光熱***是另一個吲哚菁綠的重要應(yīng)用領(lǐng)域。在光熱***中，吲哚菁綠可以被引入**組織，并在近紅外激光的照射下吸收光能轉(zhuǎn)化為熱能，從而使**組織受到熱損傷，達(dá)到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質(zhì)使得其在光熱***中具有很高的選擇性，可以精確地破壞**組織而對正常組織幾乎沒有影響。這種精細(xì)的***方式有助于減少***的副作用，提高***效果。吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。在生物識別中，吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合，通過檢測其熒光信號來實現(xiàn)對這些生物分子的定量分析。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外，吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分，將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中，并通過光***釋放藥物，實現(xiàn)對疾病靶點的精確***。吲哚菁綠作為一種具有優(yōu)良綠色溶解度的熒光染料，在醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及醫(yī)學(xué)影像學(xué)、光熱***、生物識別和藥物輸送等方面，并且具有較高的選擇性和精細(xì)性。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，相信吲哚菁綠將在未來更***地應(yīng)用于臨床實踐中，為人類的健康和醫(yī)學(xué)科研做出更大的貢獻(xiàn)。小動物成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合。光敏劑熒光染料脂溶

羰花青染料***用作Di來標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR，以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們在脂質(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們在室溫下是油狀物，在水中發(fā)出微弱熒光，但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時，它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞，這些染料就會在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴散，導(dǎo)致整個細(xì)胞染色[1]。DiO、DiI、DiD和DiR呈現(xiàn)出不同的綠色、橙色、紅色和紅外熒光，從而促進(jìn)活細(xì)胞的多色成像和流式細(xì)胞術(shù)分析。DiO和DiI可分別與標(biāo)準(zhǔn)FITC和TRITC過濾器一起使用。其中DiI及其類似物是**常用的，因為它們通常表現(xiàn)出非常低的細(xì)胞毒性。此外，DiI***用于測定LDL和HDL等脂蛋白。親脂性氨基苯乙烯基染料DiA也常用于神經(jīng)元示蹤[2]。光敏劑熒光染料脂溶熒光染料，由于靈敏度高，操作方便，逐漸取代了放射性同位素作為檢測標(biāo)記，其應(yīng)用于熒光探針，細(xì)胞染色等。

在熒光顯微術(shù)中，不僅蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)感興趣，而且對核酸也感興趣。有時有必要通過檢測細(xì)胞核來確定細(xì)胞的確切位置或數(shù)量。最常見的DNA染色劑之一是DAPI（4',6-二氨基-2-苯基吲哚），主要與DNA雙螺旋富含A-T的區(qū)域結(jié)合。與未結(jié)合態(tài)相比，DAPI在DNA上的熒光強度增加。染料被UV（紫外線）光激發(fā)，比較大激發(fā)波長為358nm。發(fā)射光譜較寬，峰值在461nm。弱熒光也可以檢測到RNA結(jié)合。在這種情況下，發(fā)射轉(zhuǎn)移到500nm。有趣的是，DAPI能夠滲透完整的細(xì)胞膜。因此，該染料既可用于固定細(xì)胞也可用于活細(xì)胞。

過標(biāo)記——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團大于10mol。雖然過標(biāo)記的蛋白也可以使用，但可能會引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性，這些都會造成非特異性結(jié)合。過標(biāo)記還會引起熒光淬滅?？梢栽黾拥鞍谆驕p少反應(yīng)時間。3．未結(jié)合染料難以去除——盡管大部分時候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯(lián)物，但仍可能會有痕量的游離染料留在偶聯(lián)物溶液中，會使標(biāo)記計算的值偏高?？捎梅蛛x柱再次分離或透析去除。4．蛋白或蛋白偶聯(lián)物無法洗脫——不要再加緩沖液，只需再次離心一次或幾次。異硫氰酸熒光素(FITC) 是一種有機熒光染料，目前，這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。

Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右，它的熒光肉眼觀察很明亮，并且對pH不敏感，在共聚焦顯微鏡中可以用532nm（肩峰）或者556nm（頂峰）的激光束激發(fā)，在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察，所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細(xì)胞電位追蹤劑的母核，所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時，Cy3的背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標(biāo)記蛋白，抗體，多肽等，它常見的使用是標(biāo)記核酸分子（DNA和RNA）。基于熒光圖譜的相似性，Cy3可以被TAMRA，TRITC, BODIPY TMR等染料替代，在需要更明亮，更穩(wěn)定的替代物時，可以考慮使用AF547或者AF555等。CY7 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫，是由奇數(shù)個甲基單元連接的兩個氮原子組成的化合物。中國香港多肽熒光染料

Super Fluor 488（效果同Alexa Fluor 488）標(biāo)記蛋白。光敏劑熒光染料脂溶

二、***成像分析：D-熒光素，鉀鹽，D-PBS,不含鈣、鎂1、配制溶液使用無菌D-PBS（w/oCa2+;Mg2+）配制D-熒光素鉀鹽溶液（15mg/ml），0.22μm濾膜過濾除菌（避光），分裝后于-20℃或-80℃冷凍保存，避免反復(fù)凍融。使用時4℃融化，實驗前平衡至室溫（避光）2、注射量取決于注射方式，具體如下：注射方式劑量靜脈注射（25-27gauge針頭）按10μl/g體重濃度，加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液腹腔注射（25-27gauge針頭）按10μl/g體重濃度，加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液肌肉注射（27gauge針頭）50μl，濃度為1-2mg/ml熒光素工作液鼻內(nèi)注射（pipette）50μl，濃度為3mg/ml熒光素工作液3、注射入體內(nèi)10-20min（待光信號達(dá)到**強穩(wěn)定平臺期），再進(jìn)行成像分析光敏劑熒光染料脂溶