脂質(zhì)體各組分對核酸遞送效率的影響對于使用陽離子脂質(zhì)體開發(fā)核酸***劑，一個先決條件是必須將核酸適當?shù)剡f送到靶細胞并到達適當?shù)膩喖毎麉^(qū)室(例如，細胞質(zhì)或細胞核)。已知陽離子脂質(zhì)體的遞送效率會受到陽離子脂質(zhì)和輔助脂質(zhì)類型及其組成的影響。陽離子脂質(zhì)是納米粒子的**成分，具有一個帶正電的頭基和一個或兩個由碳氫鏈或類固醇結構組成的疏水尾區(qū)的共同結構。Felgner和同事報道了N-[1-(2,3-二聚氧基)丙基]-N,N,N-三甲基氯化銨（DOTAP）的合成，其具有一個單價陽離子頭和兩個碳氫化合物尾部,并用于制備小的單層脂質(zhì)體。他們將DNA包裹的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染到小鼠L細胞中,并證明陽離子脂質(zhì)中和了帶負電荷的DNA,使陽離子脂質(zhì)體有更好的機會與帶負電荷的細胞膜相互作用。從那時起，各種陽離子脂質(zhì)和基于脂質(zhì)的納米顆粒被設計和評估用于核酸的細胞遞送,包括DNA,siRNA,miRNA和AS-ODN。這些新的陽離子脂質(zhì)已經(jīng)通過文庫技術和基于理性的預測相結合的方法被鑒定出來。對類脂類材料文庫的篩選產(chǎn)生了由十個碳和兩個烷基鏈組成的陽離子脂質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其比其他候選物更有效。

脂質(zhì)與生物活性小分子(如葉酸)的結合已被研究用于靶向遞送核酸。安徽脂質(zhì)體載藥遞送效率

脂質(zhì)體中的點擊反應**近,利用巰基炔“點擊”化學篩選了一種仿生硫醚脂質(zhì)文庫，該文庫將陽離子硫醚胺脂質(zhì)與兩種疏水烷基硫醇偶聯(lián)。一種含有DOPE的脂質(zhì)制劑被發(fā)現(xiàn)可以增加各種細胞類型中GFP特異性siRNA的攝取。由于陽離子脂質(zhì)體通常表現(xiàn)出相對較高的細胞毒性，因此人們提出了各種策略來降低其毒性并增強其在體內(nèi)對siRNA的遞送。為此，研究人員將無毒且可生物降解的陰離子聚合物包覆在陽離子脂質(zhì)體上,如聚l-谷氨酸鈉鹽、聚(丙烯酸)鈉鹽、葡聚糖硫酸鈉鹽、海藻酸鈉鹽、透明質(zhì)酸鈉鹽、硫酸肝素鈉鹽和羧甲基纖維素鈉鹽。在這些陰離子聚合物中，聚谷氨酸在大范圍內(nèi)沒有任何明顯的毒性，并且與未包被的脂質(zhì)體相比，包被的陽離子脂質(zhì)體在肝臟和肺組織中的siRNA遞送增強。山西重慶脂質(zhì)體載藥脂質(zhì)體各組分對核酸遞送效率的影響。

脂質(zhì)體制備方法：薄膜?化法薄膜?化法是?種傳統(tǒng)的技術，有利于裝載親脂***物。薄膜是通過在真空條件下燒瓶旋轉(zhuǎn)過程中使脂質(zhì)溶劑溶液蒸發(fā)?形成的。MLVs懸浮液可以通過加??溶液?化脂膜得到。進?步縮?粒徑可獲得SUV，在脂質(zhì)體形成過程中或形成脂質(zhì)體后，可分別被動或主動裝載原料藥。AmBisome,Visudyne,andShingrix的商業(yè)產(chǎn)品都采?這種?法制造。例如，Visudyne是通過從?氯甲烷中蒸發(fā)成分，與乳糖溶液?化，均質(zhì)化，過濾和凍?來制造的。佐劑系統(tǒng)as01b是Shingrix產(chǎn)品中的單個?瓶，是?種基于脂質(zhì)體的佐劑，含有兩種免疫增強劑，QS21(?種三萜糖苷，從?利納樹的樹?中純化)和MPL(3-odesacyl-40-單磷酰脂a)。MPL和其他脂質(zhì)溶解在有機溶液中并?燥。?化、減粒徑后，加?QS21?溶液配制。

