高效液相色譜分離原理液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化學鍵合相色譜(ChemicallyBondedPhaseChromatography) 流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱,溶質在兩相間進行分配。達到平衡時,服從于高效液相色譜計算公式:式中,cs—溶質在固定相中濃度;cm—溶質在流動相中的濃度;Vs—固定相的體積;Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處,即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大;但也有不同之處,GPC中,流動相對K影響不大,LLPC流動相對K影響較大。a.正相液-液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動相的極性小于固定液的極性。b.反相液-液分配色譜法(ReversePhaseliquidChromatography):流動相的極性大于固定液的極性。c.液-液分配色譜法的缺點:盡管流動相與固定相的極性要求完全不同,但固定液在流動相中仍有微量溶解;流動相通過色譜柱時的機械沖擊力,會造成固定液流失。上世紀70年代末發(fā)展的化學鍵合固定相(見后),可克服上述缺點。上海禹重實業(yè)有限公司液相色譜系統(tǒng)獲得眾多用戶的認可。徐匯區(qū)進口液相色譜系統(tǒng)廠家供應
液相色譜類型液相色譜按其分離機理,可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法分配色譜法這種色譜的流動相和固定相都是液體,樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配,利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進行分離,類似于萃取過程。一般常用的固定液有β,β-氧二丙腈(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊烷(SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法,將固定液涂漬在多孔的載體表面,但在使用中固定液易流失。目前,應用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,固定液不是涂在載體表面,而是通過化學反應在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機基團。例如,利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優(yōu)點是不易被流動相剝蝕。在分配色譜法中,流動相可為純溶劑,也可以采用混合溶劑進行梯度淋洗,其極性應與固定液差別大一些,以避免兩者之間相溶。通常可分為正相分配和反相分配。舟山進口液相色譜系統(tǒng)供應商上海禹重實業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),歡迎您的來電哦!
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高效液相色譜相關術語色譜圖(chromatogram)——樣品流經色譜柱和檢測器,所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elutionprofile)。基線(baseline)——經流動相沖洗,柱與流動相達到平衡后,檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應平行于時間軸。噪音(noise)——基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。漂移(drift)——基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起,柱內的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產生漂移。徐匯區(qū)進口液相色譜系統(tǒng)廠家供應
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