羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過(guò)細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集，并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測(cè)線粒體膜電位，也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，此熒光染料被應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。羅丹明123的比較大激發(fā)波長(zhǎng)為507nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)為525nm。在熒光顯微鏡下觀察，呈現(xiàn)黃綠色熒光。

一：工作液配制用緩沖液或者預(yù)熱的培養(yǎng)液直接稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作液濃度（1～20μM），充分混勻。具體的工作液濃度使用者要根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行調(diào)整?！咀⒁狻浚簩?duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，要控制好總體稀釋倍數(shù)，DMSO在培養(yǎng)液中的濃度不能超過(guò)0.1%，以避免DMSO對(duì)細(xì)胞的影響。

二：熒光顯微鏡觀察1、用載玻片準(zhǔn)備細(xì)胞。細(xì)胞數(shù)目應(yīng)為5×104～5×105個(gè)/mL。2、在載玻片上孵育細(xì)胞，用PBS或HBSS洗滌細(xì)胞。3、將Rhodamine123工作液加入載玻片并在37℃下孵育30min至1小時(shí)。4、去除Rhodamine123溶液并用培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞（洗滌細(xì)胞后如果要固定，加入10%福爾馬林緩沖液并孵育15～20min，接著用PBS洗滌）。5、熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。 南京星葉生物熒光染料標(biāo)記蛋白。組織熒光染料納米

SUPERGreenI（10,000×DMSO溶液，電泳級(jí)）儲(chǔ)存條件及注意事項(xiàng)4℃避光可保存12個(gè)月。本品用DMSO溶解，因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃，使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點(diǎn)●無(wú)毒性：屬花菁類(lèi)染料，容易生物降解，無(wú)致*毒性。●靈敏度高：至少可檢出20pgDNA，高于EB染色法25～100倍?！裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘?hào)強(qiáng)，背景信號(hào)低?！癫僮骱?jiǎn)單：無(wú)須脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光透射儀觀察?！襁m用范圍廣：可適用于多種凝膠電泳方法：瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等?！袷褂梅奖悖簩?duì)分子生物學(xué)中常用的酶（如：Taq酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等）沒(méi)有抑制作用。●經(jīng)濟(jì)：價(jià)格比銀染便宜。組織熒光染料納米染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類(lèi)親脂性熒光染料家族，用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。

InvitrogenCy3染料是一種明亮的橙色熒光染料，可使用532nm激光線激發(fā)，并使用TRITC（四甲基羅丹明）濾光片組進(jìn)行可視化。除了免疫細(xì)胞化學(xué)應(yīng)用，Cy3染料通常用于標(biāo)記核酸。發(fā)光說(shuō)明：Cy3熒光團(tuán)也是親脂性神經(jīng)元和長(zhǎng)期DiI細(xì)胞追蹤試劑的基礎(chǔ)，該試劑添加烷基尾(≥12個(gè)碳）添加到**熒光團(tuán)上。Cy3染料是用于成像、流式細(xì)胞術(shù)和基因組應(yīng)用的蛋白質(zhì)和核酸結(jié)合物的傳統(tǒng)橙色熒光標(biāo)簽。它也是經(jīng)典親脂性示蹤劑DiI及其變體的基礎(chǔ)。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)，Cy3可分為普通Cy3（常簡(jiǎn)稱(chēng)Cy3）和磺化Cy3（Sulfo-Cy3）。Cy3水溶性較低，在水相標(biāo)記反應(yīng)時(shí)常常需要使用有機(jī)共溶劑，常用有機(jī)溶劑包括DMF，DMSO和乙腈等?；腔疌y3是在Cy3的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上磺化的產(chǎn)物，附帶2個(gè)或3個(gè)磺酸根離子。由于磺化效應(yīng)，磺化Cy3的亮度比Cy3稍亮，熒光穩(wěn)定性也提高，可賴受更長(zhǎng)時(shí)間的曝光?；腔疌y3水溶性極高，所以在標(biāo)記反應(yīng)中不需要使用有機(jī)共溶劑，特別適合標(biāo)記蛋白等對(duì)有機(jī)溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性極好，并且染料分子本身帶電荷，標(biāo)記到蛋白表面后不會(huì)引發(fā)疏水性蛋白聚集，提高熒光標(biāo)記產(chǎn)物的穩(wěn)定性。當(dāng)然，磺化Cy3-NHS也可溶于甲醇，DMSO，DMF等有機(jī)溶劑，標(biāo)記反應(yīng)也可以在純有機(jī)溶劑中進(jìn)行。

Hoechst33342是一種可透過(guò)細(xì)胞膜并對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。Hoechst33342常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst33342-DNA的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為350nm和460nm?？扇苡谒?.染色程序：（1）用PBS或合適的緩沖液制備10～50μMHoechst33342染料。（2）將1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積的Hoechst染料溶液加入細(xì)胞培養(yǎng)物中（可以用1/10濃度的Hoechst染料緩沖液代替培養(yǎng)基）。（3）在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10～20分鐘。（4）用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。（5）用帶有350nm激發(fā)波長(zhǎng)，460nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。Super Fluor 488（效果同Alexa Fluor 488）標(biāo)記蛋白。

注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，從而確定比較高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。保存和操作的過(guò)程中都要避光。另外水溶性儲(chǔ)存液過(guò)濾除菌后，可以-20℃或-80℃分裝凍存，避免反復(fù)凍融。如果有條件，對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?，穩(wěn)定性和保存時(shí)間更長(zhǎng)。 注射方式，動(dòng)物類(lèi)型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，確定比較好信號(hào)平臺(tái)期和比較好的檢測(cè)時(shí)間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒(méi)有差別，兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來(lái)看，鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽，尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。兩者功效相同。 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。河北熒光染料標(biāo)記

D-熒光素鉀鹽南京星葉生物科技有限公司。組織熒光染料納米

熒光染料***用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中，如流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡和免疫組化等，其中熒光淬滅是一個(gè)關(guān)鍵的考量因素，因?yàn)樗苯佑绊懙綄?shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。FITC（異硫氰酸熒光素）是一種常用的綠色熒光染料，具有較高的熒光量子產(chǎn)率和激發(fā)效率。然而，F(xiàn)ITC的一個(gè)主要缺點(diǎn)是容易受到環(huán)境因素的影響，如pH值、溫度、溶劑和離子強(qiáng)度等，從而導(dǎo)致熒光淬滅。此外，F(xiàn)ITC的光穩(wěn)定性相對(duì)較低，長(zhǎng)時(shí)間的光照會(huì)導(dǎo)致其熒光強(qiáng)度降低。CY5.5是一種遠(yuǎn)紅外熒光染料，具有較長(zhǎng)的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)，因此適用于多色熒光標(biāo)記和深組織成像。CY5.5相對(duì)于FITC來(lái)說(shuō)，具有更好的光穩(wěn)定性，不易受到環(huán)境因素的影響。此外，CY5.5的熒光量子產(chǎn)率也較高，使其在熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色。AlexaFluor647是另一種常用的紅色熒光染料，具有與CY5.5相似的長(zhǎng)波長(zhǎng)激發(fā)和發(fā)射特性。AlexaFluor647的優(yōu)點(diǎn)是光穩(wěn)定性較好，可以承受長(zhǎng)時(shí)間的光照而不易淬滅。此外，它在多種溶劑和pH值范圍內(nèi)都能保持穩(wěn)定的熒光性能，因此在復(fù)雜的生物樣本中表現(xiàn)出色。

南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列（效果同Alexa Fluor 系列），質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。 組織熒光染料納米