保存條件**:未開封的TGE肉湯通常在室溫下避光保存,開封后應旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊,并根據存放條件適當延長保存期。
酵母浸粉葡萄糖瓊脂(YPDA)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,尤其是在酵母菌的培養(yǎng)中。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和瓊脂。具體配方為1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固體培養(yǎng)基,加入2%瓊脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常調節(jié)在6.0±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。葡萄糖溶液滅菌后加入,以避免高溫下可能發(fā)生的化學反應導致培養(yǎng)基成分變化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培養(yǎng),也用于藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數(shù)測定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉,然后進行高壓滅菌。滅菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**儲存條件**:液體YPDA培養(yǎng)基可常溫保存;瓊脂YPDA平板在4℃可保存幾個月。7.**微生物生長特征**:不同細菌在酵母浸粉葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上的生長特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌則有黑色孢子。GAM肉湯用于厭氧菌的培養(yǎng),是一般培養(yǎng)基的基礎。它營養(yǎng)豐富,使用時無需加血,適用于各類厭氧菌的增菌 。
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
巴氏芽孢桿菌的芽孢具有多層保護結構,包括芽孢外殼和芽孢皮層,這些結構由多種蛋白質組成。淀粉硫酸銨瓊脂培養(yǎng)皿
SH培養(yǎng)基(Schenk&HildebrandtMedium)是一種用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于單子葉和雙子葉植物細胞的懸浮培養(yǎng)。它含有相對較低的銨鹽和較高的硝酸鹽,以及豐富的維生素和無機鹽,適合許多植物種類的生長。**配方組成**:-硝酸鉀(KNO3):2500.00mg/L-磷酸二氫銨(NH4H2PO4):300.00mg/L-氯化鈣(CaCl2·2H2O):200.00mg/L-硫酸鎂(MgSO4):195.34mg/L-硫酸錳(MnSO4·H2O):10.00mg/L-硼酸(H3BO3):5.00mg/L-碘化鉀(KI):1.00mg/L-鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O):0.10mg/L-硫酸鋅(ZnSO4·7H2O):1.00mg/L-硫酸銅(CuSO4·5H2O):0.20mg/L-氯化鈷(CoCl2·6H2O):0.10mg/L-硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O):15.00mg/L-EDTA二鈉(Na2EDTA·2H2O):20.00mg/L-肌醇(myo-Inositol):1000.00mg/L-鹽酸硫胺素(Thiaminehydrochloride):5.00mg/L-鹽酸吡哆醇(Pyridoxinehydrochloride):0.50mg/L-煙酸(Nicotinicacid):5.00mg/L-蔗糖(Sucrose):20000.00mg/L**配制方法**:1.用600ml滅菌后的蒸餾水溶解脫水培養(yǎng)基,用少量蒸餾水沖洗殘余培養(yǎng)基粉末。2.輕輕攪動使培養(yǎng)基完全溶解。3.加入所有熱穩(wěn)定添加劑。淀粉硫酸銨瓊脂培養(yǎng)皿