寡核苷酸脂質(zhì)體

寡核苷酸是一種<50個堿基的短核酸聚合物。AS-ODN（反義寡脫氧核苷酸）是與互補的mRNA序列結合的單鏈DNA或RNA。由于AS-ODNs可以下調(diào)某些RNA并抑制靶蛋白的表達，因此它們被認為具有作為核酸藥物的潛力。然而，為了開發(fā)基于寡核苷酸的***方法，必須克服寡核苷酸在生理環(huán)境中的不穩(wěn)定性及其細胞攝取不足的問題。Zhang及其同事開發(fā)了由1,2-二油?；?3-三甲銨基丙烷(DOTAP)、磷脂酰膽堿和膽固醇組成的陽離子脂體，用于針對Raf-1蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶(一種已知的*****靶標信號蛋白)的AS-ODNs全身遞送。他們觀察到,全身給藥AS-ODNs與陽離子脂質(zhì)體復合物可降低肝臟和**組織中Raf-1蛋白的表達，并抑制小鼠PC-3**的生長。在另一項研究中，bcl2特異性AS-ODNs與魚精蛋白和陽離子脂質(zhì)體(由DC-Chol、磷脂酰膽堿和DSPE-PEG2000組成)絡合。脂質(zhì)體***增加Bcl-2AS-ODNs的細胞攝取，導致Bcl-2蛋白水平***下調(diào)。研究了AS-ODNs和陽離子脂質(zhì)體***特應性皮炎的療效。將靶向白介素-13的AS-ODNs與DOTAP和膽酸鈉組成的陽離子脂質(zhì)體配合，局部應用于特應性皮炎小鼠皮損。這種***劑量依賴性地緩解了特應性皮炎，200ugIL-13的AS-ODNs的抑制作用比較大。 相變溫度對脂質(zhì)體的影響。

兩者都含有一種可電離的脂質(zhì)，在低pH值下帶正電荷(使RNA絡合)，在生理pH值下為中性(減少潛在的毒性作用并促進有效載荷釋放)。它們還含有聚乙二醇化脂質(zhì)，以減少血清蛋白的抗體結合(調(diào)理)和吞噬細胞的***，從而延長體循環(huán)。輝瑞公司的陽離子脂質(zhì):peg脂質(zhì):膽固醇:DSPC的摩爾比為(43:1.6:47:9.4)，莫當納疫苗的摩爾比為(50:1.5:38.5:10)。這些納米顆粒直徑為80 - 100納米，每個脂質(zhì)納米顆粒含有大約100個mRNA分子。ALC-0315(輝瑞)和SM-102 (Moderna)這兩種脂質(zhì)都是叔胺，在低ph下質(zhì)子化(因此帶正電荷)。它們的碳氫鏈通過可生物降解的酯基連接，在mRNA傳遞后能夠安全***。mRNA疫苗中使用的陽離子脂質(zhì)含有支鏈烴鏈，這優(yōu)化了非層狀相的形成和mRNA的遞送效率。peg -脂質(zhì)均為PEG-2000偶聯(lián)物。LNPs是在低pH (pH 4.0)條件下制備的，在這種條件下，可電離的脂質(zhì)帶正電，因此它很容易與mRNA形成復合物。微流控裝置用于將水中含有mRNA的流與乙醇中含有脂質(zhì)混合物的流混合。當快速混合時，這兩種流的成分形成納米顆粒，捕獲帶負電荷的mRNA。脂質(zhì)體的Zeta電位的重要性。綠色熒光脂質(zhì)體載藥靶向肽

脂質(zhì)體核酸疫苗的穩(wěn)定性和儲存條件。安徽脂質(zhì)體載藥遞送效率

脂質(zhì)體成功降低了綠色熒光蛋白(GFP)的表達，并在H4II-E和HepG2細胞中顯示出較低的細胞毒性。在其他研究中，精氨酸衍生物N,N-distearyl-N-methyl-N-2-(N’-arginyl)aminoethylammoniumchloride被用于陽離子脂質(zhì)體與膽固醇的配制。將這些離子脂質(zhì)體與c-MycsiRNA絡合，并靜脈注射給B16F10黑色素瘤小鼠(1.2mg/kg，每天1次，連續(xù)3天)，導致B16F10**對紫杉醇增敏。另一項研究建議使用精氨酸基DiLA2脂質(zhì)作為載脂蛋白b特異性siRNA遞送的陽離子脂質(zhì)體組分。經(jīng)小鼠靜脈給藥(ED50，0.1mg/kg)后，DiLA2和DOPE制備的陽離子脂質(zhì)體顯示出抑制肝臟載脂蛋白BmRNA表達的潛力。單次全身給藥后，在給藥后第2天觀察到目標mRNA水平的比較大減少(約80%)，并且目標mRNA的減少持續(xù)到給藥后第9天。安徽脂質(zhì)體載藥遞送效率