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HEPES使用方法有兩種:(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過(guò)濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過(guò)除菌后使用。此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過(guò)濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。需要注意的是,HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。一般情況下,濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力?,F(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶,大家根據(jù)實(shí)際情況正確靈活配制就OK了注射級(jí),低內(nèi)***、國(guó)產(chǎn)化穩(wěn)定供應(yīng)、高性價(jià)比注射級(jí)HEPES找AVT。四川有登記號(hào)HEPES價(jià)格
(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過(guò)濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過(guò)除菌后使用.此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過(guò)濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.作者:知乎用戶0mmkBe云南試劑級(jí)HEPES價(jià)格國(guó)內(nèi)AVT注射用HEPES已登記!
生物緩沖劑在生物實(shí)驗(yàn)中會(huì)經(jīng)常被用到,它們種類繁多,可能你需要的緩沖劑和你選的緩沖劑表面符合,實(shí)際使用時(shí)就存在一定的差異,所以選好合適的緩沖劑是很有必要的;同時(shí),不同緩沖液差別也很大。湖北新德晟帶你來(lái)聊聊Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的之間的區(qū)別。Tris-HCl緩沖液Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較***的一種緩沖劑,其本身為弱堿,常用有效pH在“中性”范圍,Tris-HCl緩沖液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸鹽緩沖液:pH=5.0~9.0。Tris-HCl緩沖液優(yōu)點(diǎn)1、Tris-HCl緩沖液穩(wěn)定,與生理體液的相容性好(Tris-HCl與鈣、鎂離子不會(huì)形成沉淀;相反,磷酸鹽與鈣、鎂離子會(huì)產(chǎn)生沉淀);2、而且相同PH,相同濃度的Tris-HCl緩沖液的離子強(qiáng)度低,這對(duì)酶類測(cè)定尤為重要,因?yàn)榇箅x子強(qiáng)度易致有些酶失活。因此,有時(shí)用Tris-HCl代替磷酸鹽緩沖液,效果更好。
外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的方法有很多種,如磷酸鈣轉(zhuǎn)染法、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染法、脂質(zhì)體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉(zhuǎn)染,其主要成分為HEPES,HEPES是一種非離子兩性緩沖劑,能有效控制pH在范圍,尤其在pH具有較好的緩沖能力,終濃度一般為mmol/L,培養(yǎng)液內(nèi)含mmol/LHEPES 即可達(dá)到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液,主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成,其**適pH值為,經(jīng)過(guò)濾除菌處理。影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細(xì)胞上停留的時(shí)間、休克時(shí)間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜,Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置,CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過(guò)甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。AVT穩(wěn)定供應(yīng)注射級(jí)海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽!
使用注射級(jí)氨丁三醇緩沖劑的注意事項(xiàng):1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃時(shí)緩沖液的pH=8.4,則37℃時(shí)的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.13.Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見(jiàn)金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系統(tǒng)中會(huì)起抑制作用,在配制過(guò)程中需考慮與其他組分之間的相互作用;4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴(yán)密封;5.Tris緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與注射級(jí)氨丁三醇溶液具有兼容性的電極;6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸(BCA)測(cè)定;7.吸入,攝入,皮膚吸收注射級(jí)氨丁三醇可造成傷害,操作時(shí)需戴好手套和護(hù)目鏡;8.作為蛋白緩沖液時(shí),若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用注射級(jí)氨丁三醇,比較好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。國(guó)內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES。安徽高純度HEPES現(xiàn)貨
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Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn):1、溫度效應(yīng)大,如4℃時(shí)pH=8.4,37℃時(shí)pH=7.42、pH值受溶液濃度影響較大,稀釋十倍,pH值的變化大于0.1;3、對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。4、易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn):pKa值介于6.0和8.0之間;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;對(duì)生化反應(yīng)影響有限,可耐化學(xué)和酶解作用,且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀;有極低的可見(jiàn)光和紫外光吸收;離子濃度、溶液組成和溫度對(duì)解離的影響小;HEPES緩沖液缺點(diǎn):如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時(shí),會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;而配置成溶劑后,要在4℃下保存,建議在短期內(nèi)使用效果更佳;HEPES粉末放置的時(shí)候一般放于干燥的室內(nèi),不能直接長(zhǎng)時(shí)間照射陽(yáng)光。四川有登記號(hào)HEPES價(jià)格
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