熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后，能把短波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波而反射出來，呈閃亮的鮮艷色彩。例如，酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用，也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。其中復(fù)合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料，由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個(gè)供體及一個(gè)受體熒光物分子所組成。復(fù)合染料在受體分子的激發(fā)波長被激發(fā)，在供體分子的發(fā)射波長發(fā)射一個(gè)光子。熒光染料發(fā)展非常迅速，已開發(fā)的用于科研和臨床應(yīng)用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個(gè)光譜范圍。熒光染料可以單獨(dú)使用，也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。吉林熒光染料熒光素酶

光熱***是另一個(gè)吲哚菁綠的重要應(yīng)用領(lǐng)域。在光熱***中，吲哚菁綠可以被引入**組織，并在近紅外激光的照射下吸收光能轉(zhuǎn)化為熱能，從而使**組織受到熱損傷，達(dá)到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質(zhì)使得其在光熱***中具有很高的選擇性，可以精確地破壞**組織而對(duì)正常組織幾乎沒有影響。這種精細(xì)的***方式有助于減少***的副作用，提高***效果。吲哚菁綠在生物識(shí)別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。在生物識(shí)別中，吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合，通過檢測(cè)其熒光信號(hào)來實(shí)現(xiàn)對(duì)這些生物分子的定量分析。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外，吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分，將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中，并通過光***釋放藥物，實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病靶點(diǎn)的精確***。吲哚菁綠作為一種具有優(yōu)良綠色溶解度的熒光染料，在醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及醫(yī)學(xué)影像學(xué)、光熱***、生物識(shí)別和藥物輸送等方面，并且具有較高的選擇性和精細(xì)性。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，相信吲哚菁綠將在未來更***地應(yīng)用于臨床實(shí)踐中，為人類的健康和醫(yī)學(xué)科研做出更大的貢獻(xiàn)。鄭州熒光染料IR780Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右。

3.粘壁細(xì)胞的染色（1）使粘壁的細(xì)胞在無菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。（3）在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。（4）在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2～20分鐘，不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。

4.顯微鏡檢測(cè)（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。（2）多色染料的同時(shí)檢測(cè)，濾光器按照以下設(shè)定：a)DiI和DiO＝OmegaXF52，Chroma51004；b)DiI和DiD＝OmegaXF92，Chroma51007；c)DiI，DiO和DiD＝OmegaXF93，Chroma61005

5.流式細(xì)胞儀的檢測(cè)DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染色的細(xì)胞可以分別用經(jīng)典的FL1，F(xiàn)L2，F(xiàn)L3和FL4流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

與花青和羅丹明染料一樣，熒光素也是一種有機(jī)染料。熒光素的比較大吸收波長為494nm，比較大發(fā)射波長為521nm（通常吸收藍(lán)色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光），熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測(cè)到它，并且在與抗體結(jié)合時(shí)用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣，熒光素價(jià)格低廉且易于使用，使其成為生物學(xué)研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同，熒光素在水溶液中是無毒的。因此，它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。

三、流式細(xì)胞儀分析1、取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，接種到孔板，過夜培養(yǎng)。2、如果要進(jìn)行藥物刺激，在細(xì)胞中加入感興趣的藥物進(jìn)行干預(yù)，繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間后，收集細(xì)胞，PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重懸細(xì)胞，37℃避光孵育15min或更長時(shí)間?！咀⒁狻浚河捎诩?xì)胞種類和實(shí)驗(yàn)體系不同，Rhodamine123工作液濃度和孵育時(shí)間可以根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)或參考文獻(xiàn)自行調(diào)整。4、用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

四、實(shí)驗(yàn)案例1、取對(duì)數(shù)生長期A549細(xì)胞接于六孔板（1*106+2mlDMEM培養(yǎng)基）,37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-24h待其貼壁，以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作.2、棄掉培養(yǎng)液，PBS洗滌兩次.3、用培養(yǎng)基（無血清）稀釋Rh123母液制備1～20μMRh123工作液。具體工作濃度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。4、將Rh123工作液加入六孔板并在37℃下孵育30分鐘.5、去除Rh123工作液并用PBS洗滌三次細(xì)胞去除背景色.6、熒光顯微鏡觀察. 5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一種胺活性衍生物的熒光染料.中國臺(tái)灣熒光染料外泌體

花青類熒光染料屬于共振染料，其特征在于具有離域電荷的氮原子（兩個(gè)氮原子）之間的聚甲炔染料。吉林熒光染料熒光素酶

為什么要使用熒光染料？雖然不同的染色技術(shù)（即考馬斯染色、銀染色、熒光染色）可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì)，但使用熒光染料具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。他們提供：高靈敏度：對(duì)于大多數(shù)分析物，熒光測(cè)量的靈敏度比吸光度測(cè)量高1000倍，即使在使用小樣本時(shí)也可以令人滿意地達(dá)到ppt（萬億分之一）的檢測(cè)限。寬線性動(dòng)態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾：由于吸收光的材料數(shù)量眾多，分光光度測(cè)量通常會(huì)遇到干擾問題。在進(jìn)行熒光測(cè)量時(shí)不會(huì)遇到這個(gè)問題，因?yàn)橹挥猩贁?shù)材料具有熒光能力。高通量：熒光測(cè)量具有簡單而強(qiáng)大的協(xié)議，并且可以自動(dòng)化用于高通量應(yīng)用。吉林熒光染料熒光素酶