高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),***通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。與質(zhì)譜儀或其他檢測(cè)器無(wú)縫集成。新疆進(jìn)口高效液相色譜系統(tǒng)廠家報(bào)價(jià)
高效液相色譜相關(guān)術(shù)語(yǔ)峰面積(peakarea,A)—峰與峰底所包圍的面積。保留時(shí)間(retentiontime,tR)——從進(jìn)樣開始到某個(gè)組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時(shí)間。理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber,N)——用于定量表示色譜柱的分離效率(簡(jiǎn)稱柱效)。分離度(resolution,R)——相鄰兩峰的保留時(shí)間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離。《中國(guó)藥典》規(guī)定R應(yīng)大于1.5。拖尾因子(tailingfactor,T)——T=,用以衡量色譜峰的對(duì)稱性。也稱為對(duì)稱因子(symmetryfactor)或不對(duì)稱因子(asymmetryfactor)?!吨袊?guó)藥典》規(guī)定T應(yīng)為0.95~1.05。T1.05為拖尾峰。液相色譜系統(tǒng)廠家供應(yīng)不論是單獨(dú)使用還是與***的質(zhì)譜儀聯(lián)用,該系統(tǒng)都表現(xiàn)出更高水平的性能、生產(chǎn)率和易用性。
雙LC的VanquishDuo系統(tǒng)更多細(xì)節(jié)VanquishDuo系統(tǒng)可采用多種分析檢測(cè)器,包括質(zhì)譜(MS)、二極管陣列檢測(cè)(DAD)、電霧式檢(CAD)、可變波長(zhǎng)檢測(cè)(VWD)和熒光檢測(cè)(FLD)。更高的樣品容量高樣品容量為標(biāo)準(zhǔn)配置(四個(gè)板,競(jìng)品均為兩個(gè)板)。通過(guò)可以選配的ThermoScientific?Vanquish?Charger模塊可以進(jìn)一步增加樣品的容量。準(zhǔn)確的流量控制幫助提高數(shù)據(jù)置信度采用雙泵通過(guò)三元溶劑梯度配比輸送流量,兩**全**的設(shè)備安裝在同一室內(nèi)。
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn):①高壓:流動(dòng)相為液體,流經(jīng)色譜柱時(shí),受到的阻力較大,為了能迅速通過(guò)色譜柱,必須對(duì)載液加高壓。②高速:分析速度快、載液流速快,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個(gè)樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時(shí)。③高效:分離效能高??蛇x擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到比較好分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。④高靈敏度:紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng,進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。⑤應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢(shì)。⑥柱子可反復(fù)使用:用一根柱子可分離不同化合物⑦樣品量少、容易回收:樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。Vanquish 系統(tǒng)柱箱 H 模塊的雙恒溫模式,確保柱溫始終恒定。
高效液相色譜相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)于相對(duì)分子質(zhì)量較低(一般在200以下),揮發(fā)性比較好,加熱又不易分解的樣品,可以選擇氣相色譜法進(jìn)行分析。相對(duì)分子質(zhì)量在200~2000的化合物,可用液固吸附、液-液分配和離子交換色譜法。相對(duì)分子質(zhì)量高于2000,則可用空間排阻色譜法。高效液相色譜溶解度水溶性樣品比較好用離子交換色譜法和液液分配色譜法;微溶于水,但在酸或堿存在下能很好電離的化合物,也可用離子交換色譜法;油溶性樣品或相對(duì)非極性的混合物,可用液-固色譜法。高效液相色譜化學(xué)結(jié)構(gòu)若樣品中包含離子型或可離子化的化合物,或者能與離子型化合物相互作用的化合物(例如配位體及有機(jī)螯合劑),可首先考慮用離子交換色譜,但空間排阻和液液分配色譜也都能順利地應(yīng)用于離子化合物;異構(gòu)體的分離可用液固色譜法;具有不同官能團(tuán)的化合物、同系物可用液液分配色譜法;對(duì)于高分子聚合物,可用空間排阻色譜法。在無(wú)需暫停實(shí)驗(yàn)更換溶劑的情況下,可實(shí)現(xiàn)多達(dá)九種不同溶劑組合。湖南專業(yè)液相色譜系統(tǒng)哪家好
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