Cy5:激發(fā)波長633/635nm,比較大發(fā)射波長670nm。1)其標記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL4通道檢測;3)適用于熒光顯微鏡技術;4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術,熒光強度低于APC。5)與單核和粒細胞非特異性結合多,易出現假陽性結果。
5、PE:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長575nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL2通道檢測;3)其熒光泯滅性強,不適用于傳統的熒光顯微鏡技術,但適用于激光共聚焦顯微鏡技術。
6、PE-TR:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長615nm。1)在BeckmanCoulter流式細胞儀的FL3通道檢測;2)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。
7、PE-AlexaFluor610:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長628nm。1)在BeckmanCoulter流式細胞儀的FL3通道檢測;2)熒光強度高;3)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。 Cy5.5含有一個游離胺基,可與多種官能團共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。光敏劑熒光染料橙色
5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料,具有廣泛的應用,作為抗體和其他探針標記,用熒光顯微鏡,流式細胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實驗。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產率和良好的水溶性,是流式細胞儀和免疫熒光中生物檢測**常用的熒光標記之一。**常用的熒光素包括用于標記蛋白質(特別是抗體)的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于標記肽和寡核苷酸的羧基熒光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯物,以及一系列具有針對細胞標記和檢測優(yōu)化的特性的質量iFluor?熒光標記染料。內蒙古熒光染料DILDiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在小動物成像中用來示蹤。
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術中非常有用的熒光染料。在熒光成像時,Cy3的背景熒光一般認為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標記蛋白,抗體,多肽等,它常見的使用是標記核酸分子(DNA和RNA)。基于熒光圖譜的相似性,Cy3可以被TAMRA,TRITC, BODIPY TMR等染料替代,在需要更明亮,更穩(wěn)定的替代物時,可以考慮使用AF547或者AF555等。
光熱***是另一個吲哚菁綠的重要應用領域。在光熱***中,吲哚菁綠可以被引入**組織,并在近紅外激光的照射下吸收光能轉化為熱能,從而使**組織受到熱損傷,達到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質使得其在光熱***中具有很高的選擇性,可以精確地破壞**組織而對正常組織幾乎沒有影響。這種精細的***方式有助于減少***的副作用,提高***效果。吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應用。在生物識別中,吲哚菁綠可以與特定的生物分子結合,通過檢測其熒光信號來實現對這些生物分子的定量分析。這種技術在生物醫(yī)學研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外,吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統的一部分,將藥物包裹在其分子結構中,并通過光***釋放藥物,實現對疾病靶點的精確***。吲哚菁綠作為一種具有優(yōu)良綠色溶解度的熒光染料,在醫(yī)學和生物領域發(fā)揮著重要的作用。它的應用領域涉及醫(yī)學影像學、光熱***、生物識別和藥物輸送等方面,并且具有較高的選擇性和精細性。隨著科學技術的不斷進步,相信吲哚菁綠將在未來更***地應用于臨床實踐中,為人類的健康和醫(yī)學科研做出更大的貢獻。D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,存在于多種發(fā)光生物體中。
一、體外生物發(fā)光試驗熒光素試劑的制備:D-熒光素,鉀鹽,無菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配置)1、用無菌水制備100X熒光素原液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動至熒光素完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin,potassiumsalt溶解于預熱好的組織培養(yǎng)基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養(yǎng)基1∶100稀釋儲存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基圖像分析前,向細胞培養(yǎng)板中添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析-注射器濾膜過濾除菌,0.2μm注:成像前在37℃下對細胞進行短時間孵育可增強信號。南京星葉生物提供多種性價比高的各類活化熒光素,例如Cy系列、Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)等。內蒙古熒光染料DIL
吲哚菁綠(Indocyanine Green,簡稱ICG)是一種廣泛應用于醫(yī)學和生物領域的熒光染料。光敏劑熒光染料橙色
熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長的光轉變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波而反射出來,呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復合熒光染料使用。其中復合熒光染料是利用熒光共振能量轉移技術合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個供體及一個受體熒光物分子所組成。復合染料在受體分子的激發(fā)波長被激發(fā),在供體分子的發(fā)射波長發(fā)射一個光子。熒光染料發(fā)展非常迅速,已開發(fā)的用于科研和臨床應用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個光譜范圍。光敏劑熒光染料橙色