小動物***熒光成像技術是現(xiàn)***物醫(yī)學研究領域的一項重要技術,因其具有操作簡單、實時直觀、靈敏度高、實驗成本低等特點,已廣泛應用于生命科學、醫(yī)學研究及藥物開發(fā)等方面。納米材料在生物醫(yī)學領域得到廣泛應用,旨在解決傳統(tǒng)醫(yī)學面臨的各種醫(yī)學挑戰(zhàn),包括生物利用度差,靶向特異性受損,全身和***毒性等。納米材料具有很多與眾不同的優(yōu)點,比如多功能性、大的負載量、靶向性、血液循環(huán)時間長等。納米材料在生物醫(yī)學中起著關鍵作用,可以有效攜帶成像探針、***劑或生物材料并傳遞至靶點,如特定的***、組織甚至細胞。光學成像主要包括生物發(fā)光(bioluminescenceimaging,BLI)和焚光成像(fluorescenceimaging,F1)兩種技術。前者利用焚光素酶基因(如FLUC,RLUC,GLUC)標記細胞或DNA,其表達產(chǎn)物與莖火蟲素類底物反應產(chǎn)生熒光。后者包括多種熒光蛋白基因(如GFP,RFP,YFP等)、有機熒光染料、熒光上轉換納米粒子、量子點等的應用。 目前常用標記蛋白/抗體的熒光素主要有BODIPY類、香豆素類、羅丹明類、近紅外類、NBD胺類以及菁染料等。合肥熒光染料DIL
CY5熒光染料是一種被廣泛應用于生物分子檢測和熒光成像等領域的高效、穩(wěn)定的熒光標記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料,其*大發(fā)射波長為670nm,其標記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細胞儀,檢測通道一般是FL4通道。除流式細胞術外,Cy5同樣適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術。需注意的是,Cy5與單核細胞和粒細胞的非特異性結合多,實驗結果容易出現(xiàn)假陽性。Cy5.5含有一個游離胺基,可與多種官能團共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。激發(fā)和發(fā)射的最大值分別為678nm和694nm。Cy5.5已應用于各種基于熒光的實驗中。Cy5.5是一種遠紅色(和近紅外)發(fā)射染料,是熒光測量的理想選擇。Cy5.5具有成本效益,且其標記化學操作簡單,適合于潛在的***藥物開發(fā)Cy5.5標記因子VIIa是用來想象**的。用這些靶向蛋白標記的Cy5.5在**異種移植物上特異定位至少14天,但未結合的Cy5.5不能定位于任何異種移植或***。這種**血管內皮細胞中抗組織因子的成像方法可用于檢測原發(fā)性**和轉移以及監(jiān)測體內***反應[1]。pH/溫度敏感磁性納米凝膠結合Cy5.5標記乳鐵蛋白(Cy5.5-Lf-MPNA納米凝膠)是一種有前途的膠質瘤術前MRI和術中熒光成像的對比劑[2]新疆熒光染料Fluor 488羰花青染料用作 Di 來標記細胞、細胞器、脂質體、病毒和脂蛋白。
納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸,納米粒子通常用于不同類型的細胞和組織的熒光成像。當今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點、貴金屬納米顆粒、聚合物點、量子點和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中,與其他分子熒光團和探針相比,納米顆粒/納米材料具有多種優(yōu)勢,使其成為理想的選擇。除了提高亮度外,納米粒子是惰性的并且往往分布均勻,這有助于在成像過程中獲得更好的結果。此外,與各種分子熒光團相比,納米顆粒和納米材料沒有細胞毒性,并且不受非特異性結合問題的影響。由于這些特性,大多數(shù)熒光納米顆粒(染色納米顆粒)可以內化到細胞/組織中,并容易靶向給定部位。
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級)儲存條件及注意事項4℃避光可保存12個月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒性?!耢`敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍?!裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘枏姡尘靶盘柕?。●操作簡單:無須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察?!襁m用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等?!袷褂梅奖悖簩Ψ肿由飳W中常用的酶(如:Taq酶、反轉錄酶、內切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用?!窠?jīng)濟:價格比銀染便宜。Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。
使用螢火蟲熒光素酶(Fluc)作為報告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像(BLI)是目前應用*****的技術。將總信號強度相對于 D-熒光素注射后的時間進行繪制,以生成時間-強度曲線。除了峰值信號外,還確定注射 D-熒光素后固定時間點(5、10、15 和 20 分鐘)的信號作為峰值信號的替代。給定時間-強度曲線中的信號針對曲線中的峰值信號進行歸一化,以表示 D-熒光素注射后時間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素(腹膜內或靜脈注射)儲備液:對于 20 g 小鼠,標準 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素(鉀鹽或鈉鹽)并溶解在 dPBS(不含鈣或鎂)中,**終濃度為 15 mg/mL。通過吸取 5-10 mL 無菌水來預濕 0.22 μm 過濾器。D-熒光素鉀鹽熒光染料。吉林廣州熒光染料
南京星葉生物提供多種性價比高的各類活化熒光素,例如Cy系列、Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)等。合肥熒光染料DIL
本質上,有機染料的特征在于源自在整個生色團上離域的光學躍遷或源自分子間電荷轉移躍遷(從激發(fā)電子態(tài)的分子內電荷轉移)的發(fā)射。在這里,表現(xiàn)出源自在整個生色團上離域的光學躍遷的發(fā)射的染料被稱為共振染料(介觀染料),而后者被稱為CT染料(電荷轉移染料)?;ㄇ唷⒘_丹明和熒光素是一些最常見的共振染料,其特點是窄的吸收和發(fā)射帶(略微結構化),往往相互鏡像,以及小的、對溶劑極性不敏感的斯托克斯位移。另一方面,CT染料包括香豆素和丹磺酰熒光團等染料,其特點是與共振染料相比,吸收和發(fā)射帶結構無結構,分離良好,以及更大的斯托克斯位移。同樣,與共振染料相比,CT染料具有更小的摩爾吸收系數(shù)和熒光量子產(chǎn)率。對于共振和CT熒光染料,在結構-性質關系眾所周知的情況下,可以通過精心設計的策略來微調光譜性質。合肥熒光染料DIL