為什么要使用熒光染料？雖然不同的染色技術（即考馬斯染色、銀染色、熒光染色）可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質，但使用熒光染料具有其獨特的優(yōu)勢。他們提供：高靈敏度：對于大多數分析物，熒光測量的靈敏度比吸光度測量高1000倍，即使在使用小樣本時也可以令人滿意地達到ppt（萬億分之一）的檢測限。寬線性動態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾：由于吸收光的材料數量眾多，分光光度測量通常會遇到干擾問題。在進行熒光測量時不會遇到這個問題，因為只有少數材料具有熒光能力。高通量：熒光測量具有簡單而強大的協議，并且可以自動化用于高通量應用。CY5熒光染料是一種被廣泛應用于生物分子檢測和熒光成像等領域的高效、穩(wěn)定的熒光標記試劑。貴州蘇州熒光染料

Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右，它的熒光肉眼觀察很明亮，并且對pH不敏感，在共聚焦顯微鏡中可以用532nm（肩峰）或者556nm（頂峰）的激光束激發(fā)，在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察，所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細胞電位追蹤劑的母核，所以它是在生物技術中非常有用的熒光染料。在熒光成像時，Cy3的背景熒光一般認為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標記蛋白，抗體，多肽等，它常見的使用是標記核酸分子（DNA和RNA）?；跓晒鈭D譜的相似性，Cy3可以被TAMRA，TRITC, BODIPY TMR等染料替代，在需要更明亮，更穩(wěn)定的替代物時，可以考慮使用AF547或者AF555等。云南廣州熒光染料吲哚菁綠（Indocyanine Green，簡稱ICG）是一種廣泛應用于醫(yī)學和生物領域的熒光染料。

納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸，納米粒子通常用于不同類型的細胞和組織的熒光成像。當今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點、貴金屬納米顆粒、聚合物點、量子點和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中，與其他分子熒光團和探針相比，納米顆粒/納米材料具有多種優(yōu)勢，使其成為理想的選擇。除了提高亮度外，納米粒子是惰性的并且往往分布均勻，這有助于在成像過程中獲得更好的結果。此外，與各種分子熒光團相比，納米顆粒和納米材料沒有細胞毒性，并且不受非特異性結合問題的影響。由于這些特性，大多數熒光納米顆粒（染色納米顆粒）可以內化到細胞/組織中，并容易靶向給定部位。

CY5.5-NHS熒光染料是一種廣泛應用于生物標記和成像的熒光染料，CY5.5-NHS熒光染料具有優(yōu)異的熒光性能。其激發(fā)波長約為675nm，發(fā)射波長約為695nm，位于紅色光譜區(qū)域，這使得它在生物樣本中具有較強的穿透力，能夠深入組織內部進行標記和成像。此外，CY5.5-NHS熒光染料具有較高的熒光量子產率和光穩(wěn)定性，可以在較長時間的激發(fā)下保持穩(wěn)定的熒光信號，從而確保實驗結果的準確性和可靠性。CY5.5-NHS熒光染料作為一種***的熒光染料，在生物科學研究領域具有廣泛的應用前景。其優(yōu)異的熒光性能、良好的生物相容性、***的適用范圍以及易于合成和修飾的優(yōu)點，使得它成為生物醫(yī)學研究中不可或缺的重要工具。Hoechst 33342是一種可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。

一種發(fā)光雜環(huán)化合物，存在于生物發(fā)光的生物體中，如螢火蟲。在含有三磷酸腺苷的情況下，通過熒光素酶氧化脫羧產生光?？捎糜跓晒馑孛干锇l(fā)光成像和細胞高通量篩選應用。D-熒光素（D-Luciferin）是螢火熒光素酶底物，其量子效率為0.88，是Luminol的20倍。反應原理：首先，在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應，接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結構并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測定細胞活力以及細菌計數。它還用于報告基因檢測。可與小動物***成像系統(tǒng)配套使用，用于標記LUC基因后的體內***熒光檢測。D-熒光素游離酸（D-Luciferin,freeacid）、D-熒光素鉀鹽（D-Luciferin,potassiumsalt）和D-熒光素鈉鹽（D-Luciferin,sodiumsalt），鉀鹽、鈉鹽的形式是**通用的，因為它們都易溶于水。鉀鹽也是***動物檢測使用的主要形式。它們的激發(fā)和發(fā)射波長分別為328nm和533nm。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右。廣東高分子熒光染料

熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。貴州蘇州熒光染料

使用螢火蟲熒光素酶（Fluc）作為報告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像（BLI）是目前應用*****的技術。將總信號強度相對于 D-熒光素注射后的時間進行繪制，以生成時間-強度曲線。除了峰值信號外，還確定注射 D-熒光素后固定時間點（5、10、15 和 20 分鐘）的信號作為峰值信號的替代。給定時間-強度曲線中的信號針對曲線中的峰值信號進行歸一化，以表示 D-熒光素注射后時間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素（腹膜內或靜脈注射）儲備液：對于 20 g 小鼠，標準 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素（鉀鹽或鈉鹽）并溶解在 dPBS（不含鈣或鎂）中，**終濃度為 15 mg/mL。通過吸取 5-10 mL 無菌水來預濕 0.22 μm 過濾器。貴州蘇州熒光染料