siRNA脂質體

RNA干擾(RNAi)途徑允許siRNA和miRNAs負向調(diào)節(jié)蛋白表達。siRNA是21～23對核苷酸組成的雙鏈RNA，可誘導同源靶mRNA沉默。為了發(fā)揮作用，雙鏈siRNA分裂成兩個單鏈RNA:乘客鏈和引導鏈。乘客鏈被argonaute-2蛋白降解,而引導鏈則被納入RNAi誘導的沉默復合體中，該復合體結合與引導鏈互補的mRNA并將其切割。siRNA似乎具有***多種疾病的巨大潛力，因為它們可以很容易地下調(diào)各種靶mRNA，而不考慮它們的位置(即在細胞核或細胞質中)，并且它們的特異性結合表明它們比傳統(tǒng)化學藥物誘導的副作用更少。作為一種新型的基于核酸的***策略，siRNA***與傳統(tǒng)的化學藥物相比具有許多優(yōu)勢。然而，為了促進基于siRNA的***方法的發(fā)展，必須克服一些挑戰(zhàn)，包括需要識別適當?shù)陌谢蚝烷_發(fā)優(yōu)化的遞送系統(tǒng)。許多研究人員試圖利用陽離子脂質體提高siRNA的細胞遞送和基因沉默效率。例如，由DC-6-14、DOPE和膽固醇組成的陽離子脂質體被用于遞送螢火蟲熒光素酶特異性的siRNA。當陽離子脂質體與siRNA持續(xù)劇烈攪拌混合時，轉染效率提高，說明將siRNA加載到陽離子脂質體上的方法可以調(diào)節(jié)轉染效率。siRNA脂叢的***應用因靶蛋白而異。 增強成像性能，熒光標記的定量分析，探索藥物的藥代動力學以及研究藥物的靶向性等。遼寧氫化卵磷脂脂質體載藥

脂質體制備方法：二次乳化法該方法已被DepoCyte、DepoDur和Expel三種商業(yè)產(chǎn)品?于?產(chǎn)MVLs。整個?產(chǎn)過程通常包括以下四個順序操作:(1)形成“油包?”乳液，(2)形成“油包?”乳液，(3)在汽提?體或真空壓?的幫助下進?溶劑萃取，(4)微濾去除游離藥物，濃縮和交換外部溶液。在?產(chǎn)過程中，應提供?菌保證，因為由于微粒徑的MVLs不能通過0.22μm過濾作為?菌批次?產(chǎn)。Lu等研究了?藝對布?卡因MVLs關鍵質量屬性的影響，發(fā)現(xiàn)第?乳的粒徑隨著脂質濃度的增加?增?，剪切速度對粒徑影響較?。對于第?種乳液，在溶劑去除過程中，由于?些MVLs坍塌，藥物從內(nèi)?相泄漏，導致包封效率降低。此外，?溫促進了脂質雙分?層的遷移和重排，導致脂質融合和?腔的坍塌。遼寧氫化卵磷脂脂質體載藥脂質體疫苗可以機器體內(nèi)的免疫應答。

與化學增敏劑共同遞送為了增強***活性，研究人員研究了將***siRNA和化學藥物共同裝載到陽離子脂質體中的共遞送方法。例如，將絲裂原活化的蛋白激酶抑制劑PD0325901包封在由N、N-二油基谷酰胺陽離子脂質、DOPE和膽固醇組成的陽離子脂質體中，通過靜電相互作用與Mcl-1siRNA絡合。在小鼠模型中，瘤內(nèi)給藥這些陽離子脂質體可***抑制**生長。在另一項研究中，開發(fā)了基于三葉賴氨酸油酰酰胺的陽離子脂質體，用于共同遞送Mcl-1siRNA和***藥物亞酰苯胺羥肟酸。與Mcl-1siRNA脂質體或含亞甲基苯胺羥肟酸脂質體的單藥***相比，使用載藥聚乙二醇化脂質體與Mcl-1siRNA復合物可提高荷瘤小鼠的體內(nèi)***效果。***，將多柔比星包裹的陽離子脂質體與編碼磷酸化缺陷小鼠survivin蛋白的質粒DNA復合，該蛋白是BIRC5基因編碼的一種致*蛋白，是凋亡抑制劑家族的成員，蘇氨酸34-丙氨酸突變體，然后用縮短的人堿性成纖維細胞生長因子肽修飾，對表達成纖維細胞生長因子受體的細胞產(chǎn)生選擇性。在靜脈給藥這些復合物后，在患有肺*的C57BL/6小鼠中觀察到**生長的***降低。目前臨床應用面臨的挑戰(zhàn)。

