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一、如何處理收到的細(xì)胞1.新買的或惠贈(zèng)的細(xì)胞如何處理?不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手應(yīng)趕緊做這幾件事:檢測(cè)瓶子是否破裂;培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁;是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存。2.能否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活。3.購(gòu)買的細(xì)胞死亡或存活率不佳可能原因?常見原因可能有:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;培養(yǎng)箱氣體濃度達(dá)不到要求;細(xì)胞置于–80℃太久。使用中問題:1.收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落的原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,是因熱脹冷縮的物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 NEST凍存管有盒裝的嗎?浙江NEST凍存管電話
凍存管也叫冷凍管,主要用于生物材料的低溫運(yùn)輸與儲(chǔ)存。凍存管一般用于細(xì)胞、稀有樣本、基因等一系列樣本的低溫保藏。一般在生物、醫(yī)藥、疫苗、人類基因庫(kù)、食品行業(yè)會(huì)用到。凍存管沒有嚴(yán)格的分類,一般是根據(jù)容量劃分,如0.5ml,1.0ml,1.5ml,1.8ml,2.0ml,4ml,5ml,7ml,10ml等。一般的凍存管不能進(jìn)入液氮里,只有特殊材料處理的才可以放入。同時(shí)凍存管還有雙層的和無雙層的帶硅膠墊和沒有硅膠墊的等種種,還有無色和雜色及各種純色等不同,還有,二維碼、條形碼、數(shù)字碼、多碼合一、SBS等一系列管子,這些都是根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要或?qū)嶒?yàn)方便各廠家自己設(shè)計(jì)的,沒有嚴(yán)格意義上的劃分。青浦區(qū)3mlNEST凍存管圓底可立NEST凍存管和康寧凍存管哪個(gè)好?
凍存管圓形底部設(shè)計(jì)便于傾倒液體,減少殘留。移液的準(zhǔn)確性和性不僅對(duì)吸頭與移液器是否匹配有要求,還需要適合液體的吸頭。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)吸頭移取表面張力小的液體時(shí)容易在吸頭表面留下一層薄膜(如含有清潔劑的液體)。液體的殘留會(huì)導(dǎo)致移液結(jié)果的不、不一致,同時(shí)也損失了部分昂貴的樣品。在許多DNA和蛋白質(zhì)的分析方法中所用到的試劑和樣品通常都含有清潔劑,研發(fā)低吸附吸頭就是為了改善液體殘留這個(gè)普遍的問題。在吸光度測(cè)試中,我們使用染色試劑(溶解于蒸餾水中的綠色食品染料)來測(cè)定排液后移液器吸頭中殘余的液體。使用被測(cè)吸頭大標(biāo)稱體積來吸取綠色試劑。然后直接將該液體排回凍存管中。接下來以吸頭的大容量使用蒸餾水漂洗吸頭5次。吸頭在使用選定溶劑進(jìn)行處理后低吸附功能會(huì)明顯降低。化學(xué)測(cè)試后低吸附吸頭的性能與未經(jīng)任何化學(xué)處理時(shí)的性能處于相同水平,這表明這些吸頭是惰性的且無浸出,對(duì)凍存管低吸附吸頭進(jìn)行高壓滅菌也不會(huì)影響吸頭的性能。
細(xì)胞凍存為了減少我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)時(shí)的細(xì)胞代謝頻率,從而進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),是細(xì)胞保存的主要方法之一,起到了細(xì)胞保種的作用。那么,細(xì)胞凍存的需要用到哪些細(xì)胞培養(yǎng)耗材,其凍存步驟又是怎樣的呢?利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞凍存需要用到的細(xì)胞培養(yǎng)耗材包括凍存管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、吸管、移液管等。待凍存細(xì)胞懸液的制備(1)按常規(guī)方法消化處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞培養(yǎng)物,制備單細(xì)胞懸液,并計(jì)算細(xì)胞總數(shù);(2)將細(xì)胞懸液以800~1000r/min離心5min,去上清夜;(3)向細(xì)胞沉淀物中加入冷凍保護(hù)液,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞密度達(dá)1×106~1×107個(gè)/ml;(4)按每管1~1.5ml的量分裝于凍存管內(nèi),擰緊管蓋;(5)將凍存管上做好標(biāo)記,包括細(xì)胞代號(hào)及凍存日期。NEST凍存管外旋優(yōu)點(diǎn)是什么?
凍存管在使用過程中,將細(xì)菌接種在保存管內(nèi),放置于-20℃或-80℃環(huán)境中可長(zhǎng)期保存。(-20℃可保存一年,-80℃可保存兩年)。細(xì)菌菌株的保存始終是實(shí)驗(yàn)室一個(gè)必不可少的工作。長(zhǎng)期以來,形成了平板傳代法、斜面?zhèn)鞔?、凍干法等多種保存方法。隨著可保存時(shí)間的由短到長(zhǎng),保存復(fù)雜程度及對(duì)相應(yīng)設(shè)備的要求也是逐步增加。如何取得可保存時(shí)間與保存復(fù)雜程度之間的比較好關(guān)系,是菌種保存方法的關(guān)鍵。使用步驟:1.直接刮取平皿上生長(zhǎng)的新鮮培養(yǎng)物置入菌種保存管中2.一般一個(gè)平皿的純培養(yǎng)物可保存兩個(gè)菌種保存管3.使用時(shí)用接種針從菌種保存管中取出一個(gè)小瓷珠直接劃線平板或置入相應(yīng)增菌液中。NEST凍存管管壁是加厚的。常州內(nèi)旋NEST凍存管包裝規(guī)格
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冷凍保存管在使用過程中,應(yīng)在保存管內(nèi)接種細(xì)菌,可在-20或-80長(zhǎng)期保存。(可在-20保存一年,在-80保存兩年)。細(xì)菌菌株的保存一直是實(shí)驗(yàn)室的一項(xiàng)基本工作。長(zhǎng)期以來,形成了平板傳代、斜面?zhèn)鞔?、凍干等多種保存方法。隨著存儲(chǔ)時(shí)間的縮短,存儲(chǔ)的復(fù)雜性和對(duì)相應(yīng)設(shè)備的要求也逐漸提高。如何在保存時(shí)間和保存復(fù)雜度之間獲得比較好關(guān)系是菌種保存方法的關(guān)鍵。使用步驟:1。直接刮取平板上生長(zhǎng)的新鮮培養(yǎng)物,放入菌種保存管中;2.一般一個(gè)平板的純培養(yǎng)可以保存兩個(gè)菌種保藏管;3.使用時(shí),用接種針從菌種保存管中取出小瓷珠,直接劃線平板或放入相應(yīng)的菌種增菌液中。浙江NEST凍存管電話