PK瓊脂培養(yǎng)基,也稱為Pikovskaya'sAgar,是一種用于檢測解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的原理基于解磷微生物在生長過程中能夠?qū)⒉蝗苄缘牧姿猁}轉(zhuǎn)化為可溶性形式,從而使得培養(yǎng)基中的磷酸鈣溶解,導致培養(yǎng)基的透明度發(fā)生變化。**配方組成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸鈣:5.0g-硫酸銨:0.5g-氯化鉀:0.2g-硫酸鎂:0.1g-硫酸錳:0.0001g-硫酸亞鐵:0.0001g-瓊脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸餾水重懸31.3g培養(yǎng)基。2.不斷攪動并加熱,煮沸1分鐘使培養(yǎng)基完全溶解。3.121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘。4.冷卻至50°C時,分裝15ml培養(yǎng)基到每個無菌培養(yǎng)皿中。**培養(yǎng)條件**:-通常在35°C下培養(yǎng)48小時。**觀察指標**:-在PK瓊脂培養(yǎng)基上生長的解磷微生物菌落周圍的培養(yǎng)基由不透明變透明,通過觀察培養(yǎng)基的透明度變化來判斷微生物是否具有解磷能力。**保存條件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事項**:-避免吸入和皮膚接觸。這種培養(yǎng)基在土壤微生物學、植物病理學和環(huán)境微生物學等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,特別是在研究植物-微生物相互作用以及微生物對土壤養(yǎng)分循環(huán)的貢獻方面。水瓊脂培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于微生物學研究的不同領(lǐng)域,包括菌落計數(shù)、分離純培養(yǎng)、鑒定和抗生物質(zhì)敏感性測試等。結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)培養(yǎng)皿
營養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實驗室進行微生物培養(yǎng)使用。營養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學測試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應(yīng)儲存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30°C的環(huán)境中儲存。玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)皿長雙歧桿菌和嬰兒雙歧桿菌在PYG培養(yǎng)基上的生長情況通常表現(xiàn)為圓形凸起,奶油色,邊緣整齊光滑的菌落 。
四號瓊脂基礎(chǔ)(No.4AgarBase)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,主要用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-無水亞硫酸鈉:3.0g/L-十二烷基硫酸鈉:0.5g/L-豬膽粉:5.0g/L-利凡諾:0.03g/L-慶大霉素:500U/L-瓊脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**檢驗原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;-氯化鈉維持均衡的滲透壓;-亞硫酸鈉可刺激弧菌生長;-十二烷基硫酸鈉、豬膽粉、利凡諾、慶大霉素和亞碲酸鉀及較高的pH值可抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;-霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感,因此該pH值可增強其生長;-瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。3.**配制方法**:-稱取53.5g干粉培養(yǎng)基,加入1L蒸餾水或去離子水,加熱煮沸充分溶解,冷卻至50℃左右,每500mL培養(yǎng)基加入配套試劑1支(SR0080)(5mg亞碲酸鉀),搖勻立即傾注平皿。4.**使用方法**:-從冷藏柜中取出平板皿,并恢復至室溫。-將包裝整體送入試驗地點。-試驗或接種。-將平板從潔凈室取出,按規(guī)定的溫度和時間倒置培養(yǎng)。-觀察、計數(shù)。
DTA培養(yǎng)基的pH值對微生物生長有影響。pH值是描述溶液酸堿性的基本指標,對微生物的生長和繁殖有深遠的影響。微生物的適應(yīng)pH范圍各不相同,不同種類的微生物對pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范圍。pH值的過高或過低都可能對微生物的生長造成不利影響。在DTA培養(yǎng)基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),這個pH值范圍是為嗜熱菌芽孢的分離培養(yǎng)而優(yōu)化的。在這個pH值下,胰酪蛋白胨能夠提供適宜的碳氮源和生長因子,而葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,瓊脂作為凝固劑,共同為嗜熱菌芽孢提供適宜的生長環(huán)境。當培養(yǎng)基的pH值偏離這個范圍時,可能會影響微生物的新陳代謝和酶活性,改變細胞膜的通透性,影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄,進而影響微生物的生長。例如,如果pH值過低,可能會抑制菌體中某些酶的活性,阻礙新陳代謝;如果pH值過高,可能會導致細胞膜通透性改變,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。因此,在配制和使用DTA培養(yǎng)基時,嚴格控制pH值是非常重要的,以確保微生物能夠在適宜的環(huán)境中生長。通常將卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的粉成分溶解于蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后高壓蒸汽滅菌15分鐘。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ),也稱為輕型唾液鏈球菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ),是一種用于分離培養(yǎng)輕型鏈球菌(綠色鏈球菌)、唾液鏈球菌(非溶血性鏈球菌)和腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些特點:1.**成分**:該培養(yǎng)基的配方中含有胰酪蛋白胨、牛肉粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、蔗糖、臺盼藍、結(jié)晶紫和瓊脂等。其中,胰酪蛋白胨和牛肉粉提供氮源和碳源,蔗糖作為可發(fā)酵的碳水化合物來源,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,臺盼藍和結(jié)晶紫作為染料提供菌落顏色,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:通過添加結(jié)晶紫和亞碲酸鉀,該培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)革蘭氏陰性桿菌和大多數(shù)革蘭氏陽性細菌的生長,而對鏈球菌和腸球菌的生長影響較小。4.**應(yīng)用**:輕唾瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)主要用于輕型鏈球菌、唾液鏈球菌和腸球菌的分離培養(yǎng),這些細菌在培養(yǎng)基上可以形成具有特征顏色的菌落,有助于后續(xù)的鑒定和分析。5.**配制方法**:通常稱取90g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,冷卻至50-55℃,加入無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。哥倫比亞肉湯為非選擇性培養(yǎng)基,大多數(shù)微生物都能在其上生長良好,因此常用于微生物的初步分離和培養(yǎng)。哥倫比亞血瓊脂平板
PYG培養(yǎng)基的干粉應(yīng)在避光、干燥處保存,未開封的保質(zhì)期通常為三年。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊 。結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)培養(yǎng)皿
變異鏈球菌(Streptococcusmutans)是一種在口腔中發(fā)現(xiàn)的細菌,與齲齒的形成有關(guān)。它是一種革蘭陽性球菌,常以成對或短鏈狀排列。在胰蛋白胨培養(yǎng)基中和含有95%氮氣及5%二氧化碳混合氣體的環(huán)境下生長良好。對于變異鏈球菌的培養(yǎng),通常使用TSA+5%脫纖維蛋白羊血(血瓊脂平板)作為培養(yǎng)基。在這種培養(yǎng)基上,變異鏈球菌的菌落特征為較?。ㄖ睆郊s1mm)、灰白色、凸起、邊緣不齊、干燥、有α溶血環(huán)。在選擇培養(yǎng)基時,需要考慮培養(yǎng)基的pH值、營養(yǎng)成分、氧氣需求和抑制劑等因素,以確保目標細菌能夠在抑制雜菌的同時良好生長。例如,改良愛德華培養(yǎng)基(Edwardmodifiedmedium)是一種常用的培養(yǎng)基,它含有血液、血清或其它營養(yǎng)成分,適合于培養(yǎng)對營養(yǎng)要求較高的細菌,如鏈球菌。在實驗室中,變異鏈球菌的培養(yǎng)和鑒定是一個多步驟的過程,包括接種、培養(yǎng)、觀察菌落特征、進行生化試驗和藥敏分析等。通過這些步驟,可以準確地識別和鑒定變異鏈球菌,從而為臨床診斷提供依據(jù)。結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)培養(yǎng)皿