首先量取下列溶液,置于lL燒杯中。1MTris-HClBuffer,100ml500mMEDTA20ml。向燒杯中加入約800ml的去離子水,均勻混合。將溶液定容至1L后,高溫高壓滅菌,室溫保存就可以了。介紹:三羥甲基氨基甲烷是一種有機(jī)化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖液的制備。在生物化學(xué)實驗中常用的TAE和TBE緩沖液都需要用到Tris。Tris緩沖液不僅被廣用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。詳情請見AVT官網(wǎng),如有任何疑問歡迎給我們留言知曉更多tris相關(guān)資訊,敬請關(guān)注艾偉拓。北京登記號TRIS藥用采購
Tris-HCl緩沖液的緩沖原理為:Tris中的-NH2與HCl結(jié)合生成Tris·HCl鹽。季銨基團(tuán)Tris·H+與Tris形成緩沖對,溶液中存在Tris·H++H2O←→Tris+H3O+平衡關(guān)系,憑借該平衡移動來發(fā)揮緩沖作用。其緩沖范圍一般為7.0~9.0。由于Tris對生化過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀,所以在DNA、蛋白質(zhì)等生物大分子實驗中經(jīng)常應(yīng)用,Tris-HCl緩沖溶液可以做DNA、蛋白質(zhì)的溶解液或提取液,也是DNA相關(guān)研究實驗中的重要緩沖液,如DNA的捕獲與釋放、染色體的特異性標(biāo)記等方面。具體應(yīng)用方面,目前已上市的**mRNA疫苗其中一款(mRNA-1273®,Moderna,2020)選用Tris作為緩沖體系。已上市抗體藥物中也有Tris的應(yīng)用,如全球較早全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑注射用依那西普(Enbrel,恩利)。江蘇藥用輔料TRIS價格了解更多三(羥甲基)氨基甲烷相關(guān)資訊,敬請關(guān)注艾偉拓!
這兩種緩沖液常用于核酸電泳實驗中。磷酸鹽緩沖溶液一般的有活性的生物制劑都要用磷酸鹽緩沖溶液來稀釋。我們知道使用領(lǐng)域Tris緩沖溶液在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定pH值;在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值;Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)還可用于線蟲的中間纖維的形成;在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,可用于DNA的穩(wěn)定和存儲;將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸,獲得“TAE緩沖液”,換成硼酸可獲得TBE緩沖液。
實際應(yīng)用中各緩沖對組成的緩沖溶液都有比較好的緩沖范圍。在實際生產(chǎn)過程中,如果選擇的緩沖溶液緩沖范圍與預(yù)期偏差較大,使用大量強(qiáng)酸/強(qiáng)堿或許可以強(qiáng)行將溶液pH調(diào)至預(yù)期值,但此時溶液體系的緩沖容量已消耗殆盡,無法起到應(yīng)有的緩沖保護(hù)效果,對制劑產(chǎn)品后續(xù)的加工及長期儲存穩(wěn)定性造成影響。因此,要用好緩沖溶液,需對不同的緩沖溶液有具體的了解。以下介紹幾種常見的緩沖溶液及用途,為大家深入理解緩沖溶液提供參考。艾偉拓氨丁三醇了解更多氨丁三醇相關(guān)資訊,敬請關(guān)注艾偉拓AVT!
2、HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質(zhì)體藥物等方面。①HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn):在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時能維持較恒定的pH值,并對細(xì)胞無毒性作用。②HEPES緩沖液缺點(diǎn):在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒,與其他緩沖劑相比成本略高。二、Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的應(yīng)用1、Tris-HCl緩沖液的應(yīng)用Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH,由于其具有弱堿性,水溶液的pH在10.5左右,可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液,根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外,Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物(磷霉素等)的中間物,在化妝品、醫(yī)藥、涂料以及合成中均有應(yīng)用。應(yīng)用于體內(nèi)時,Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3結(jié)合,生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸,而且能降低CO2張力,有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果,其作用較碳酸氫鈉快而強(qiáng)。更多氨丁三醇相關(guān)資訊,敬請關(guān)注AVT!貴州77-86-1TRIS現(xiàn)貨供應(yīng)
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