高效液相色譜分離原理液—固流動(dòng)相為液體,固定相為吸附劑(如硅膠、氧化鋁等)。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來(lái)進(jìn)行分離的。其作用機(jī)制是:當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱時(shí),溶質(zhì)分子(X)和溶劑分子(S)對(duì)吸附劑表面活性中心發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)吸附(未進(jìn)樣時(shí),所有的吸附劑活性中心吸附的是S),可表示如下:XmnSa======XanSm式中:Xm--流動(dòng)相中的溶質(zhì)分子;Sa--固定相中的溶劑分子;Xa--固定相中的溶質(zhì)分子;Sm--流動(dòng)相中的溶劑分子。當(dāng)吸附競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)達(dá)平衡時(shí):K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]式中:K為吸附平衡常數(shù)。[討論:K越大,保留值越大。]液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,用戶的信賴(lài)之選,有想法可以來(lái)我司咨詢(xún)!靜安區(qū)液相色譜系統(tǒng)怎么樣
高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。靜安區(qū)液相色譜系統(tǒng)多少錢(qián)上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),期待您的光臨!
高效液相色譜分離原理離子交換(Ion-exchangeChromatography)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹(shù)脂上可電離的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換,依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例,其交換過(guò)程可表示如下:X-(溶劑中)(樹(shù)脂-R4NCl-)===(樹(shù)脂-R4NX-)Cl-(溶劑中)當(dāng)交換達(dá)平衡時(shí):KX=[-R4NX-][Cl-]/[-R4NCl-][X-]分配系數(shù)為:DX=[-R4NX-]/[X-]=KX[-R4NCl-]/[Cl-][討論:DX與保留值的關(guān)系]凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來(lái)進(jìn)行分離。
高效液相色譜相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)于相對(duì)分子質(zhì)量較低(一般在200以下),揮發(fā)性比較好,加熱又不易分解的樣品,可以選擇氣相色譜法進(jìn)行分析。相對(duì)分子質(zhì)量在200~2000的化合物,可用液固吸附、液-液分配和離子交換色譜法。相對(duì)分子質(zhì)量高于2000,則可用空間排阻色譜法。高效液相色譜溶解度水溶性樣品比較好用離子交換色譜法和液液分配色譜法;微溶于水,但在酸或堿存在下能很好電離的化合物,也可用離子交換色譜法;油溶性樣品或相對(duì)非極性的混合物,可用液-固色譜法。高效液相色譜化學(xué)結(jié)構(gòu)若樣品中包含離子型或可離子化的化合物,或者能與離子型化合物相互作用的化合物(例如配位體及有機(jī)螯合劑),可首先考慮用離子交換色譜,但空間排阻和液液分配色譜也都能順利地應(yīng)用于離子化合物;異構(gòu)體的分離可用液固色譜法;具有不同官能團(tuán)的化合物、同系物可用液液分配色譜法;對(duì)于高分子聚合物,可用空間排阻色譜法。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,讓您滿意,歡迎您的來(lái)電!
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高效液相色譜相關(guān)術(shù)語(yǔ)峰面積(peakarea,A)—峰與峰底所包圍的面積。保留時(shí)間(retentiontime,tR)——從進(jìn)樣開(kāi)始到某個(gè)組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時(shí)間。理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber,N)——用于定量表示色譜柱的分離效率(簡(jiǎn)稱(chēng)柱效)。分離度(resolution,R)——相鄰兩峰的保留時(shí)間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱(chēng)為完全分離?!吨袊?guó)藥典》規(guī)定R應(yīng)大于1.5。拖尾因子(tailingfactor,T)——T=,用以衡量色譜峰的對(duì)稱(chēng)性。也稱(chēng)為對(duì)稱(chēng)因子(symmetryfactor)或不對(duì)稱(chēng)因子(asymmetryfactor)?!吨袊?guó)藥典》規(guī)定T應(yīng)為0.95~1.05。T1.05為拖尾峰。靜安區(qū)液相色譜系統(tǒng)怎么樣
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