脂質(zhì)體制備方法：二次乳化法該方法已被DepoCyte、DepoDur和Expel三種商業(yè)產(chǎn)品?于?產(chǎn)MVLs。整個?產(chǎn)過程通常包括以下四個順序操作:(1)形成“油包?”乳液，(2)形成“油包?”乳液，(3)在汽提?體或真空壓?的幫助下進(jìn)?溶劑萃取，(4)微濾去除游離藥物，濃縮和交換外部溶液。在?產(chǎn)過程中，應(yīng)提供?菌保證，因?yàn)橛捎谖⒘降腗VLs不能通過0.22μm過濾作為?菌批次?產(chǎn)。Lu等研究了?藝對布?卡因MVLs關(guān)鍵質(zhì)量屬性的影響，發(fā)現(xiàn)第?乳的粒徑隨著脂質(zhì)濃度的增加?增?，剪切速度對粒徑影響較?。對于第?種乳液，在溶劑去除過程中，由于?些MVLs坍塌，藥物從內(nèi)?相泄漏，導(dǎo)致包封效率降低。此外，?溫促進(jìn)了脂質(zhì)雙分?層的遷移和重排，導(dǎo)致脂質(zhì)融合和?腔的坍塌。由于在巨噬細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)了甘露糖受體， 因此甘露糖已被用于修飾陽離子脂質(zhì)體以靶向巨噬細(xì)胞遞送。石家莊脂質(zhì)體載藥影像

脂質(zhì)體核酸疫苗的穩(wěn)定性和儲存性脂質(zhì)納米顆粒-mrna制劑的儲存條件是其臨床轉(zhuǎn)化的重要考慮因素，因?yàn)閮Υ?水、冷凍和凍干儲存)和冷凍保護(hù)劑(蔗糖、海藻糖或甘露醇)的類型會影響脂質(zhì)納米顆粒-mrna制劑的長期穩(wěn)定性168。例如，將5%(w/v)的蔗糖或海藻糖添加到脂質(zhì)納米顆粒-mRNA配方中，儲存在液氮中，可以維持mRNA在體內(nèi)至少3個月的遞送效率168。值得注意的是，授權(quán)的COVID-19mRNA疫苗都是在蔗糖存在的冷凍條件下儲存17。mRNA-1273保存在-15°C至-20°C，解凍后直接注射17，而BNT162b2保存在-60°C至-80°C，注射前需要解凍和生理鹽水稀釋17。**近，根據(jù)新的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，歐洲藥品管理局(EMA)已批準(zhǔn)BNT162b2在-15°C至-25°C下儲存2周。盡管冷鏈運(yùn)輸可以維持疫苗活性，但不需要冷藏或冷凍儲存的脂質(zhì)納米顆粒-mrna制劑的開發(fā)不僅可以降低生產(chǎn)和運(yùn)輸成本，還可以加快疫苗接種過程。因此，研究影響脂質(zhì)納米顆粒-mrna配方長期儲存的因素是很重要的。中國臺灣全氟丙烷脂質(zhì)體載藥脂質(zhì)體根據(jù)室室結(jié)構(gòu)和層狀結(jié)構(gòu)可分為單層囊泡(ULVs)、寡層囊泡(OLVs)、多層囊泡(MLV)和多泡脂質(zhì)體(MVLs)。

在各種類型的脂質(zhì)體中，免疫脂質(zhì)體因其靶向能力而受到***關(guān)注。 由于存在附著在其表面的抗體，這些脂質(zhì)體表現(xiàn)出免疫應(yīng)答。免疫脂質(zhì)體的制備， 即抗體與脂質(zhì)體的偶聯(lián)，并不是那么簡單， 甚至在其配方過程中可能會帶來挑戰(zhàn)。 蛋白質(zhì)分子和單克隆抗體可以直接偶聯(lián)到脂質(zhì)體、聚乙二醇化脂質(zhì)體或聚乙二醇化脂質(zhì)體的聚乙二醇鏈上。與其他脂質(zhì)體類似，RES可以***和***體循環(huán)中的免疫脂質(zhì)體快速***。 因此，為了防止攝取和增加循環(huán)半衰期， 脂質(zhì)體被聚乙二醇化(涂有聚乙二醇)。 類似地， 抗體結(jié)合到聚乙二醇化脂質(zhì)體上也有報道。然而， 這種遞送系統(tǒng)的缺點(diǎn)是很難將抗體偶聯(lián)到聚乙二醇化脂質(zhì)體上， 因?yàn)楦叻肿恿康木垡叶兼湑贵w結(jié)合到脂質(zhì)體上造成空間位阻。此外， 結(jié)合抗體的靶向能力也因聚乙二醇的存在而降低。 為了克服這些問題， 并利用抗體偶聯(lián)到 聚乙二醇化脂質(zhì)體的聚乙二醇鏈上， 以達(dá)到期望的靶向目的。

