熒光染料在細胞實驗中具有廣泛的應(yīng)用1、細胞膜標記:可以使用熒光染料標記細胞膜,以觀察和研究細胞膜的動態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。2、染色體和DNA標記:用熒光染料標記染色體或DNA,可以觀察和分析DNA復制、轉(zhuǎn)錄、修復等過程3、蛋白質(zhì)標記:通過熒光染料標記蛋白質(zhì),可以研究蛋白質(zhì)的相互作用、定位和運動等特性。4、細胞器標記:使用特定波長的熒光染料可以標記和可視化細胞中的線粒體、溶酶體等細胞器。5、神經(jīng)科學應(yīng)用:熒光染料在神經(jīng)科學中也有廣泛應(yīng)用,如標記神經(jīng)元和突觸,觀察神經(jīng)信號的傳遞等。6、基因表達分析:通過熒光染料標記基因表達產(chǎn)物,可以定量分析基因的表達水平和細胞中的分布情況。熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其應(yīng)用于熒光探針,細胞染色等。長沙熒光染料Alexa fluor
一:染色液制備1、配制儲液:儲液用無水DMSO或無水EtOH配制,濃度1~5mM。注:未使用的儲液建議分裝后儲存在-20℃,避免反復凍融。2、工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲液,配制濃度為1~5μM的工作液。注:工作液**終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開始比較好濃度的摸索。二:懸浮細胞染色1、加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。可以20min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標記效果。3、孵育結(jié)束,1000~1500rpm離心5min。傾倒上清液,再次緩慢加入37℃預(yù)熱的生長培養(yǎng)液重懸細胞。4、重復步驟3兩次以上。長沙熒光染料熒光素鉀鹽PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。
其他細胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用,除細胞膜研究外,我們經(jīng)常也會對一些其它細胞結(jié)構(gòu)及成分進行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細胞核等,而對于不同的細胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進行染色細胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細胞核染色,可將細胞核染成藍色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細胞骨架的染色神器,羅丹明標記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細胞形態(tài)變化時經(jīng)常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環(huán)肽(橙紅)染色的細胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍色)染色的細胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達或下調(diào)前后PDAC細胞形態(tài)的變化。
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料
多肽、蛋白、抗體標記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY5COOHCY5alkyneCY5hydrazideCY5ThiolCY7amineCY7maleimideCY7azideCY7COOHCY7alkyneCY7hydrazideCY7Thiol水溶性熒光染料Sulfo-Cyanine3NHSesterSulfo-Cyanine3amineSulfo-CY3azideSulfo-CY3carboxylicacidSulfo-CY3alkyneSulfo-CY3hydrazideSulfo-CY3ThiolSulfo-Cyanine5NHSesterSulfo-Cyanine5amineSulfo-CY5azideSulfo-CY5carboxylicacidSulfo-CY5alkyneSulfo-CY5hydrazideSulfo-CY5ThiolCY7NHSesterSulfo-Cyanine7NHSesterSulfo-Cyanine7amineSulfo-CY7azideSulfo-CY7carboxylicacidSulfo-CY7alkyneSulfo-CY7hydrazideSulfo-CY7Thiol近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料ICG-NHSesterICG-amineICG-maleimideICG-azideICG-COOHICG-alkyneICG-hydrazideICG-ThiolICG-TzICG-DBCO DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在小動物成像中用來示蹤。
Hoechst33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。用于細胞核染色時,推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項:Hoechst33258對人體有害,請注意適當防護。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液??篃晒獯銣绶馄?P0126)可以向碧云天訂購。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作注意事項:Hoechst33342對人體有一定刺激性,請注意適當防護。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。PI常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測,常用于流式細胞儀分析。青島熒光染料Cy7.5
5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一種胺活性衍生物的熒光染料.長沙熒光染料Alexa fluor
異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,F(xiàn)ITC):FITC是應(yīng)用*為***的一種熒光素,經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出明亮的黃綠色熒光,*大發(fā)射波長為525nm。FITC的熒光強度受PH影響較大,常隨著PH的降低而減弱,因此,在使用FITC時需格外注意溶液的酸堿度。a)電泳分離后的蛋白質(zhì)檢測(b)蛋白質(zhì)和肽的微測序分析(c)使用毛細管區(qū)帶電泳進行分子分析(d)生物相互作用中的分子跟蹤和檢測(e)細胞和組織切片中的抗原檢測(f)通過標記DNA片段進行細胞凋亡檢測除了因其在水中的溶解性而易于用于偶聯(lián)物制備外,異硫氰酸熒光素還具有明亮的熒光(由于偶聯(lián)后的大消光系數(shù)和高量子產(chǎn)率),使其成為許多工藝的優(yōu)先染料。在流式細胞術(shù)和免疫熒光顯微術(shù)中,染料與各種抗體(一抗或二抗)結(jié)合,以檢查和研究IL-17免疫缺陷和CD63在腎功能中的作用等狀態(tài)。作為熒光素的衍生物,異硫氰酸熒光素含有一個異硫氰酸酯反應(yīng)基團,這有助于其對通常存在于生物分子中的動漫和巰基基團具有反應(yīng)性。長沙熒光染料Alexa fluor