熒光標(biāo)記技術(shù)是指運(yùn)用熒光染料與待研究對(duì)象結(jié)合,利用它的熒光特性,提供待研究對(duì)象相關(guān)信息。熒光標(biāo)記具有操作簡(jiǎn)便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢(shì),使熒光染料在生命科學(xué)研究中應(yīng)用,包括:標(biāo)記活細(xì)胞或固定細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、多肽;作為功能性指示劑表征細(xì)胞健康狀況;設(shè)計(jì)各種熒光探針,尋找特定蛋白或藥物靶點(diǎn)。應(yīng)用分類:多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:氨基標(biāo)記、巰基標(biāo)記、羧基標(biāo)記;***成像:水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料,了解更多(包括但不限于)
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。青島熒光染料激發(fā)
PI是一種可對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)的檢測(cè),常用于流式細(xì)胞儀分析。盡管PI不能通過(guò)活細(xì)胞膜,但卻能穿過(guò)破損的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。PI經(jīng)常被用來(lái)與Calcein,AM、Hoechst33258或Hoechst33342等一起使用,能同時(shí)對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞染色。PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為535nm和615nm。2.染色過(guò)程(1)將1/10培養(yǎng)基體積的PI染色液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中(也可以用1/10濃度的PI緩沖液代替培養(yǎng)基)。(2)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10~20分鐘。(3)用PBS或合適的緩沖液洗滌細(xì)胞兩次。(4)用535nm激發(fā)波長(zhǎng),615nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光器的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項(xiàng):PI對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。新疆濟(jì)南熒光染料與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機(jī)染料。
Hoechst33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項(xiàng):Hoechst33258對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液??篃晒獯銣绶馄?P0126)可以向碧云天訂購(gòu)。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作注意事項(xiàng):Hoechst33342對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化螢火蟲(chóng)產(chǎn)生典型的黃綠色光。該反應(yīng)的 560 nm 化學(xué)發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達(dá)到峰值,當(dāng)?shù)孜餆晒馑剡^(guò)量時(shí),光輸出與熒光素酶濃度成正比。熒光素酶 (luc) 基因是用于研究和藥物篩選的流行報(bào)告基因?;瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)幾乎沒(méi)有背景,使得 luc 報(bào)告基因成為檢測(cè)低水平基因表達(dá)的理想選擇。標(biāo)準(zhǔn)閃爍計(jì)數(shù)器可以可靠地測(cè)量低至 0.02 pg 的熒光素酶。除了作為基因表達(dá)報(bào)告者的作用外,熒光素酶還常用于極其靈敏的 ATP 檢測(cè)中[1]。我們提供螢火蟲(chóng)熒光素酶 (HY-P1004)、熒光素游離酸 (HY-12591A) 及其水溶性鈉鹽 (HY-12591) 和鉀鹽 (HY-12591B)。異硫氰酸熒光素(FITC) 是一種有機(jī)熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。
三、流式細(xì)胞儀分析1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,接種到孔板,過(guò)夜培養(yǎng)。2、如果要進(jìn)行藥物刺激,在細(xì)胞中加入感興趣的藥物進(jìn)行干預(yù),繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間后,收集細(xì)胞,PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重懸細(xì)胞,37℃避光孵育15min或更長(zhǎng)時(shí)間?!咀⒁狻浚河捎诩?xì)胞種類和實(shí)驗(yàn)體系不同,Rhodamine123工作液濃度和孵育時(shí)間可以根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)或參考文獻(xiàn)自行調(diào)整。4、用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
四、實(shí)驗(yàn)案例1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期A549細(xì)胞接于六孔板(1*106+2mlDMEM培養(yǎng)基),37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-24h待其貼壁,以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作.2、棄掉培養(yǎng)液,PBS洗滌兩次.3、用培養(yǎng)基(無(wú)血清)稀釋Rh123母液制備1~20μMRh123工作液。具體工作濃度取決于細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。4、將Rh123工作液加入六孔板并在37℃下孵育30分鐘.5、去除Rh123工作液并用PBS洗滌三次細(xì)胞去除背景色.6、熒光顯微鏡觀察. FITC熒光染料標(biāo)記方法。顯微鏡熒光染料IR825
Hoechst 33342是一種可透過(guò)細(xì)胞膜并對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。青島熒光染料激發(fā)
小動(dòng)物***成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù),可以在***小動(dòng)物體內(nèi)實(shí)時(shí)觀察和研究細(xì)胞、組織和***的功能和代謝過(guò)程。這種染料具有以下幾個(gè)特點(diǎn):1.高度選擇性:小動(dòng)物***成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合,使其在***成像過(guò)程中能夠清晰地顯示出來(lái),從而提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和信息。2.高亮度和穩(wěn)定性:該染料具有較高的熒光亮度和穩(wěn)定性,能夠在長(zhǎng)時(shí)間的觀察過(guò)程中保持熒光信號(hào)的強(qiáng)度和穩(wěn)定性,確保數(shù)據(jù)的可靠性和準(zhǔn)確性。3.低毒性和無(wú)刺激性:小動(dòng)物***成像熒光染料在使用過(guò)程中對(duì)小動(dòng)物的生理功能和行為沒(méi)有明顯的影響,具有較低的毒性和無(wú)刺激性,保證了實(shí)驗(yàn)的可靠性和動(dòng)物的福利。4.多功能性:該染料可以用于多種小動(dòng)物模型的***成像研究,包括小鼠、小魚(yú)、小豬等,適用于不同的研究領(lǐng)域和實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。我們公司的小?dòng)物***成像熒光染料是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選和測(cè)試的高質(zhì)量產(chǎn)品,具有穩(wěn)定的性能和優(yōu)異的成像效果。我們致力于為科研人員和生命科學(xué)領(lǐng)域的專業(yè)人士提供**的成像技術(shù)和產(chǎn)品,幫助他們?cè)谘芯恐腥〉酶鼫?zhǔn)確、更可靠的數(shù)據(jù)和結(jié)果。如果您對(duì)小動(dòng)物***成像熒光染料感興趣或有任何疑問(wèn),請(qǐng)隨時(shí)聯(lián)系我們,我們將竭誠(chéng)為您提供專業(yè)的技術(shù)支持和咨詢服務(wù)。謝謝青島熒光染料激發(fā)