熒光標(biāo)記技術(shù)是指運用熒光染料與待研究對象結(jié)合，利用它的熒光特性，提供待研究對象相關(guān)信息。熒光標(biāo)記具有操作簡便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢，使熒光染料在生命科學(xué)研究中應(yīng)用，包括：標(biāo)記活細胞或固定細胞中的蛋白質(zhì)、多肽；作為功能性指示劑表征細胞健康狀況；設(shè)計各種熒光探針，尋找特定蛋白或藥物靶點。應(yīng)用分類：多肽、蛋白、抗體標(biāo)記：氨基標(biāo)記、巰基標(biāo)記、羧基標(biāo)記；***成像：水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料，了解更多（包括但不限于）

Super Fluor 488（效果同Alexa Fluor 488）標(biāo)記蛋白。江西熒光染料脂溶

PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測，常用于流式細胞儀分析。盡管PI不能通過活細胞膜，但卻能穿過破損的細胞膜而對核染色。PI經(jīng)常被用來與Calcein,AM、Hoechst33258或Hoechst33342等一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535nm和615nm。2.染色過程（1）將1/10培養(yǎng)基體積的PI染色液加入到細胞培養(yǎng)基中（也可以用1/10濃度的PI緩沖液代替培養(yǎng)基）。（2）在37℃培養(yǎng)細胞10～20分鐘。（3）用PBS或合適的緩沖液洗滌細胞兩次。（4）用535nm激發(fā)波長，615nm發(fā)射波長的濾光器的熒光顯微鏡觀察細胞。儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。注意事項：PI對人體有刺激性，請注意適當(dāng)防護。江西熒光染料脂溶D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物，存在于多種發(fā)光生物體中。

一：染色液制備1、配制儲液：儲液用無水DMSO或無水EtOH配制，濃度1~5mM。注：未使用的儲液建議分裝后儲存在-20℃，避免反復(fù)凍融。2、工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲液，配制濃度為1~5μM的工作液。注：工作液**終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開始比較好濃度的摸索。二：懸浮細胞染色1、加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細胞，使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細胞2~20min，不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。可以20min作為起始孵育時間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。3、孵育結(jié)束，1000~1500rpm離心5min。傾倒上清液，再次緩慢加入37℃預(yù)熱的生長培養(yǎng)液重懸細胞。4、重復(fù)步驟3兩次以上。

與花青和羅丹明染料一樣，熒光素也是一種有機染料。熒光素的比較大吸收波長為494nm，比較大發(fā)射波長為521nm（通常吸收藍色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光），熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測到它，并且在與抗體結(jié)合時用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣，熒光素價格低廉且易于使用，使其成為生物學(xué)研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同，熒光素在水溶液中是無毒的。因此，它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。SUPER Green I核酸染料特點 。

琥珀酰亞胺酯（Succinimidylesters）/NHS酯活性熒光染料用于標(biāo)記抗體，蛋白質(zhì)，肽，胺修飾的寡核苷酸和其他生物分子上的游離氨基（-NH2）2、馬來酰亞胺（Maleimides）活性熒光染料用于標(biāo)記抗體，蛋白質(zhì)和肽上的巰基3、疊氮化物(Azides)活性熒光染料通過點擊化學(xué)法（Click）標(biāo)記乙烯基4、炔烴(Alkynes)活性熒光染料通過點擊化學(xué)方法標(biāo)記疊氮化物5、羧酸(Carboxylicacids)活性熒光染料經(jīng)碳二亞胺預(yù)活化后用于標(biāo)記胺或用于醇的Steglich酯化6、氨基(Amines)活性熒光染料具有游離氨基的熒光染料，用于與各種親電子化合物（如活化的酯和環(huán)氧化物）偶聯(lián)。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。江西熒光染料脂溶

CY7.5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。江西熒光染料脂溶

1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備（1）配置DMSO或EtOH儲存液：儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5mM。注意：未使用的儲存液保存在-20°C，避免反復(fù)凍融。（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5μM的工作液。注意：工作液的**終濃度是根據(jù)不同細胞和實驗的經(jīng)驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細胞染色（1）懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。（2）在37℃培養(yǎng)細胞2～20分鐘，不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。（3）染色細胞試管在1000～1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。（5）重復(fù)（3），（4）步驟兩次以上。 江西熒光染料脂溶