FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點:活性熒光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團,生成分子探針,并通過熒光成像進行檢測。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化生物分子時,它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針,用于細胞成像、流式細胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標(biāo)記物具有無放射物污染、操作簡單等優(yōu)點,在蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來越廣泛的應(yīng)用。
南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)
且Super Fluor活化酯(與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同) Super Flour 系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH 4~10), 更好的抗淬滅性。中國澳門熒光染料IR825
熒光染料***用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,如流式細胞術(shù)、熒光顯微鏡和免疫組化等,其中熒光淬滅是一個關(guān)鍵的考量因素,因為它直接影響到實驗結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。FITC(異硫氰酸熒光素)是一種常用的綠色熒光染料,具有較高的熒光量子產(chǎn)率和激發(fā)效率。然而,F(xiàn)ITC的一個主要缺點是容易受到環(huán)境因素的影響,如pH值、溫度、溶劑和離子強度等,從而導(dǎo)致熒光淬滅。此外,F(xiàn)ITC的光穩(wěn)定性相對較低,長時間的光照會導(dǎo)致其熒光強度降低。CY5.5是一種遠紅外熒光染料,具有較長的激發(fā)和發(fā)射波長,因此適用于多色熒光標(biāo)記和深組織成像。CY5.5相對于FITC來說,具有更好的光穩(wěn)定性,不易受到環(huán)境因素的影響。此外,CY5.5的熒光量子產(chǎn)率也較高,使其在熒光標(biāo)記實驗中表現(xiàn)出色。AlexaFluor647是另一種常用的紅色熒光染料,具有與CY5.5相似的長波長激發(fā)和發(fā)射特性。AlexaFluor647的優(yōu)點是光穩(wěn)定性較好,可以承受長時間的光照而不易淬滅。此外,它在多種溶劑和pH值范圍內(nèi)都能保持穩(wěn)定的熒光性能,因此在復(fù)雜的生物樣本中表現(xiàn)出色。
南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列(效果同Alexa Fluor 系列),質(zhì)優(yōu)價廉。 四川熒光染料DID異硫氰酸熒光素含有一個異硫氰酸酯反應(yīng)基團這有助于其對通常存在于生物分子中的動漫和巰基基團具有反應(yīng)性。
CY5.5-NHS熒光染料是一種廣泛應(yīng)用于生物標(biāo)記和成像的熒光染料,CY5.5-NHS熒光染料具有優(yōu)異的熒光性能。其激發(fā)波長約為675nm,發(fā)射波長約為695nm,位于紅色光譜區(qū)域,這使得它在生物樣本中具有較強的穿透力,能夠深入組織內(nèi)部進行標(biāo)記和成像。此外,CY5.5-NHS熒光染料具有較高的熒光量子產(chǎn)率和光穩(wěn)定性,可以在較長時間的激發(fā)下保持穩(wěn)定的熒光信號,從而確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。CY5.5-NHS熒光染料作為一種***的熒光染料,在生物科學(xué)研究領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。其優(yōu)異的熒光性能、良好的生物相容性、***的適用范圍以及易于合成和修飾的優(yōu)點,使得它成為生物醫(yī)學(xué)研究中不可或缺的重要工具。
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級)儲存條件及注意事項4℃避光可保存12個月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒性?!耢`敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍?!裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘枏?,背景信號低?!癫僮骱唵危簾o須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察?!襁m用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等?!袷褂梅奖悖簩Ψ肿由飳W(xué)中常用的酶(如:Taq酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。●經(jīng)濟:價格比銀染便宜?;ㄇ囝悷晒馊玖蠈儆诠舱袢玖?,其特征在于具有離域電荷的氮原子(兩個氮原子)之間的聚甲炔染料。
二、***成像分析:D-熒光素,鉀鹽,D-PBS,不含鈣、鎂1、配制溶液使用無菌D-PBS(w/oCa2+;Mg2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/ml),0.22μm濾膜過濾除菌(避光),分裝后于-20℃或-80℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。使用時4℃融化,實驗前平衡至室溫(避光)2、注射量取決于注射方式,具體如下:注射方式劑量靜脈注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液腹腔注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液肌肉注射(27gauge針頭)50μl,濃度為1-2mg/ml熒光素工作液鼻內(nèi)注射(pipette)50μl,濃度為3mg/ml熒光素工作液3、注射入體內(nèi)10-20min(待光信號達到**強穩(wěn)定平臺期),再進行成像分析DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料,它們是一族親脂性的熒光染料,用于細胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。四川熒光染料DID
動物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)。中國澳門熒光染料IR825
一:染色液制備1、配制儲液:儲液用無水DMSO或無水EtOH配制,濃度1~5mM。注:未使用的儲液建議分裝后儲存在-20℃,避免反復(fù)凍融。2、工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲液,配制濃度為1~5μM的工作液。注:工作液**終濃度建議根據(jù)不同細胞系和實驗體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開始比較好濃度的摸索。二:懸浮細胞染色1、加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同??梢?0min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。3、孵育結(jié)束,1000~1500rpm離心5min。傾倒上清液,再次緩慢加入37℃預(yù)熱的生長培養(yǎng)液重懸細胞。4、重復(fù)步驟3兩次以上。中國澳門熒光染料IR825