基因和RNAi***在臨床上的應(yīng)用需要安全高效的載體。迄今為止，核酸***的兩種主要方法是基于病毒和非病毒載體。與病毒載體相關(guān)的安全問題有很多:誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)、不必要的突變和**。因此，在開發(fā)基于脂質(zhì)或聚合載體的非病毒載體是勢在必行的。1965年，Vaheri和Pagano引入了二乙基氨基乙基修飾的葡聚糖，這是第一種用于基因傳遞的聚合物。1987年，F(xiàn)elgner引入了DOTMA，這是第一種用于DNA轉(zhuǎn)染的陽離子脂質(zhì)。從那時(shí)起，大量不同的脂質(zhì)和聚合物被開發(fā)出來。南京星葉生物正是利用將核酸封裝在納米級脂質(zhì)體囊泡中的技術(shù)，開發(fā)出了Gemate系列轉(zhuǎn)染試劑。但似乎找到一種既能改善基因表達(dá)又不影響細(xì)胞、不對細(xì)胞造成損害的技術(shù)也至關(guān)重要。貴州南京轉(zhuǎn)染試劑

陽離子脂質(zhì)體合成中常用的分子是中性脂質(zhì)二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。DOPE的作用是促進(jìn)膜融合，并有助于質(zhì)膜或核內(nèi)體的不穩(wěn)定。此外，由于陽離子脂質(zhì)相互排斥，因此需要DOPE等輔助脂質(zhì)來穩(wěn)定陽離子脂質(zhì)體（CLs）懸浮液，并抵消其他載體如聚乙烯亞胺(PEI)和樹狀大分子中存在的陰離子糖胺聚糖的抗轉(zhuǎn)染作用。沒有中性脂質(zhì)的脂質(zhì)體具有較低的轉(zhuǎn)染率，盡管情況并非總是如此。不同的轉(zhuǎn)染率可能是由用于配制脂質(zhì)體的陽離子:中性脂質(zhì)的不同比例引起的。如上所述，CLs介導(dǎo)的核酸轉(zhuǎn)移的成功取決于許多因素，這些因素可能解釋了脂質(zhì)體(脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染)的內(nèi)在變異性，特別是在體內(nèi)。湖南轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格deae-葡聚糖是一種化學(xué)修飾的葡聚糖類似物。

轉(zhuǎn)染是將外源核酸送入細(xì)胞的過程，其目的是使外源基因編碼的蛋白能夠在細(xì)胞中表達(dá)。這些編碼序列通常由質(zhì)粒DNA攜帶到細(xì)胞中，以研究其未知的功能或用于特定的***目的。此外，降低基因表達(dá)的siRNA也是核酸轉(zhuǎn)染的靶標(biāo)。通過siRNA的敲低作用，研究人員可以操縱愈合基因的表達(dá)來研究基因的功能和相互作用。siRNA在**研究、基因***、組織工程等方面發(fā)揮著重要作用。mRNA曾被認(rèn)為不適合用于基因***藥物，因?yàn)樗子诮到狻Ｈ欢?，研究人員通過化學(xué)修飾提高了其穩(wěn)定性，使其成為表達(dá)外源基因的理想核酸藥物。mRNA疫苗已用于預(yù)防COVID-19，許多用于*****的mRNA藥物正在開發(fā)中。裸核酸分子被細(xì)胞吸收的效率極低。這是因?yàn)楹怂崾怯H水、帶負(fù)電的生物分子，難以接近疏水、帶負(fù)電的脂質(zhì)細(xì)胞膜。因此，核酸分子必須通過載體傳遞到細(xì)胞中。核酸載體有兩種:病毒載體和非病毒載體。在轉(zhuǎn)染有效性和包裝能力方面，病毒載體表現(xiàn)良好。然而，病毒載體的缺點(diǎn)也不容忽視，比如容易引發(fā)炎癥反應(yīng)和基因突變。而非病毒載體的材料來源豐富，化學(xué)結(jié)構(gòu)可控，易于大量制備;因此，它們在核酸轉(zhuǎn)染中具有不可替代的作用。

