熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其廣泛應(yīng)用于熒光免疫,熒光探針,細胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑,可作為背景對照,標記細胞核使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。熒光標記的單克隆抗體技術(shù)為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領(lǐng)域擴展了無限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑共價結(jié)合在單克隆抗體上。免疫熒光標記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸熒光染料對細胞核染色后定量測量細胞所發(fā)出的熒光強度,就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量,并可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。有多種熒光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一種胺活性衍生物的熒光染料.神經(jīng)熒光染料luc
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度**增強,這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長,在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在***成像中用來示蹤。神經(jīng)熒光染料lucDiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。
熒光標記技術(shù)是指運用熒光染料與待研究對象結(jié)合,利用它的熒光特性,提供待研究對象相關(guān)信息。熒光標記具有操作簡便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢,使熒光染料在生命科學(xué)研究中應(yīng)用,包括:標記活細胞或固定細胞中的蛋白質(zhì)、多肽;作為功能性指示劑表征細胞健康狀況;設(shè)計各種熒光探針,尋找特定蛋白或藥物靶點。應(yīng)用分類:多肽、蛋白、抗體標記:氨基標記、巰基標記、羧基標記;***成像:水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料,了解更多(包括但不限于)
綠色熒光染料ICG的主要作用吲哚菁綠(IndocyanineGreen,簡稱ICG)是一種廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域的熒光染料。它具有獨特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì),因此被***用于熒光顯像、光熱***、生物識別和藥物輸送等領(lǐng)域。吲哚菁綠的綠色溶解度是其在水中的溶解度,它是衡量該染料在溶液中的溶解能力的重要指標。吲哚菁綠具有較好的水溶性,可以在水中迅速溶解,形成穩(wěn)定的溶液。這一特性使得吲哚菁綠在醫(yī)學(xué)診斷和***中得到廣泛應(yīng)用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。由于其具有強烈的熒光特性,能夠在近紅外光譜范圍內(nèi)吸收和發(fā)射光線,因此被***用于近紅外熒光顯像技術(shù)中。在臨床中,醫(yī)生可以通過注射吲哚菁綠溶液,利用近紅外光源對患者進行顯像,以觀察和評估病變部位的血液灌注情況、淋巴引流途徑等。這為醫(yī)生提供了非侵入性、實時性的影像信息,有助于準確診斷和指導(dǎo)***。此外,吲哚菁綠還在光熱***中發(fā)揮著重要作用。光熱***是一種利用光熱效應(yīng)殺滅腫瘤細胞的方法。吲哚菁綠可以吸收近紅外光并將其轉(zhuǎn)化為熱能,從而使附近的腫瘤細胞受熱破壞。這項技術(shù)在*****中具有巨大潛力,因為它可以實現(xiàn)高度精細的***,同時比較大限度地減少對周圍正常組織的損傷。目前常用標記蛋白/抗體的熒光素主要有BODIPY類、香豆素類、羅丹明類、近紅外類、NBD胺類以及菁染料等。
納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸,納米粒子通常用于不同類型的細胞和組織的熒光成像。當今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點、貴金屬納米顆粒、聚合物點、量子點和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中,與其他分子熒光團和探針相比,納米顆粒/納米材料具有多種優(yōu)勢,使其成為理想的選擇。除了提高亮度外,納米粒子是惰性的并且往往分布均勻,這有助于在成像過程中獲得更好的結(jié)果。此外,與各種分子熒光團相比,納米顆粒和納米材料沒有細胞毒性,并且不受非特異性結(jié)合問題的影響。由于這些特性,大多數(shù)熒光納米顆粒(染色納米顆粒)可以內(nèi)化到細胞/組織中,并容易靶向給定部位。Super Flour 系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH 4~10), 更好的抗淬滅性。新疆北京熒光染料
Super Fluor活化酯(與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同)。神經(jīng)熒光染料luc
SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1.標記效率低——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團少于4mol有以下原因:1)緩沖液中含有痕量伯銨成分,與染料反應(yīng)降低了標記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液(如Tris或氨基乙酸),標記前用PBS透析。2)蛋白含量較低(≤1mg/mL)會影響標記效率。3)標記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的pH升高至~8,因為在弱堿性環(huán)境中標記反應(yīng)的效率比較高。如果蛋白溶液的緩沖范圍在低pH,加入重碳酸鹽也無法將pH調(diào)節(jié)至**適水平。要么加大重碳酸鹽的量,要么將緩沖液換成PBS,或用0.1M碳酸氫鈉透析等。4)研究顯示pH升至9.0~9.4,標記效率和標記速度(只需10min)明顯改善。5)不同抗體與熒光團的反應(yīng)速率不同,染料標記后保留的生物活性程度也不同,因此標準步驟也不是總有比較好的標記結(jié)果。為增加標記率,可以對同一樣品進行再標記,或減少蛋白的量加大染料的量重新標記。有研究者在室溫孵育1小時后再4℃孵育過夜,情況有所改善。神經(jīng)熒光染料luc