適用于脂質(zhì)體載藥的熒光染料一些常用于標(biāo)記脂質(zhì)體的熒光染料包括：1.DiO（DiOC18(3)）：DiO是一種疏水性的熒光染料，可以插入到脂質(zhì)雙層中，用于標(biāo)記脂質(zhì)體的膜。它在綠色波長下發(fā)出熒光。2.DiI（DiIC18(3)）：類似于DiO，DiI也是一種疏水性的熒光染料，可以插入到脂質(zhì)雙層中。它在紅色波長下發(fā)出熒光。3.RhodaminePE：RhodaminePE是一種紅色熒光染料，常用于標(biāo)記脂質(zhì)體的表面。它具有良好的熒光穩(wěn)定性和光學(xué)性能。4.NBD（Nitrobenzoxadiazole）衍生物：NBD衍生物是一類疏水性熒光染料，常用于標(biāo)記脂質(zhì)體內(nèi)部的脂質(zhì)分子。它們在藍(lán)色至綠色波長下發(fā)出熒光。5.BODIPY（4,4-Difluoro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene）衍生物：BODIPY衍生物也是一類常用的脂質(zhì)體標(biāo)記染料，它們具有較強(qiáng)的熒光信號和良好的化學(xué)穩(wěn)定性。這些熒光染料可以根據(jù)需要選擇不同的激發(fā)波長和發(fā)射波長，以滿足實(shí)驗(yàn)的要求，并且它們通常與脂質(zhì)體中的脂質(zhì)相容，不會對脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)產(chǎn)生***影響。被動載藥?法是在脂質(zhì)體制備過程中對藥物進(jìn)?包封的方法。

脂質(zhì)體核酸疫苗核酸***劑是一類新興的藥物，顯示出***各種疾病的潛力。然而，由于核酸是多價陰離子和高度親水分子，它們幾乎不被細(xì)胞吸收。它們也很容易被血液中的核酸酶降解。因此，它們需要一種傳遞載體才能進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)揮作用。LNP載體是核酸類藥物的成功載體之一。核酸藥物Patisiran(ONPATTRO)是一種在LNPs中配方的siRNA，用于減少肝臟中甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的形成，**近獲得FDA批準(zhǔn)用于***遺傳性甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)介導(dǎo)的淀粉樣變性。它是**早獲批的siRNA藥物，也是**早的lnp配方核酸藥物，標(biāo)志著核酸***學(xué)發(fā)展的一個重要里程碑。COVID-19mRNA疫苗中的LNPs。LNPs的***成功應(yīng)用是輝瑞/BioNTech和莫當(dāng)納**近批準(zhǔn)的兩種COVID-19信使RNA(mRNA)疫苗的遞送載體，這兩種疫苗的開發(fā)速度****，在疾病預(yù)防方面顯示出顯著的效果。疫苗將編碼SARS-CoV-2刺突蛋白的mRNA送入宿主細(xì)胞細(xì)胞質(zhì);mRNA被翻譯成刺突蛋白，刺突蛋白作為抗原，導(dǎo)致對病毒產(chǎn)生免疫反應(yīng)。兩種mRNA疫苗的脂質(zhì)納米顆粒的組成非常相似。中性脂也經(jīng)常被用作陽離子脂質(zhì)體的助手，DOPE在胞吞作用后參與內(nèi)體逃逸。石家莊脂質(zhì)體載藥影像

脂質(zhì)體核酸疫苗的穩(wěn)定性和儲存條件。石家莊脂質(zhì)體載藥影像

PEG的低分?量(<750Da)顯?出不***的空間穩(wěn)定作?[58]。此外，當(dāng)PEG-DSPE在脂質(zhì)組合中的濃度為7±2mol%時，脂質(zhì)體的?物穩(wěn)定性**?，?在體內(nèi)使?的peg-脂質(zhì)偶聯(lián)物的典型濃度為5mol%(例如Doxil)。當(dāng)PEG-DSPE濃度低于4mol%時，PEG鏈呈“蘑菇”狀，厚度約為3.5nm。隨著濃度增加4-8mol%，PEG鏈的構(gòu)型轉(zhuǎn)變?yōu)椤八睢?，厚度?.5-10nm。進(jìn)?步增加摩爾?，形成膠束?不是脂質(zhì)體組裝。綜上所述，PEG2000在脂質(zhì)體中的作用包括增強(qiáng)穩(wěn)定性、延長血液循環(huán)時間、降低免疫原性以及調(diào)控藥物釋放，使其成為藥物輸送系統(tǒng)設(shè)計中常用的功能性修飾劑。石家莊脂質(zhì)體載藥影像