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寧夏熒光染料藍(lán)色

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-05

InvitrogenCy3染料是一種明亮的橙色熒光染料,可使用532nm激光線激發(fā),并使用TRITC(四甲基羅丹明)濾光片組進(jìn)行可視化。除了免疫細(xì)胞化學(xué)應(yīng)用,Cy3染料通常用于標(biāo)記核酸。發(fā)光說明:Cy3熒光團(tuán)也是親脂性神經(jīng)元和長(zhǎng)期DiI細(xì)胞追蹤試劑的基礎(chǔ),該試劑添加烷基尾(≥12個(gè)碳)添加到**熒光團(tuán)上。Cy3染料是用于成像、流式細(xì)胞術(shù)和基因組應(yīng)用的蛋白質(zhì)和核酸結(jié)合物的傳統(tǒng)橙色熒光標(biāo)簽。它也是經(jīng)典親脂性示蹤劑DiI及其變體的基礎(chǔ)。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu),Cy3可分為普通Cy3(常簡(jiǎn)稱Cy3)和磺化Cy3(Sulfo-Cy3)。Cy3水溶性較低,在水相標(biāo)記反應(yīng)時(shí)常常需要使用有機(jī)共溶劑,常用有機(jī)溶劑包括DMF,DMSO和乙腈等?;腔疌y3是在Cy3的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上磺化的產(chǎn)物,附帶2個(gè)或3個(gè)磺酸根離子。由于磺化效應(yīng),磺化Cy3的亮度比Cy3稍亮,熒光穩(wěn)定性也提高,可賴受更長(zhǎng)時(shí)間的曝光?;腔疌y3水溶性極高,所以在標(biāo)記反應(yīng)中不需要使用有機(jī)共溶劑,特別適合標(biāo)記蛋白等對(duì)有機(jī)溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性極好,并且染料分子本身帶電荷,標(biāo)記到蛋白表面后不會(huì)引發(fā)疏水性蛋白聚集,提高熒光標(biāo)記產(chǎn)物的穩(wěn)定性。當(dāng)然,磺化Cy3-NHS也可溶于甲醇,DMSO,DMF等有機(jī)溶劑,標(biāo)記反應(yīng)也可以在純有機(jī)溶劑中進(jìn)行。Super Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680)琥珀酰亞胺酯熒光染料。寧夏熒光染料藍(lán)色

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羰花青染料***用作Di來標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長(zhǎng)鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們?cè)谥|(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們?cè)谑覝叵率怯蜖钗?,在水中發(fā)出微弱熒光,但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時(shí),它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞,這些染料就會(huì)在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散,導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞染色[1]。DiO、DiI、DiD和DiR呈現(xiàn)出不同的綠色、橙色、紅色和紅外熒光,從而促進(jìn)活細(xì)胞的多色成像和流式細(xì)胞術(shù)分析。DiO和DiI可分別與標(biāo)準(zhǔn)FITC和TRITC過濾器一起使用。其中DiI及其類似物是**常用的,因?yàn)樗鼈兺ǔ1憩F(xiàn)出非常低的細(xì)胞毒性。此外,DiI***用于測(cè)定LDL和HDL等脂蛋白。親脂性氨基苯乙烯基染料DiA也常用于神經(jīng)元示蹤[2]。內(nèi)蒙古鄭州熒光染料DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的細(xì)胞可以分別用經(jīng)典的FL1,F(xiàn)L2,F(xiàn)L3和FL4流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

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1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲(chǔ)存液:儲(chǔ)存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲(chǔ)存液保存在-20°C,避免反復(fù)凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲(chǔ)存液,配制濃度為1~5μM的工作液。注意:工作液的**終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來配制??梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細(xì)胞染色(1)懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。(2)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2~20分鐘,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。(3)染色細(xì)胞試管在1000~1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。(5)重復(fù)(3),(4)步驟兩次以上。

Hoechst33342是一種可透過細(xì)胞膜并對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。Hoechst33342常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst33342-DNA的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為350nm和460nm??扇苡谒?。4.染色程序:(1)用PBS或合適的緩沖液制備10~50μMHoechst33342染料。(2)將1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積的Hoechst染料溶液加入細(xì)胞培養(yǎng)物中(可以用1/10濃度的Hoechst染料緩沖液代替培養(yǎng)基)。(3)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10~20分鐘。(4)用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。(5)用帶有350nm激發(fā)波長(zhǎng),460nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。小動(dòng)物成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合。

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其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用,除細(xì)胞膜研究外,我們經(jīng)常也會(huì)對(duì)一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等,而對(duì)于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細(xì)胞核染色,可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細(xì)胞骨架的染色神器,羅丹明標(biāo)記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細(xì)胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細(xì)胞形態(tài)變化時(shí)經(jīng)常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環(huán)肽(橙紅)染色的細(xì)胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍(lán)色)染色的細(xì)胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細(xì)胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達(dá)或下調(diào)前后PDAC細(xì)胞形態(tài)的變化。D-熒光素鉀鹽熒光染料。內(nèi)蒙古鄭州熒光染料

CY7 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫,是由奇數(shù)個(gè)甲基單元連接的兩個(gè)氮原子組成的化合物。寧夏熒光染料藍(lán)色

SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級(jí))儲(chǔ)存條件及注意事項(xiàng)4℃避光可保存12個(gè)月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點(diǎn)●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒性。●靈敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍?!裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘?hào)強(qiáng),背景信號(hào)低?!癫僮骱?jiǎn)單:無須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。●適用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等?!袷褂梅奖悖簩?duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用?!窠?jīng)濟(jì):價(jià)格比銀染便宜。寧夏熒光染料藍(lán)色