異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機熒光染料，目前，這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術中。在495/517nm處，該染料會產生激發(fā)/發(fā)射峰值，并可借助異硫氰酸鹽反應基團與不同抗體結合，該基團可以和蛋白質上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結合。而它的基本成分——熒光素，其摩爾質量為332g/mol，常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術的首批染料，且其被當成AlexaFluor®488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng)，而該系統(tǒng)受藍色光譜中的光所激發(fā)。經常與FITC同時使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸]。與FITC相反，TRITC并非熒光素，而是羅丹明家族的衍生物。羅丹明也具有一個大的共軛芳香電子系統(tǒng)，正是該系統(tǒng)引發(fā)了它們的熒光行為。還有一點與FITC相反，TRITC(479g/mol)由比較**長為550nm的綠色光譜中的光所激發(fā)，它的比較大發(fā)射波長為573nm。與蛋白質（例如，抗體）結合也基于異硫氰酸鹽反應基團。DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料，它們是一族親脂性的熒光染料，用于細胞的形態(tài)學和結構研究。國產熒光染料APC

PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測，常用于流式細胞儀分析。盡管PI不能通過活細胞膜，但卻能穿過破損的細胞膜而對核染色。PI經常被用來與Calcein,AM、Hoechst33258或Hoechst33342等一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535nm和615nm。2.染色過程（1）將1/10培養(yǎng)基體積的PI染色液加入到細胞培養(yǎng)基中（也可以用1/10濃度的PI緩沖液代替培養(yǎng)基）。（2）在37℃培養(yǎng)細胞10～20分鐘。（3）用PBS或合適的緩沖液洗滌細胞兩次。（4）用535nm激發(fā)波長，615nm發(fā)射波長的濾光器的熒光顯微鏡觀察細胞。儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。注意事項：PI對人體有刺激性，請注意適當防護。濟南熒光染料Fluor 555脂溶性熒光染料cy3、cy5、cy7等。

SUPERGreenI（10,000×DMSO溶液，電泳級）儲存條件及注意事項4℃避光可保存12個月。本品用DMSO溶解，因DMSO的熔點是18.5℃，使用前請放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點●無毒性：屬花菁類染料，容易生物降解，無致*毒性?！耢`敏度高：至少可檢出20pgDNA，高于EB染色法25～100倍?！裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘枏?，背景信號低?！癫僮骱唵危簾o須脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察?！襁m用范圍廣：可適用于多種凝膠電泳方法：瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等?！袷褂梅奖悖簩Ψ肿由飳W中常用的酶（如：Taq酶、反轉錄酶、內切酶、T4連接酶等）沒有抑制作用。●經濟：價格比銀染便宜。

Hoechst33342是一種可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。Hoechst33342常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst33342-DNA的激發(fā)和發(fā)射波長分別為350nm和460nm。可溶于水。4.染色程序：（1）用PBS或合適的緩沖液制備10～50μMHoechst33342染料。（2）將1/10細胞培養(yǎng)基體積的Hoechst染料溶液加入細胞培養(yǎng)物中（可以用1/10濃度的Hoechst染料緩沖液代替培養(yǎng)基）。（3）在37℃培養(yǎng)細胞10～20分鐘。（4）用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。（5）用帶有350nm激發(fā)波長，460nm發(fā)射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右。

第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料，**初由化學公司HoechstAG生產。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺，具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢，因此后者不常使用。與DAPI相似，此類染料受到紫外線激發(fā)并在455nm下發(fā)射比較大值，在無結合狀態(tài)下變?yōu)?10–540nm。Hoechst染料還具有細胞滲透作用，因此可用于固定細胞和活細胞。與DAPI不同是，Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無法透過細胞膜。在細胞培養(yǎng)中，因為該染色劑無法進入完好的細胞內，所以常常被用來區(qū)分活細胞和死細胞。碘化丙啶也是一種結合劑，但對不同的堿基沒有特異性。在核酸結合態(tài)下，其比較大激發(fā)波長為538nm，比較高發(fā)射波長為617nm。未結合狀態(tài)下碘化丙啶的比較大激發(fā)和發(fā)射被移到較短的波長和較弱的強度。它也可以在不改變其熒光特性的情況下與RNA結合。要區(qū)分DNA和RNA，必須使用足夠的聚合酶。FITC熒光染料標記方法。水溶熒光染料Fluor 647

Cy5.5含有一個游離胺基,可與多種官能團共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。國產熒光染料APC

藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復合物，屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到，它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學中，熒光團可以與蛋白質結合，例如用于抗原檢測的抗體等，因為它能夠發(fā)出明亮的熒光。由于熒光團往往會很快發(fā)生光漂白，因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經常用于流式細胞術。※別藻藍蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣，別藻藍蛋白也屬于藻膽蛋白家族，是從紅藻中分離出來的。在594和633nm的激光線激發(fā)下，熒光團的比較大吸光度在650nm處，而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比，熒光團的靈敏度已顯示高5至10倍，并具有許多其他有益特性，包括大斯托克斯位移、高水溶性、長波長發(fā)射和耐猝滅。雖然別藻藍蛋白通常不用于需要光穩(wěn)定性的應用，但它***用于流式細胞術、ELISA、微陣列等過程以及各種依賴高靈敏度的應用。國產熒光染料APC