外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的方法有很多種，如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染，其主要成分為HEPES，HEPES是一種非離子兩性緩沖劑，能有效控制pH在范圍，尤其在pH具有較好的緩沖能力，終濃度一般為mmol/L，培養(yǎng)液內(nèi)含mmol/LHEPES 即可達(dá)到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其**適pH值為，經(jīng)過(guò)濾除菌處理。影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細(xì)胞上停留的時(shí)間、休克時(shí)間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜，Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置，CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過(guò)甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。國(guó)內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨HEPES！重慶供注射用HEPES需求

粉末可于室溫保存數(shù)年。不過(guò)一經(jīng)靜置，散裝粉末可能聚集在一起，形成硬塊，但是不會(huì)影響其化學(xué)性質(zhì)。儲(chǔ)存方法：MOPS粉末可以室溫穩(wěn)定保存數(shù)年。長(zhǎng)時(shí)間放置可能會(huì)結(jié)塊，不影響其使用和化學(xué)性質(zhì)。注意事項(xiàng)：MOPS緩沖液可于2~8℃保存至少6個(gè)月，用0.2μm濾膜過(guò)濾除菌，不推薦高壓滅菌。如需配制無(wú)核酸酶的MOPS溶液，可先對(duì)水進(jìn)行高壓滅菌后，再加入粉末溶解。4-羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES，CAS是7365-45-9，是可滿足于所有生物學(xué)研究的比較好緩沖液之一，是一種兩性離子有機(jī)化學(xué)緩沖液，和MES、MOPS一樣都屬于“Good”緩沖液。PH緩沖范圍為6.8-8.2。HEPES緩沖液常用于細(xì)胞培養(yǎng)的緩沖體系，常用工作濃度為10-25mM；與無(wú)機(jī)碳酸氫鹽緩沖液相比，在組織或者***培養(yǎng)中表現(xiàn)出更好的pH控制能力。它還用于等電聚焦電泳實(shí)驗(yàn)。用作電鏡觀察蛋白沉積技術(shù)合適的緩沖體系，它不會(huì)對(duì)金屬基板造成負(fù)面影響。用作定量和選擇性測(cè)定抗原-抗體反應(yīng)的緩沖液，不適合用在福林酚蛋白測(cè)定，但不會(huì)影響B(tài)iuret蛋白定量分析。高純度HEPES使用注意事項(xiàng)GMP條件下生產(chǎn)AVT穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES！

注射級(jí)HEPES使用方法有兩種：(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過(guò)濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2，濾過(guò)除菌后使用。此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，過(guò)濾除菌，分裝小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。需要注意的是，HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L，對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。一般情況下，濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力?，F(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶，大家根據(jù)實(shí)際情況正確靈活配制就OK了

HEPESCAS：7365-45-9）HEPES作為兩性離子生物緩沖液，pH緩沖范圍6.8-8.2。常應(yīng)用于針對(duì)各種類型有機(jī)體的細(xì)胞培養(yǎng)基、蛋白質(zhì)研究，還可用于生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里，因具有對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用且能長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍等優(yōu)點(diǎn)，常備用作化妝品添加劑，起到活性劑、脫皮劑、促透劑等作用。還可作為一種有效的還原劑和穩(wěn)定劑應(yīng)用于過(guò)渡金屬納米顆粒的制備過(guò)程中。艾偉拓現(xiàn)貨供應(yīng)高純度注射級(jí)HEPES，GMP條件生產(chǎn)，純國(guó)產(chǎn)化價(jià)格優(yōu)惠艾偉拓長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)注射級(jí)海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽。

緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的重要溶液，對(duì)穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以**常見(jiàn)的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷（簡(jiǎn)稱Tris）-HCl緩沖溶液、羥乙基哌嗪乙磺酸（供注射用）（簡(jiǎn)稱HEPES）緩沖溶液為例，介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。HEPES緩沖溶液具有對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性、不易穿過(guò)生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程等特點(diǎn)，所以在生化實(shí)驗(yàn)中具有***的應(yīng)用，如可用于開(kāi)放式細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞的長(zhǎng)期觀察、RNA或DNA提取試劑盒中。其次，相關(guān)研究表明以HEPES溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng)。另外，HEPES緩沖溶液對(duì)鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明，HEPES能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成。艾偉拓長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)注射級(jí)HEPES生物保護(hù)劑與緩沖鹽。山東HEPES現(xiàn)貨供應(yīng)

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各種配制方法總結(jié)如下：一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容至500ml，于4攝氏度保存。二、加少量鹽的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值，***定容。三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸餾水，用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可。重慶供注射用HEPES需求

【關(guān)于我們】艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司AVT.是國(guó)內(nèi)一家專營(yíng)磷脂類藥用輔料的科技公司，旗下產(chǎn)品覆蓋天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂等細(xì)分領(lǐng)域，并提供諸如油酸、油酸鈉、膽固醇等相關(guān)輔料產(chǎn)品。A.V.T.專注脂質(zhì)體、脂肪乳、微納米靶向制劑等遞藥體系，是國(guó)內(nèi)藥企、高校、研究所等單位主要磷脂供應(yīng)商。

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