BM7培養(yǎng)基(ATCCMedium2870)是一種專門用于培養(yǎng)韌皮桿菌屬(Liberibacter)的微生物培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細菌。以下是BM7培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點和配制方法:1.**配方組成**:-α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate):2g-ACES緩沖液(ACES):10g-氫氧化鉀(KOH):3.75g-去離子水(DIWater):550ml-瓊脂(Agar)(如果需要固體培養(yǎng)基):15g-胎牛血清(FetalBovineSerum):150ml-TMN-FH培養(yǎng)基(SigmaT1032):300ml2.**配制方法**:-首先,將上述干粉成分溶解在550ml的去離子水中。-調(diào)節(jié)pH至6.9,并在121°C下高壓滅菌15分鐘。-冷卻后,無菌地加入胎牛血清和TMN-FH培養(yǎng)基。3.**用途**:-主要用于培養(yǎng)和維持韌皮桿菌屬(Liberibacter)的生長。4.**保存條件**:-粉末固體培養(yǎng)基應(yīng)密封保存于陰涼干燥處。-液體培養(yǎng)基應(yīng)在2-8°C下避光保存。5.**注意事項**:-配制過程中應(yīng)避免吸入、攝入或皮膚接觸。-應(yīng)在通風櫥中進行配制,并佩戴適當?shù)膫€人防護裝備,如口罩、手套和護目鏡。這種培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中有著重要的應(yīng)用,尤其是在研究和診斷與韌皮桿菌相關(guān)的植物疾病方面。下層培養(yǎng)基成分則包括血消化湯、瓊脂、葡萄糖和酚紅溶液。這些成分為細菌提供碳源、氮源。YM瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎(chǔ)是一種用于微生物學(xué)實驗的培養(yǎng)基,主要用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測試實驗。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:TSSB基礎(chǔ)的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化鈉、無水磷酸氫二鉀、葡萄糖和瓊脂等。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化鈉5.0克、無水磷酸氫二鉀2.5克、葡萄糖2.5克和瓊脂12.0克。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加脫纖維羊血使用,以提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。5.**檢驗原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培養(yǎng)基中作為營養(yǎng)物質(zhì)提供菌體生長所需的碳源、氮源、維生素及礦質(zhì)元素等;無水磷酸二氫鈉作為pH緩沖體系;瓊脂作為凝固劑;脫纖維羊血提供紅細胞,檢測微生物溶血特性。6.**用法**:稱取本品42.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至45-50℃時,加入5-10ml無菌脫纖維羊血,混勻后傾注平板,備用。7.**質(zhì)量控制和典型特征**:在30-32℃培養(yǎng)18-24小時,蠟樣芽孢桿菌典型特征為在菌落周圍呈現(xiàn)β型完全溶血的溶血環(huán)。LK平板尿素培養(yǎng)基主要用于鑒定革蘭氏陰性菌中的尿素酶活性,如用于腸桿菌科細菌的鑒定,例如大腸埃希菌。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ),也稱為輕型唾液鏈球菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ),是一種用于分離培養(yǎng)輕型鏈球菌(綠色鏈球菌)、唾液鏈球菌(非溶血性鏈球菌)和腸球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是它的一些特點:1.**成分**:該培養(yǎng)基的配方中含有胰酪蛋白胨、牛肉粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、蔗糖、臺盼藍、結(jié)晶紫和瓊脂等。其中,胰酪蛋白胨和牛肉粉提供氮源和碳源,蔗糖作為可發(fā)酵的碳水化合物來源,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,臺盼藍和結(jié)晶紫作為染料提供菌落顏色,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃),為細菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:通過添加結(jié)晶紫和亞碲酸鉀,該培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)革蘭氏陰性桿菌和大多數(shù)革蘭氏陽性細菌的生長,而對鏈球菌和腸球菌的生長影響較小。4.**應(yīng)用**:輕唾瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)主要用于輕型鏈球菌、唾液鏈球菌和腸球菌的分離培養(yǎng),這些細菌在培養(yǎng)基上可以形成具有特征顏色的菌落,有助于后續(xù)的鑒定和分析。5.**配制方法**:通常稱取90g培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。滅菌結(jié)束后,冷卻至50-55℃,加入無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。
彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特點:1.**選擇性培養(yǎng)**:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常與特定的選擇性添加劑一起使用,如改良Karmali選擇性添加劑或彎曲桿菌選擇性添加劑,這些添加劑含有抗生物質(zhì),如萬古霉素和兩性霉素B,以抑制其他非目標微生物的生長,提高目標彎曲桿菌的分離率。2.**無血培養(yǎng)基**:某些類型的彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)是無血的,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟。無血培養(yǎng)基通常使用活性炭、硫酸亞鐵和酸鈉替代血液。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,生長環(huán)境是含氧氣5%、二氧化碳10%、氮氣85%。因此,彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長。4.**菌落特征**:在適宜的條件下,空腸彎曲桿菌在彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)中生長,形成灰色、濕潤、平鋪的菌落,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.配方:彎曲桿菌瓊脂基礎(chǔ)的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化鈉、瓊脂等,提供碳、氮源、維生素和生長因子。
使用TCBS瓊脂進行細菌分離實驗的步驟如下:1.**準備工作**:-確保實驗室無菌操作條件,穿戴適當?shù)膶嶒灧褪痔住?準備無菌的接種環(huán)、涂布器、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,稱取適量的TCBS瓊脂粉末。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL。-將混合物加熱至沸騰,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,以免殺死細菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài)。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,形成固體培養(yǎng)基平板。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法、螺旋接種法或其他適當?shù)慕臃N方法。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中。-根據(jù)實驗要求,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,觀察平板上的生長情況,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,如藍綠色或黃色菌落,這些可能是目標弧菌。
CVT瓊脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、結(jié)晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和瓊脂等成分。YM瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)瓊脂培養(yǎng)基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一種專門用于滅菌與消毒鑒定試驗的微生物培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點和用途:1.**配方成分**:該培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和瓊脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可發(fā)酵的糖類,作為碳源;瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值為7.1±0.2(25℃),為嗜熱脂肪桿菌的生長提供了適宜的環(huán)境。3.**用途**:主要用于滅菌與消毒鑒定試驗,通過觀察嗜熱脂肪桿菌在該培養(yǎng)基上的生長情況來判斷滅菌和消毒的效果。4.**使用方法**:稱取35g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,然后在115℃下高壓滅菌30分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用嗜熱脂肪桿菌ATCC7953作為質(zhì)控菌株,培養(yǎng)條件為56±1℃,24小時,生長率應(yīng)達到PR≥0.7,表現(xiàn)為生長良好。6.**儲存條件與保質(zhì)期**:貯存于避光、干燥處,未開封的保質(zhì)期為三年。7.**注意事項**:在稱量時應(yīng)注意防塵,佩戴口罩操作以避免呼吸道不適;使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊;質(zhì)檢報告可以登錄相關(guān)網(wǎng)站下載。YM瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