藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復合物,屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到,它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學中,熒光團可以與蛋白質(zhì)結(jié)合,例如用于抗原檢測的抗體等,因為它能夠發(fā)出明亮的熒光。由于熒光團往往會很快發(fā)生光漂白,因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經(jīng)常用于流式細胞術?!鶆e藻藍蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣,別藻藍蛋白也屬于藻膽蛋白家族,是從紅藻中分離出來的。在594和633nm的激光線激發(fā)下,熒光團的比較大吸光度在650nm處,而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比,熒光團的靈敏度已顯示高5至10倍,并具有許多其他有益特性,包括大斯托克斯位移、高水溶性、長波長發(fā)射和耐猝滅。雖然別藻藍蛋白通常不用于需要光穩(wěn)定性的應用,但它***用于流式細胞術、ELISA、微陣列等過程以及各種依賴高靈敏度的應用。生物發(fā)光是利用熒光素酶報告基因在體內(nèi)表達產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學反映產(chǎn)生熒光。云南熒光染料IR780
熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其廣泛應用于熒光免疫,熒光探針,細胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復染劑,可作為背景對照,標記細胞核使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關系一目了然。熒光標記的單克隆抗體技術為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑共價結(jié)合在單克隆抗體上。免疫熒光標記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸熒光染料對細胞核染色后定量測量細胞所發(fā)出的熒光強度,就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量,并可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。有多種熒光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。廣州熒光染料Cy3CY5熒光染料是一種被廣泛應用于生物分子檢測和熒光成像等領域的高效、穩(wěn)定的熒光標記試劑。
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當今生物學研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合時還能夠改變某些細胞蛋白的正常生物學功能。此外,與許多其他熒光團相比,生物熒光團的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當下流行的生物熒光團之一,由238個氨基酸組成,其中三個負責發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中,熒光團與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當添加鈣時會發(fā)出藍光。通過DNA重組,研究人員可以使用負責產(chǎn)生蛋白質(zhì)的基因來研究給定的基因和蛋白質(zhì)。在這里,在將復合物插入細胞之前,該基因與另一個基因(負責產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的第二個基因)結(jié)合。如果細胞產(chǎn)生綠色熒光,研究人員就可以明顯看出該細胞能夠表達目標基因。GFP由488nm激光線激發(fā),可在510nm處檢測。來自熒光團的微弱信號可以使用抗GFP抗體放大。作為生物標記物,綠色熒光蛋白用于以下功能:監(jiān)測各種生理過程*識別蛋白質(zhì)定位*檢測轉(zhuǎn)基因表達
管可用于實驗室的熒光團數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標記生物相關分子的小型有機天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點:這些高熒光合成納米晶體由半導體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應用和該領域的顯著進步,已經(jīng)針對特定應用和儀器開發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣,多年來,大量復雜的熒光技術(例如,F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。D-熒光素鉀鹽南京星葉生物科技有限公司。
CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫,是由奇數(shù)個甲基單元連接的兩個氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標記,對于蛋白抗體的標記,可以通過簡單的混合反應來完成結(jié)合,下面我們介紹了蛋白抗體標記的標記方法,具有一定的參考意義。一、比較好蛋白制備1)為獲得標記效果,請制備蛋白(抗體)濃度為2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值為8.5±0.5。如果pH值低于8.0,應使用1M3)如果蛋白濃度低于2mg/mL,標記效率會**降低。為獲得比較好標記效率,建議**終蛋白濃度范圍為2-10mg/mL。4)蛋白必須在不含伯胺(如Tris或甘氨酸)的緩沖液中,和銨離子,否則會影響標記效率。2.染色制備(以CY3-NHS酯為例)將無水DMSO加入CY3-NHS酯小瓶中,制備成10mM儲備液。通過移液器或渦旋混合均勻計算。使用前需先使用縮合液(500μg/mL)(HY-D0178)活化另一個可進行后續(xù)標記實驗。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。吉林重慶熒光染料
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。云南熒光染料IR780
小動物***熒光成像技術是現(xiàn)***物醫(yī)學研究領域的一項重要技術,因其具有操作簡單、實時直觀、靈敏度高、實驗成本低等特點,已廣泛應用于生命科學、醫(yī)學研究及藥物開發(fā)等方面。納米材料在生物醫(yī)學領域得到廣泛應用,旨在解決傳統(tǒng)醫(yī)學面臨的各種醫(yī)學挑戰(zhàn),包括生物利用度差,靶向特異性受損,全身和***毒性等。納米材料具有很多與眾不同的優(yōu)點,比如多功能性、大的負載量、靶向性、血液循環(huán)時間長等。納米材料在生物醫(yī)學中起著關鍵作用,可以有效攜帶成像探針、***劑或生物材料并傳遞至靶點,如特定的***、組織甚至細胞。光學成像主要包括生物發(fā)光(bioluminescenceimaging,BLI)和焚光成像(fluorescenceimaging,F1)兩種技術。前者利用焚光素酶基因(如FLUC,RLUC,GLUC)標記細胞或DNA,其表達產(chǎn)物與莖火蟲素類底物反應產(chǎn)生熒光。后者包括多種熒光蛋白基因(如GFP,RFP,YFP等)、有機熒光染料、熒光上轉(zhuǎn)換納米粒子、量子點等的應用。 云南熒光染料IR780