BM7培養(yǎng)基(ATCCMedium2870)是一種專門用于培養(yǎng)韌皮桿菌屬(Liberibacter)的微生物培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細菌。以下是BM7培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate):2g-ACES緩沖液(ACES):10g-氫氧化鉀(KOH):3.75g-去離子水(DIWater):550ml-瓊脂(Agar)(如果需要固體培養(yǎng)基):15g-胎牛血清(FetalBovineSerum):150ml-TMN-FH培養(yǎng)基(SigmaT1032):300ml2.**配制方法**:-首先,將上述干粉成分溶解在550ml的去離子水中。-調(diào)節(jié)pH至6.9,并在121°C下高壓滅菌15分鐘。-冷卻后,無菌地加入胎牛血清和TMN-FH培養(yǎng)基。3.**用途**:-主要用于培養(yǎng)和維持韌皮桿菌屬(Liberibacter)的生長。4.**保存條件**:-粉末固體培養(yǎng)基應(yīng)密封保存于陰涼干燥處。-液體培養(yǎng)基應(yīng)在2-8°C下避光保存。5.**注意事項**:-配制過程中應(yīng)避免吸入、攝入或皮膚接觸。-應(yīng)在通風櫥中進行配制,并佩戴適當?shù)膫€人防護裝備,如口罩、手套和護目鏡。這種培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著重要的應(yīng)用,尤其是在研究和診斷與韌皮桿菌相關(guān)的植物疾病方面。通常將卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的粉成分溶解于蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后高壓蒸汽滅菌15分鐘。LPM瓊脂培養(yǎng)皿
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測和分離細菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產(chǎn)生脲酶的細菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調(diào)節(jié)pH至7.2,過濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細菌的脲酶檢測。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時。5.**觀察指標**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當細菌產(chǎn)生的脲酶分解尿素產(chǎn)生氨時,培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質(zhì)期三年。7.**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過程中應(yīng)在無菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著廣泛的應(yīng)用,尤其是在檢測和研究能夠分解尿素的細菌方面。MiddleBrook7H10瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿血液增菌培養(yǎng)基含有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化鈉、葡萄糖、枸櫞酸鈉、對氨基苯甲酸、硫酸鎂、酚紅等成分。
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值對李斯特氏菌的生長有影響。李斯特氏菌的適生長pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值相匹配。在這個pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長并表現(xiàn)出其特有的生物學(xué)特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對微生物生長至關(guān)重要,因為它可以影響:1.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內(nèi)活性高。2.**細胞膜功能**:pH值的變化可能會干擾細胞膜的完整性和功能,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)中的pH值是通過添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會抑制李斯特氏菌的生長,或者導(dǎo)致其他非目標微生物過度生長,影響結(jié)果的準確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)能夠準確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實驗室人員需要仔細控制和監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)輕型唾液鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是使用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)進行細菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養(yǎng)基**:-稱取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。2.**接種樣本**:-將待測樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進行適當?shù)南♂尅?將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養(yǎng)**:-將接種后的培養(yǎng)皿置于35-37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48小時。4.**觀察菌落生長**:-觀察培養(yǎng)基上生長的菌落,注意菌落的顏色、形態(tài)和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進行純化培養(yǎng)。6.**進行生化試驗**:-對純化后的菌株進行一系列的生化試驗,如糖發(fā)酵試驗、CAMP試驗、膽汁七葉苷試驗等,以進一步鑒定菌種。7.**結(jié)果分析**:-根據(jù)菌落特征和生化試驗結(jié)果,結(jié)合菌株的形態(tài)學(xué)特征,進行菌種的鑒定。8.**報告結(jié)果**:-將鑒定結(jié)果整理成報告,包括菌株的名稱、數(shù)量和相關(guān)的生化特性。不同的微生物對培養(yǎng)基的要求差異較大,因此在選擇水瓊脂培養(yǎng)基時需要考慮具體的研究目的和微生物的特性。
DTA培養(yǎng)基的pH值對微生物生長有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標,對微生物的生長和繁殖有深遠的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過高或過低都可能對微生物的生長造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長環(huán)境。當培養(yǎng)基的pH值偏離這個范圍時,可能會影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細胞膜的通透性,影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進而影響微生物的生長。例如,如果pH值過低,可能會抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過高,可能會導(dǎo)致細胞膜通透性改變,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時,嚴格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長。哥倫比亞肉湯的pH值通常控制在7.3至7.5之間,為微生物生長提供適宜的酸堿環(huán)境 。厭氧卵黃瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
普通肉湯培養(yǎng)基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化鈉和水組成,這些成分為細菌提供必需的碳源等。LPM瓊脂培養(yǎng)皿
TYCSB培養(yǎng)基基礎(chǔ)(TryptoneYeastCystineSucroseBacitracinMediumBase)是一種用于分離和培養(yǎng)特定細菌的選擇性培養(yǎng)基。它的特點包括:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母膏粉、L-胱氨酸鹽酸鹽、亞硫酸鈉、氯化鈉、無水磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、無水乙酸鈉和蔗糖等,瓊脂作為凝固劑。這些成分為細菌提供氮源、碳源、維生素和生長因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:添加的桿菌肽(Bacitracin)可以抑制革蘭氏陰性菌的生長,有助于選擇性地分離革蘭氏陽性菌,特別是鏈球菌和腸球菌。4.**應(yīng)用**:主要用于變異鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離和培養(yǎng),也適用于其他鏈球菌和腸球菌的分離。5.**配制方法**:通常稱取培養(yǎng)基粉末,加入到一定量的蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。6.**質(zhì)量控制**:通過使用特定的質(zhì)控菌株進行測試,確保培養(yǎng)基支持目標菌株的生長,同時抑制非目標菌株。7.**儲存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在陰涼干燥處,配制好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2-8°C。8.**結(jié)果觀察**:在TYCSB培養(yǎng)基上,可以觀察到細菌的生長情況,用于進一步的鑒定和分析。LPM瓊脂培養(yǎng)皿