脂質體質量控制的重要性與常規(guī)藥物劑型(如?分?注射溶液)不同，脂質體中裝載的***性分?在全?給藥后(如靜脈注射)轉運到腫瘤細胞的過程更為復雜主要經(jīng)歷以下?個步驟:(1)從?管內(nèi)間隙外滲到組織間質:脂質體通過擴散和/或對流穿越**?管壁不連續(xù)的內(nèi)?連接點(100nm-2μm)進?**間質。同時?部分脂質體被MPS從體循環(huán)中***，特別是對于?尺?(>200nm、疏?和帶電顆粒表?(帶負電荷或正電荷)的顆粒。(2)通過擴散和對流進?間質運輸，以接近單個腫瘤細胞。利?主動靶向對脂質體進?表?修飾將克服顆粒在細胞外基質(ECM)中擴散的物理阻?，因為顆粒上的靶向配體與腫瘤細胞表?的受體之間產(chǎn)?了更?的親和?(3)通過?特異性或特異性結合的?式附著于細胞膜(4)通過內(nèi)吞作?、膜融合或擴散進?細胞。內(nèi)吞作?的途徑取決于顆粒??即??為200nm，500nm的顆粒為?格蛋?介導的內(nèi)吞作?和?泡介導的內(nèi)吞作?，?胞吞作?可達5μm。(5)細胞內(nèi)轉運和藥物釋放。基于脂質體的這種運輸過程由于循環(huán)脂質體顆粒?法穿過?臟?管的連續(xù)內(nèi)?連接，與傳統(tǒng)的阿霉素給藥相?，Doxil明顯降低了?臟毒性。與常規(guī)藥物相?DaunoXome可使多柔?星的**遞送量增加約10倍，并在體內(nèi)提供持續(xù)釋放。Zeta電位被認為是影響細胞攝取和藥物傳遞的重要因素之一。

陰離子脂體由帶負電荷的脂質組成，如磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸和磷脂酸，由于它們被巨噬細胞攝取，循環(huán)時間縮短。帶負電的小脂質體比其對應的中性和帶正電的脂質體被***得更快。此外，在帶負電荷的小脂質體中觀察到一種雙相***模式。 另一方面， 與中性和帶正電的脂質體相比， 血液單核細胞和肺在帶負電的大脂質體的攝取中起主要作用。表面修飾的脂質體(攜帶配體)比天然脂質體更容易被***。 然而， 脂質體通過摻入膽固醇可在一定程度上減少肝臟對脂質體的攝取， 這可能會使磷脂包裝轉變?yōu)楦鼒杂灿行虻哪?。一些常用于標記脂質體的熒光染料包括：DiO、DiI、Rhodamine PE、NBD、BODIPY、Cy3和Cy5等。云南DLin-MC3-DMA脂質體載藥

載藥脂質體的穩(wěn)定性和儲存方式。遼寧氫化卵磷脂脂質體載藥

2脂質體的主要成分

?油磷脂(GP)、鞘磷脂(SM)和膽固醇(Chol)是市場上脂質體產(chǎn)品中使?的基本成分。GP含有?油，它連接?對疏?脂肪酸鏈和?個親?極性頭基。脂肪酸和極性頭基團的類型。在?理pH下，不同的頭部組提供負(PA、PS、PG和?磷脂)或中性(PC和PE)電荷的脂質體。帶負電的DSPG?于AmBisome(注射?兩性體脂質體)，可與帶正電的AmpB胺基相互作?，形成穩(wěn)定的離?配合物，??于Vyxeos的DSPG通過強?的庫侖斥?使脂質體聚集**?。?于DaunoXome(檸檬酸柔紅霉素脂質體注射液)、Onivyde(伊?替康脂質體注射液)和Vyxeos的DSPC是?種中性合成脂質，具有明確的脂肪酸組成(兩分?硬脂酸)、?純度和相對?的相轉變(Tm為55?C)。EPC作為賦形劑加?Myocet和Visudyne(維替泊芬粉為輸液溶液)中。EPC是從蛋?中純化的天然磷脂(NPL)。與半合成脂和合成脂相?，NPL的?產(chǎn)成本較低，但轉變溫度較寬，難以獲得完全相同的NPL，并且脂質體可能存在批次差異。此外，EPC的不飽和脂肪酸導致了?15～?5?C的低相變溫度，表明脂質體雙分?層在體溫中處于?序和藥物“漏出”狀態(tài)。 遼寧氫化卵磷脂脂質體載藥