SuperFluor活化酯（與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同）SuperFlour系列熒光探針，具有更強的熒光強度，更廣的pH應(yīng)用范圍（pH4～10）,更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1．標記效率低——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團少于4mol有以下原因：1）緩沖液中含有痕量伯銨成分，與染料反應(yīng)降低了標記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液（如Tris或氨基乙酸），標記前用PBS透析。2）蛋白含量較低(≤1mg/mL)會影響標記效率。3）標記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的pH升高至～8，因為在弱堿性環(huán)境中標記反應(yīng)的效率比較高。如果蛋白溶液的緩沖范圍在低pH，加入重碳酸鹽也無法將pH調(diào)節(jié)至**適水平。要么加大重碳酸鹽的量，要么將緩沖液換成PBS，或用0.1M碳酸氫鈉透析等。4）研究顯示pH升至9.0～9.4，標記效率和標記速度（只需10min）明顯改善。5）不同抗體與熒光團的反應(yīng)速率不同，染料標記后保留的生物活性程度也不同，因此標準步驟也不是總有比較好的標記結(jié)果。為增加標記率，可以對同一樣品進行再標記，或減少蛋白的量加大染料的量重新標記。有研究者在室溫孵育1小時后再4℃孵育過夜，情況有所改善。異硫氰酸熒光素含有一個異硫氰酸酯反應(yīng)基團這有助于其對通常存在于生物分子中的動漫和巰基基團具有反應(yīng)性。長沙熒光染料水溶

在熒光顯微術(shù)中，不僅蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)感興趣，而且對核酸也感興趣。有時有必要通過檢測細胞核來確定細胞的確切位置或數(shù)量。最常見的DNA染色劑之一是DAPI（4',6-二氨基-2-苯基吲哚），主要與DNA雙螺旋富含A-T的區(qū)域結(jié)合。與未結(jié)合態(tài)相比，DAPI在DNA上的熒光強度增加。染料被UV（紫外線）光激發(fā)，比較大激發(fā)波長為358nm。發(fā)射光譜較寬，峰值在461nm。弱熒光也可以檢測到RNA結(jié)合。在這種情況下，發(fā)射轉(zhuǎn)移到500nm。有趣的是，DAPI能夠滲透完整的細胞膜。因此，該染料既可用于固定細胞也可用于活細胞。廣東水溶熒光染料吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。

花青類熒光染料屬于共振染料，其特征在于具有離域電荷的氮原子（兩個氮原子）之間的聚甲炔染料。由于與生物分子的低非特異性結(jié)合以及明亮的熒光，花青類熒光染料已成為一些當下流行的用于標記核酸的熒光染料?；ㄇ囝惾玖戏譃閮纱箢悾悍腔腔ㄇ囝惾玖?該組中的一些染料包括cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7和cy7.5。在大多數(shù)情況下，這些染料的特點是水溶性低，但胺的鹽酸鹽和酰肼除外。它們首先溶解在有機溶劑（共溶劑）中，然后在生物分子標記期間添加到含有生物分子的溶液中。而“Cy”**花青，***個數(shù)字**存在于亞油啉基團之間的碳原子數(shù)。另一方面，添加0.5后綴以表示苯并稠合花青。這些熒光染料通常用于有機介質(zhì)?；腔惢ㄇ嗳玖?該組由磺基-Cy3、磺基-Cy5和磺基-Cy7組成。顧名思義，這些花青的特征是一個磺基，它有助于染料分子在水相中的溶解。與非磺化花青相比，這些花青更易溶于水，因此不需要溶解在有機溶劑中進行標記?；腔ㄇ嗤ǔＳ糜跇擞浭杷缘鞍踪|(zhì)、水溶液中的納米顆粒以及可能被DMSO或DMF變性的敏感蛋白質(zhì)。兩組染料均可用于標記以下生物分子：肽、寡核苷酸和DNA、抗體、可溶性蛋白質(zhì)。

FITC熒光標記蛋白的應(yīng)用及特點:活性熒光染料，如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料，可用于標記抗體或蛋白質(zhì)功能基團，生成分子探針，并通過熒光成像進行檢測。當用熒光染料化學(xué)標記特異性抗體或其他純化生物分子時，它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針，用于細胞成像、流式細胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標記物具有無放射物污染、操作簡單等優(yōu)點，在蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列（效果同Alexa Fluor系列）

且Super Fluor活化酯（與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同） 異硫氰酸熒光素(FITC) 是一種有機熒光染料，目前，這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術(shù)中。

光熱***是另一個吲哚菁綠的重要應(yīng)用領(lǐng)域。在光熱***中，吲哚菁綠可以被引入**組織，并在近紅外激光的照射下吸收光能轉(zhuǎn)化為熱能，從而使**組織受到熱損傷，達到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質(zhì)使得其在光熱***中具有很高的選擇性，可以精確地破壞**組織而對正常組織幾乎沒有影響。這種精細的***方式有助于減少***的副作用，提高***效果。吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。在生物識別中，吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合，通過檢測其熒光信號來實現(xiàn)對這些生物分子的定量分析。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外，吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分，將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中，并通過光***釋放藥物，實現(xiàn)對疾病靶點的精確***。吲哚菁綠作為一種具有優(yōu)良綠色溶解度的熒光染料，在醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及醫(yī)學(xué)影像學(xué)、光熱***、生物識別和藥物輸送等方面，并且具有較高的選擇性和精細性。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進步，相信吲哚菁綠將在未來更***地應(yīng)用于臨床實踐中，為人類的健康和醫(yī)學(xué)科研做出更大的貢獻。DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料，它們是一族親脂性的熒光染料，用于細胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。免疫熒光熒光染料DAPI

FITC熒光染料標記方法。長沙熒光染料水溶

染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族，用于標記細胞膜和疏水性組織。這是一類環(huán)境敏感型熒光染料，當它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質(zhì)，雖然在水中其熒光強度很弱)結(jié)合時，其熒光強度***增強。它們具有很高的淬滅系數(shù)，偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。一旦應(yīng)用于細胞中，這種染料會在細胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴散，導(dǎo)致在其比較好濃度條件下，將整個細胞染色。它們不同的熒光顏色：DiI（橙色熒光）、DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細胞多色彩熒光成像分析和流式細胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標準的FITC和TRITC濾光器一同使用。其中，DiO可以被633 nm He-Ne激光激發(fā)，并且具有比DiI更長的激發(fā)和發(fā)射光波長，為標記細胞和組織的那些本身就具有本底熒光的染料提供了非常***的替代品。DiR在***成像或者示蹤中非常有用，因為它們所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織，并且在紅外光范圍內(nèi)，其本底熒光水平很低。長沙熒光染料水溶