為了在體外和體內(nèi)可重復(fù)地傳遞基因和siRNA，含有核酸的脂質(zhì)體、脂叢和多叢的配方需要精確組成轉(zhuǎn)染試劑。雖然有幾項(xiàng)研究已經(jīng)調(diào)查了血液成分如何使脂質(zhì)和聚合物納米顆粒不穩(wěn)定，對于介導(dǎo)細(xì)胞中基因傳遞或沉默的傳遞系統(tǒng)的**終組成知之甚少。多叢和脂叢的組成在系統(tǒng)給藥進(jìn)入血液后會發(fā)生不斷的變化。過多的聚合物鏈或脂質(zhì)體成分不強(qiáng)烈附著于復(fù)合物將從顆粒中脫落，而新的成分，如脂蛋白，可以粘附在復(fù)合物的表面。這不僅會導(dǎo)致顆粒的不穩(wěn)定，還會改變生物分布或促進(jìn)體內(nèi)***。了解在體內(nèi)遞送的每個(gè)階段(在給藥部位，在血液循環(huán)過程中，在***和組織的細(xì)胞外基質(zhì)中，以及**終進(jìn)入靶細(xì)胞時(shí))，多聚物和脂聚物的組成如何變化，可能有助于設(shè)計(jì)具有更高穩(wěn)定性的合成載體系統(tǒng)。研究人員集中研究了將合成t細(xì)胞免疫原作為DNA疫苗使用的方法。

deae-葡聚糖是一種化學(xué)修飾的葡聚糖類似物。通過用二乙基氨基乙基修飾，右旋糖酐鏈的酰胺化很容易被質(zhì)子化，這使得它可以自組裝成帶負(fù)電荷核酸的納米顆粒。deae -葡聚糖是***個(gè)用于核酸轉(zhuǎn)染的陽離子聚合物。早在20世紀(jì)50年代，它就極大地增強(qiáng)了脊髓灰質(zhì)炎病毒和SV40病毒DNA在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染。隨后，deae -葡聚糖被廣泛應(yīng)用于RNA或DNA的轉(zhuǎn)染。然而，由于以下原因，deae -葡聚糖并沒有作為比較好候選物:轉(zhuǎn)染效率遠(yuǎn)低于脂質(zhì)體等其他試劑;deae -葡聚糖的細(xì)胞毒性和免疫原性不容忽視。轉(zhuǎn)染時(shí)推薦使用血清減少或無血清培養(yǎng)基包括陽離子轉(zhuǎn)染試劑，如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。DOTAP 轉(zhuǎn)染試劑動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

用二乙基氨基乙基修飾，右旋糖酐鏈的酰胺化很容易被質(zhì)子化，這使得它可以自組裝成帶負(fù)電荷核酸的納米顆粒。貴州南京轉(zhuǎn)染試劑

**近的研究已經(jīng)確定了陽離子脂質(zhì)體（CLs）的某些特征，這些特征增強(qiáng)了它們在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)核酸的能力。這些特征包括陽離子頭基團(tuán)及其鄰近的脂肪鏈在主鏈上呈1,2關(guān)系，醚鍵用于橋接脂肪鏈到主鏈，成對的油基鏈作為疏水系鏈。無論如何，這些特征雖然不能決定細(xì)胞培養(yǎng)中更好的轉(zhuǎn)染能力，但可以在體內(nèi)實(shí)現(xiàn)更好的核酸遞送。因此，必須謹(jǐn)慎對待體外和細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果，不能必然地用來推斷核酸載體在體內(nèi)的潛力。當(dāng)這些囊泡在體內(nèi)引入時(shí)，其他因素(如顆粒直徑)變得更加重要。使用脂質(zhì)體時(shí)遇到的毒性通常與制劑中陽離子脂質(zhì)與核酸之間的電荷比、所使用的制劑類型以及所給脂質(zhì)體的劑量密切相關(guān)。較高的電荷比通常對多種細(xì)胞類型的毒性更大，包括*細(xì)胞系。另外，不同的試劑對細(xì)胞的毒性程度不同，毒性是細(xì)胞特異性的。目前市面上有超過30種不同的商用CL制劑品種可供選擇。由于毒性，脂質(zhì)體的體內(nèi)遞送必須盡可能靠近目標(biāo)部位，以盡量減少副作用。貴州南京轉(zhuǎn)染試劑