一：染色液制備1、配制儲(chǔ)液：儲(chǔ)液用無(wú)水DMSO或無(wú)水EtOH配制，濃度1~5mM。注：未使用的儲(chǔ)液建議分裝后儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融。2、工作液制備：用合適的緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)液，配制濃度為1~5μM的工作液。注：工作液**終濃度建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來(lái)優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開(kāi)始比較好濃度的摸索。二：懸浮細(xì)胞染色1、加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細(xì)胞，使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細(xì)胞2~20min，不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同?？梢?0min作為起始孵育時(shí)間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。3、孵育結(jié)束，1000~1500rpm離心5min。傾倒上清液，再次緩慢加入37℃預(yù)熱的生長(zhǎng)培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。4、重復(fù)步驟3兩次以上。南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列（效果同Alexa Fluor 系列）。河南熒光染料藍(lán)色

過(guò)標(biāo)記——計(jì)算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)大于10mol。雖然過(guò)標(biāo)記的蛋白也可以使用，但可能會(huì)引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性，這些都會(huì)造成非特異性結(jié)合。過(guò)標(biāo)記還會(huì)引起熒光淬滅?？梢栽黾拥鞍谆驕p少反應(yīng)時(shí)間。3．未結(jié)合染料難以去除——盡管大部分時(shí)候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯(lián)物，但仍可能會(huì)有痕量的游離染料留在偶聯(lián)物溶液中，會(huì)使標(biāo)記計(jì)算的值偏高?？捎梅蛛x柱再次分離或透析去除。4．蛋白或蛋白偶聯(lián)物無(wú)法洗脫——不要再加緩沖液，只需再次離心一次或幾次。脂質(zhì)熒光染料DAPI羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。

熒光染料在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用1、細(xì)胞膜標(biāo)記：可以使用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜，以觀察和研究細(xì)胞膜的動(dòng)態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。2、染色體和DNA標(biāo)記：用熒光染料標(biāo)記染色體或DNA，可以觀察和分析DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)等過(guò)程3、蛋白質(zhì)標(biāo)記：通過(guò)熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì)，可以研究蛋白質(zhì)的相互作用、定位和運(yùn)動(dòng)等特性。4、細(xì)胞器標(biāo)記：使用特定波長(zhǎng)的熒光染料可以標(biāo)記和可視化細(xì)胞中的線粒體、溶酶體等細(xì)胞器。5、神經(jīng)科學(xué)應(yīng)用：熒光染料在神經(jīng)科學(xué)中也有廣泛應(yīng)用，如標(biāo)記神經(jīng)元和突觸，觀察神經(jīng)信號(hào)的傳遞等。6、基因表達(dá)分析：通過(guò)熒光染料標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物，可以定量分析基因的表達(dá)水平和細(xì)胞中的分布情況。

常用抗體標(biāo)記熒光染料的特性及其應(yīng)用

1、FITC:激發(fā)波長(zhǎng)488nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)525nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強(qiáng)度易受PH值影響，PH值降低時(shí)其熒光強(qiáng)度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長(zhǎng)488nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)519nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性，非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司SuperFluor系列（效果同AlexaFluor系列）質(zhì)優(yōu)價(jià)廉，歡迎咨詢。3、Cy3:激發(fā)波長(zhǎng)488nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)570nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè):3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)為小分子染料，非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù)，熒光強(qiáng)度低于PE。 花青類熒光染料屬于共振染料，其特征在于具有離域電荷的氮原子（兩個(gè)氮原子）之間的聚甲炔染料。

熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見(jiàn)光后，能把短波長(zhǎng)的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL(zhǎng)較長(zhǎng)的可見(jiàn)光波而反射出來(lái)，呈閃亮的鮮艷色彩。例如，酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用，也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。其中復(fù)合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料，由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個(gè)供體及一個(gè)受體熒光物分子所組成。復(fù)合染料在受體分子的激發(fā)波長(zhǎng)被激發(fā)，在供體分子的發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)射一個(gè)光子。熒光染料發(fā)展非常迅速，已開(kāi)發(fā)的用于科研和臨床應(yīng)用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見(jiàn)光及紅外的整個(gè)光譜范圍。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。貴州高分子熒光染料

Super Flour 系列在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。河南熒光染料藍(lán)色

使用螢火蟲(chóng)熒光素酶（Fluc）作為報(bào)告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像（BLI）是目前應(yīng)用*****的技術(shù)。將總信號(hào)強(qiáng)度相對(duì)于 D-熒光素注射后的時(shí)間進(jìn)行繪制，以生成時(shí)間-強(qiáng)度曲線。除了峰值信號(hào)外，還確定注射 D-熒光素后固定時(shí)間點(diǎn)（5、10、15 和 20 分鐘）的信號(hào)作為峰值信號(hào)的替代。給定時(shí)間-強(qiáng)度曲線中的信號(hào)針對(duì)曲線中的峰值信號(hào)進(jìn)行歸一化，以表示 D-熒光素注射后時(shí)間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素（腹膜內(nèi)或靜脈注射）儲(chǔ)備液：對(duì)于 20 g 小鼠，標(biāo)準(zhǔn) 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素（鉀鹽或鈉鹽）并溶解在 dPBS（不含鈣或鎂）中，**終濃度為 15 mg/mL。通過(guò)吸取 5-10 mL 無(wú)菌水來(lái)預(yù)濕 0.22 μm 過(guò)濾器。河南熒光染料藍(lán)色

南京星葉生物科技有限公司在同行業(yè)領(lǐng)域中，一直處在一個(gè)不斷銳意進(jìn)取，不斷制造創(chuàng)新的市場(chǎng)高度，多年以來(lái)致力于發(fā)展富有創(chuàng)新價(jià)值理念的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，在江蘇省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的商業(yè)口碑，成績(jī)讓我們喜悅，但不會(huì)讓我們止步，殘酷的市場(chǎng)磨煉了我們堅(jiān)強(qiáng)不屈的意志，和諧溫馨的工作環(huán)境，富有營(yíng)養(yǎng)的公司土壤滋養(yǎng)著我們不斷開(kāi)拓創(chuàng)新，勇于進(jìn)取的無(wú)限潛力，南京星葉生物科技供應(yīng)攜手大家一起走向共同輝煌的未來(lái)，回首過(guò)去，我們不會(huì)因?yàn)槿〉昧艘稽c(diǎn)點(diǎn)成績(jī)而沾沾自喜，相反的是面對(duì)競(jìng)爭(zhēng)越來(lái)越激烈的市場(chǎng)氛圍，我們更要明確自己的不足，做好迎接新挑戰(zhàn)的準(zhǔn)備，要不畏困難，激流勇進(jìn)，以一個(gè)更嶄新的精神面貌迎接大家，共同走向輝煌回來(lái)！