在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克隆)及其衍生物(例如藻紅藍(lán)蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團(tuán)。雖然熒光團(tuán)可用于在細(xì)胞、細(xì)菌和各種***中表達(dá)質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點(diǎn),即它可能很耗時(shí),并且在融合時(shí)還能夠改變某些細(xì)胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外,與許多其他熒光團(tuán)相比,生物熒光團(tuán)的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團(tuán)之一,由238個(gè)氨基酸組成,其中三個(gè)負(fù)責(zé)發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中,熒光團(tuán)與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當(dāng)添加鈣時(shí)會(huì)發(fā)出藍(lán)光。通過DNA重組,研究人員可以使用負(fù)責(zé)產(chǎn)生蛋白質(zhì)的基因來研究給定的基因和蛋白質(zhì)。在這里,在將復(fù)合物插入細(xì)胞之前,該基因與另一個(gè)基因(負(fù)責(zé)產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的第二個(gè)基因)結(jié)合。如果細(xì)胞產(chǎn)生綠色熒光,研究人員就可以明顯看出該細(xì)胞能夠表達(dá)目標(biāo)基因。GFP由488nm激光線激發(fā),可在510nm處檢測(cè)。來自熒光團(tuán)的微弱信號(hào)可以使用抗GFP抗體放大。作為生物標(biāo)記物,綠色熒光蛋白用于以下功能:監(jiān)測(cè)各種生理過程*識(shí)別蛋白質(zhì)定位*檢測(cè)轉(zhuǎn)基因表達(dá)CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測(cè)和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。陜西流式細(xì)胞熒光染料
CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測(cè)和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料,其*大發(fā)射波長(zhǎng)為670nm,其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀,檢測(cè)通道一般是FL4通道。除流式細(xì)胞術(shù)外,Cy5同樣適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù)。需注意的是,Cy5與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的非特異性結(jié)合多,實(shí)驗(yàn)結(jié)果容易出現(xiàn)假陽性。Cy5.5含有一個(gè)游離胺基,可與多種官能團(tuán)共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。激發(fā)和發(fā)射的最大值分別為678nm和694nm。Cy5.5已應(yīng)用于各種基于熒光的實(shí)驗(yàn)中。Cy5.5是一種遠(yuǎn)紅色(和近紅外)發(fā)射染料,是熒光測(cè)量的理想選擇。Cy5.5具有成本效益,且其標(biāo)記化學(xué)操作簡(jiǎn)單,適合于潛在的***藥物開發(fā)Cy5.5標(biāo)記因子VIIa是用來想象**的。用這些靶向蛋白標(biāo)記的Cy5.5在**異種移植物上特異定位至少14天,但未結(jié)合的Cy5.5不能定位于任何異種移植或***。這種**血管內(nèi)皮細(xì)胞中抗組織因子的成像方法可用于檢測(cè)原發(fā)性**和轉(zhuǎn)移以及監(jiān)測(cè)體內(nèi)***反應(yīng)[1]。pH/溫度敏感磁性納米凝膠結(jié)合Cy5.5標(biāo)記乳鐵蛋白(Cy5.5-Lf-MPNA納米凝膠)是一種有前途的膠質(zhì)瘤術(shù)前MRI和術(shù)中熒光成像的對(duì)比劑[2]組織熒光染料橙色羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。
管可用于實(shí)驗(yàn)室的熒光團(tuán)數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標(biāo)記生物相關(guān)分子的小型有機(jī)天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點(diǎn):這些高熒光合成納米晶體由半導(dǎo)體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應(yīng)用和該領(lǐng)域的顯著進(jìn)步,已經(jīng)針對(duì)特定應(yīng)用和儀器開發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣,多年來,大量復(fù)雜的熒光技術(shù)(例如,F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。
D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化螢火蟲產(chǎn)生典型的黃綠色光。該反應(yīng)的 560 nm 化學(xué)發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達(dá)到峰值,當(dāng)?shù)孜餆晒馑剡^量時(shí),光輸出與熒光素酶濃度成正比。熒光素酶 (luc) 基因是用于研究和藥物篩選的流行報(bào)告基因?;瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)幾乎沒有背景,使得 luc 報(bào)告基因成為檢測(cè)低水平基因表達(dá)的理想選擇。標(biāo)準(zhǔn)閃爍計(jì)數(shù)器可以可靠地測(cè)量低至 0.02 pg 的熒光素酶。除了作為基因表達(dá)報(bào)告者的作用外,熒光素酶還常用于極其靈敏的 ATP 檢測(cè)中[1]。我們提供螢火蟲熒光素酶 (HY-P1004)、熒光素游離酸 (HY-12591A) 及其水溶性鈉鹽 (HY-12591) 和鉀鹽 (HY-12591B)。Super Flour 系列在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度**增強(qiáng),這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色,這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,比較好濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng),在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 DiR的紅外熒光可以穿透細(xì)胞和組織,在***成像中用來示蹤。Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖稀j兾髁魇郊?xì)胞熒光染料
羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。陜西流式細(xì)胞熒光染料
熒光染料***用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,如流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡和免疫組化等,其中熒光淬滅是一個(gè)關(guān)鍵的考量因素,因?yàn)樗苯佑绊懙綄?shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。FITC(異硫氰酸熒光素)是一種常用的綠色熒光染料,具有較高的熒光量子產(chǎn)率和激發(fā)效率。然而,F(xiàn)ITC的一個(gè)主要缺點(diǎn)是容易受到環(huán)境因素的影響,如pH值、溫度、溶劑和離子強(qiáng)度等,從而導(dǎo)致熒光淬滅。此外,F(xiàn)ITC的光穩(wěn)定性相對(duì)較低,長(zhǎng)時(shí)間的光照會(huì)導(dǎo)致其熒光強(qiáng)度降低。CY5.5是一種遠(yuǎn)紅外熒光染料,具有較長(zhǎng)的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng),因此適用于多色熒光標(biāo)記和深組織成像。CY5.5相對(duì)于FITC來說,具有更好的光穩(wěn)定性,不易受到環(huán)境因素的影響。此外,CY5.5的熒光量子產(chǎn)率也較高,使其在熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色。AlexaFluor647是另一種常用的紅色熒光染料,具有與CY5.5相似的長(zhǎng)波長(zhǎng)激發(fā)和發(fā)射特性。AlexaFluor647的優(yōu)點(diǎn)是光穩(wěn)定性較好,可以承受長(zhǎng)時(shí)間的光照而不易淬滅。此外,它在多種溶劑和pH值范圍內(nèi)都能保持穩(wěn)定的熒光性能,因此在復(fù)雜的生物樣本中表現(xiàn)出色。
南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列(效果同Alexa Fluor 系列),質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。 陜西流式細(xì)胞熒光染料