熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其廣泛應用于熒光免疫,熒光探針,細胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關研究。另有很多核酸染料在多色染色系統中是非常有用的復染劑,可作為背景對照,標記細胞核使細胞內結構的空間關系一目了然。熒光標記的單克隆抗體技術為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內各種功能性抗原、**基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。熒光探針可以通過蛋白質交聯劑共價結合在單克隆抗體上。免疫熒光標記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸熒光染料對細胞核染色后定量測量細胞所發(fā)出的熒光強度,就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量,并可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。有多種熒光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。D-熒光素鉀鹽小動物成像。山東光敏劑熒光染料
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲存液:儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲存液保存在-20°C,避免反復凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5μM的工作液。注意:工作液的**終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制??梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找比較好條件。
2.懸浮細胞染色(1)懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。(2)在37℃培養(yǎng)細胞2~20分鐘,不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。(3)染色細胞試管在1000~1500轉離心5分鐘。(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預溫37℃的培養(yǎng)液。(5)重復(3),(4)步驟兩次以上。 廈門熒光染料流式細胞CY7 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫,是由奇數個甲基單元連接的兩個氮原子組成的化合物。
管可用于實驗室的熒光團數量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標記生物相關分子的小型有機天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質,由于它們的大分子結構而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點:這些高熒光合成納米晶體由半導體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應用和該領域的顯著進步,已經針對特定應用和儀器開發(fā)和優(yōu)化了數百種活性熒光染料。同樣,多年來,大量復雜的熒光技術(例如,FRET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術中非常有用的熒光染料。在熒光成像時,Cy3的背景熒光一般認為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標記蛋白,抗體,多肽等,它常見的使用是標記核酸分子(DNA和RNA)?;跓晒鈭D譜的相似性,Cy3可以被TAMRA,TRITC, BODIPY TMR等染料替代,在需要更明亮,更穩(wěn)定的替代物時,可以考慮使用AF547或者AF555等。Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素熒光染料。
InvitrogenCy3染料是一種明亮的橙色熒光染料,可使用532nm激光線激發(fā),并使用TRITC(四甲基羅丹明)濾光片組進行可視化。除了免疫細胞化學應用,Cy3染料通常用于標記核酸。發(fā)光說明:Cy3熒光團也是親脂性神經元和長期DiI細胞追蹤試劑的基礎,該試劑添加烷基尾(≥12個碳)添加到**熒光團上。Cy3染料是用于成像、流式細胞術和基因組應用的蛋白質和核酸結合物的傳統橙色熒光標簽。它也是經典親脂性示蹤劑DiI及其變體的基礎。根據化學結構,Cy3可分為普通Cy3(常簡稱Cy3)和磺化Cy3(Sulfo-Cy3)。Cy3水溶性較低,在水相標記反應時常常需要使用有機共溶劑,常用有機溶劑包括DMF,DMSO和乙腈等。磺化Cy3是在Cy3的結構基礎上磺化的產物,附帶2個或3個磺酸根離子。由于磺化效應,磺化Cy3的亮度比Cy3稍亮,熒光穩(wěn)定性也提高,可賴受更長時間的曝光。磺化Cy3水溶性極高,所以在標記反應中不需要使用有機共溶劑,特別適合標記蛋白等對有機溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性極好,并且染料分子本身帶電荷,標記到蛋白表面后不會引發(fā)疏水性蛋白聚集,提高熒光標記產物的穩(wěn)定性。當然,磺化Cy3-NHS也可溶于甲醇,DMSO,DMF等有機溶劑,標記反應也可以在純有機溶劑中進行。Super Flour 系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應用范圍(pH 4~10), 更好的抗淬滅性。江蘇熒光染料
D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,存在于多種發(fā)光生物體中。山東光敏劑熒光染料
南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料
多肽、蛋白、抗體標記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY5COOHCY5alkyneCY5hydrazideCY5ThiolCY7amineCY7maleimideCY7azideCY7COOHCY7alkyneCY7hydrazideCY7Thiol水溶性熒光染料Sulfo-Cyanine3NHSesterSulfo-Cyanine3amineSulfo-CY3azideSulfo-CY3carboxylicacidSulfo-CY3alkyneSulfo-CY3hydrazideSulfo-CY3ThiolSulfo-Cyanine5NHSesterSulfo-Cyanine5amineSulfo-CY5azideSulfo-CY5carboxylicacidSulfo-CY5alkyneSulfo-CY5hydrazideSulfo-CY5ThiolCY7NHSesterSulfo-Cyanine7NHSesterSulfo-Cyanine7amineSulfo-CY7azideSulfo-CY7carboxylicacidSulfo-CY7alkyneSulfo-CY7hydrazideSulfo-CY7Thiol近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料ICG-NHSesterICG-amineICG-maleimideICG-azideICG-COOHICG-alkyneICG-hydrazideICG-ThiolICG-TzICG-DBCO 山東光敏劑熒光染料