一種發(fā)光雜環(huán)化合物，存在于生物發(fā)光的生物體中，如螢火蟲。在含有三磷酸腺苷的情況下，通過熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光。可用于熒光素酶生物發(fā)光成像和細胞高通量篩選應(yīng)用。D-熒光素（D-Luciferin）是螢火熒光素酶底物，其量子效率為0.88，是Luminol的20倍。反應(yīng)原理：首先，在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應(yīng)，接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測定細胞活力以及細菌計數(shù)。它還用于報告基因檢測?？膳c小動物***成像系統(tǒng)配套使用，用于標記LUC基因后的體內(nèi)***熒光檢測。D-熒光素游離酸（D-Luciferin,freeacid）、D-熒光素鉀鹽（D-Luciferin,potassiumsalt）和D-熒光素鈉鹽（D-Luciferin,sodiumsalt），鉀鹽、鈉鹽的形式是**通用的，因為它們都易溶于水。鉀鹽也是***動物檢測使用的主要形式。它們的激發(fā)和發(fā)射波長分別為328nm和533nm。異硫氰酸熒光素含有一個異硫氰酸酯反應(yīng)基團這有助于其對通常存在于生物分子中的動漫和巰基基團具有反應(yīng)性。廣西鄭州熒光染料

染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族，用于標記細胞膜和疏水性組織。這是一類環(huán)境敏感型熒光染料，當它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質(zhì)，雖然在水中其熒光強度很弱)結(jié)合時，其熒光強度***增強。它們具有很高的淬滅系數(shù)，偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。一旦應(yīng)用于細胞中，這種染料會在細胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴散，導(dǎo)致在其比較好濃度條件下，將整個細胞染色。它們不同的熒光顏色：DiI（橙色熒光）、DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細胞多色彩熒光成像分析和流式細胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標準的FITC和TRITC濾光器一同使用。其中，DiO可以被633 nm He-Ne激光激發(fā)，并且具有比DiI更長的激發(fā)和發(fā)射光波長，為標記細胞和組織的那些本身就具有本底熒光的染料提供了非常***的替代品。DiR在***成像或者示蹤中非常有用，因為它們所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織，并且在紅外光范圍內(nèi)，其本底熒光水平很低。納米熒光染料流式細胞南京星葉生物提供多種性價比高的各類活化熒光素，例如Cy系列、Super Fluor 系列（效果同Alexa Fluor系列）等。

使用螢火蟲熒光素酶（Fluc）作為報告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像（BLI）是目前應(yīng)用*****的技術(shù)。將總信號強度相對于 D-熒光素注射后的時間進行繪制，以生成時間-強度曲線。除了峰值信號外，還確定注射 D-熒光素后固定時間點（5、10、15 和 20 分鐘）的信號作為峰值信號的替代。給定時間-強度曲線中的信號針對曲線中的峰值信號進行歸一化，以表示 D-熒光素注射后時間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素（腹膜內(nèi)或靜脈注射）儲備液：對于 20 g 小鼠，標準 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素（鉀鹽或鈉鹽）并溶解在 dPBS（不含鈣或鎂）中，**終濃度為 15 mg/mL。通過吸取 5-10 mL 無菌水來預(yù)濕 0.22 μm 過濾器。

常用抗體標記熒光染料的特性及其應(yīng)用

1、FITC:激發(fā)波長488nm，比較大發(fā)射波長525nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強度易受PH值影響，PH值降低時其熒光強度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長488nm，比較大發(fā)射波長519nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性，非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司SuperFluor系列（效果同AlexaFluor系列）質(zhì)優(yōu)價廉，歡迎咨詢。3、Cy3:激發(fā)波長488nm，比較大發(fā)射波長570nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL2通道檢測:3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)為小分子染料，非常適合需小分子染料的流式細胞術(shù)，熒光強度低于PE。 小動物成像熒光染料能夠選擇性地與目標細胞或組織結(jié)合。

熒光染料標記蛋白或肽技術(shù)是一種常見的蛋白質(zhì)體外標記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達外，目標蛋白還可以通過熒光染料標記直接進行下游實驗操作，如***跟蹤、細胞分選等。

FITC熒光標記的原理是什么？

熒光標記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學結(jié)構(gòu)的化合物。當受到紫外線或藍紫光的照射時，它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時，它會發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標記技術(shù)利用熒光材料的共價結(jié)合在目標分子的基團上，利用其熒光特性提供研究對象的信息。 染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族，用于標記細胞膜和疏水性組織。外泌體熒光染料綠色

羰花青染料用作 Di 來標記細胞、細胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。廣西鄭州熒光染料

除了以上應(yīng)用，吲哚菁綠還可以用于生物識別和藥物輸送。在生物識別中，吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合，從而實現(xiàn)對這些分子的檢測和定量分析。這項技術(shù)在生物醫(yī)學研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用前景。此外，吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分，將藥物包裹在其分子結(jié)構(gòu)中，通過近紅外光***釋放藥物，實現(xiàn)靶向***。吲哚菁綠作為一種多功能的熒光染料，在醫(yī)學和生物領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。其綠色溶解度的優(yōu)良性能，使其能夠在水溶液中快速溶解，為其在醫(yī)學影像學、光熱***、生物識別和藥物輸送等方面的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。隨著科學技術(shù)的不斷進步，相信吲哚菁綠在未來將發(fā)揮更大的潛力，為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻。吲哚菁綠作為一種熒光染料，在醫(yī)學影像學中的應(yīng)用是**為突出的。它可以通過靜脈注射進入人體血液循環(huán)系統(tǒng)，并在近紅外激光的照射下發(fā)出熒光信號。這種熒光信號可以被**的顯像設(shè)備捕獲和記錄，從而形成高分辨率、高對比度的影像。這樣的影像可以幫助醫(yī)生觀察和分析血管、淋巴系統(tǒng)以及**等病變的情況，提供重要的診斷依據(jù)。廣西鄭州熒光染料