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光聲熒光染料脂溶

來源: 發(fā)布時間:2024-05-17

Hoechst33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。用于細胞核染色時,推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項:Hoechst33258對人體有害,請注意適當防護。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液??篃晒獯銣绶馄?P0126)可以向碧云天訂購。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作注意事項:Hoechst33342對人體有一定刺激性,請注意適當防護。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。光聲熒光染料脂溶

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三、細胞實驗D-熒光素鉀鹽體外生物發(fā)光試驗:D-熒光素鉀鹽,無菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配制)1、貼壁細胞:將細胞接種于培養(yǎng)板中孵育數(shù)小時或過夜,使細胞貼壁。懸浮細胞:可以將細胞接種于培養(yǎng)板后直接進行后續(xù)操作,無需孵育。如果倍增時間相對較短,則應考慮倍增時間進行細胞計數(shù)。2、將15mg熒光素鉀鹽溶解于1ml無菌水中,制備成100X熒光素儲備液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動至熒光素鉀鹽完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。3、用預熱好的細胞培養(yǎng)基1∶100稀釋100X熒光素儲備液(15mg/ml),配制成熒光素工作液(終濃度150μg/ml),即配即用。4、去除培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基。5、在成像前,將適量熒光素工作液加入細胞中,然后進行圖像分析。注意:成像前在37℃下對細胞進行短時間孵育可增強信號。孵育時間取決于特定的細胞類型。一般來說孵育10分鐘就足夠了,根據(jù)需要進行測試和調(diào)整。6、每隔10分鐘,**多40分鐘,使用VILBERFUSIONFX成像系統(tǒng)檢查體外生物發(fā)光,確定動力學曲線并找出細胞的峰值成像時間點福建熒光染料IR780與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機染料。

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其他細胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應用,除細胞膜研究外,我們經(jīng)常也會對一些其它細胞結(jié)構(gòu)及成分進行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細胞核等,而對于不同的細胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進行染色細胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細胞核染色,可將細胞核染成藍色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細胞骨架的染色神器,羅丹明標記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細胞形態(tài)變化時經(jīng)常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環(huán)肽(橙紅)染色的細胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍色)染色的細胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達或下調(diào)前后PDAC細胞形態(tài)的變化。

選擇熒光染料時要考慮那些因素:激發(fā)波長處的消光系數(shù)應盡可能高:消光系數(shù)是衡量可以吸收多少光子的量度。量子產(chǎn)率應該盡可能高:這是吸收光子與發(fā)射光子的比率。消光系數(shù)和量子產(chǎn)率的乘積就是亮度。熒光染料應該是光穩(wěn)定的:遺憾的是,比較不同公司染料的光穩(wěn)定性的研究并不多。光致變色行為:對于STORM實驗,您需要一個閃爍的熒光團。但是,對于分子跟蹤實驗,您***不想要閃爍的熒光團?;?死細胞滲透性。您想要的反應側(cè)基(例如HaloTag、抗體等)。當您使用多個熒光探針時,尤其是當您量化共定位時,請謹慎處理其他顏色通道中的滲色。單獨測試所有熒光探針以評估滲透。CY7 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫,是由奇數(shù)個甲基單元連接的兩個氮原子組成的化合物。

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SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1.標記效率低——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團少于4mol有以下原因:1)緩沖液中含有痕量伯銨成分,與染料反應降低了標記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液(如Tris或氨基乙酸),標記前用PBS透析。2)蛋白含量較低(≤1mg/mL)會影響標記效率。3)標記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應混合物的pH升高至~8,因為在弱堿性環(huán)境中標記反應的效率比較高。如果蛋白溶液的緩沖范圍在低pH,加入重碳酸鹽也無法將pH調(diào)節(jié)至**適水平。要么加大重碳酸鹽的量,要么將緩沖液換成PBS,或用0.1M碳酸氫鈉透析等。4)研究顯示pH升至9.0~9.4,標記效率和標記速度(只需10min)明顯改善。5)不同抗體與熒光團的反應速率不同,染料標記后保留的生物活性程度也不同,因此標準步驟也不是總有比較好的標記結(jié)果。為增加標記率,可以對同一樣品進行再標記,或減少蛋白的量加大染料的量重新標記。有研究者在室溫孵育1小時后再4℃孵育過夜,情況有所改善。PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。新疆濟南熒光染料

南京星葉生物提供多種性價比高的各類活化熒光素,例如Cy系列、Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)等。光聲熒光染料脂溶

CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫,是由奇數(shù)個甲基單元連接的兩個氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標記,對于蛋白抗體的標記,可以通過簡單的混合反應來完成結(jié)合,下面我們介紹了蛋白抗體標記的標記方法,具有一定的參考意義。一、比較好蛋白制備1)為獲得標記效果,請制備蛋白(抗體)濃度為2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值為8.5±0.5。如果pH值低于8.0,應使用1M3)如果蛋白濃度低于2mg/mL,標記效率會**降低。為獲得比較好標記效率,建議**終蛋白濃度范圍為2-10mg/mL。4)蛋白必須在不含伯胺(如Tris或甘氨酸)的緩沖液中,和銨離子,否則會影響標記效率。2.染色制備(以CY3-NHS酯為例)將無水DMSO加入CY3-NHS酯小瓶中,制備成10mM儲備液。通過移液器或渦旋混合均勻計算。使用前需先使用縮合液(500μg/mL)(HY-D0178)活化另一個可進行后續(xù)標記實驗。光聲熒光染料脂溶

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