細(xì)胞凍存液的作用是什么?滲透性冷凍保護(hù)劑:可以滲透到細(xì)胞內(nèi),一般是一些小分子物質(zhì),主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護(hù)劑:不能滲透到細(xì)胞內(nèi),一般是些大分子物質(zhì),主要包括聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及Hetastarch等。冷凍保護(hù)劑同溶液中的水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成,同時(shí)冷凍保護(hù)劑可以通過在細(xì)胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度,降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細(xì)胞免受溶質(zhì)的損傷。滲透性冷凍保護(hù)劑的保護(hù)機(jī)制是在細(xì)胞冷凍懸液完全凝固之前,滲透到細(xì)胞內(nèi),在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度,降...
新常態(tài)下細(xì)胞凍存指南:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍速融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。典型的細(xì)胞凍存液是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,或只是在血清中加入10%的DMSO。目前在有些實(shí)驗(yàn)室中仍然采用這種自制自配的凍存液,優(yōu)點(diǎn)是成本低,適合自己的...
無血清細(xì)胞凍存液相對于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢有:1.即用型,無需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過程。無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子。廈門無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)無血清細(xì)胞凍存液對比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢:傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMS...
細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個(gè)方式,還可選擇20%的DMSO機(jī)上80%的小牛血清,配成兩倍的儲(chǔ)存液,在使用時(shí)細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用細(xì)胞凍存液需要注意以下幾點(diǎn):1、在使用凍存液前,需要確保細(xì)胞凍存液已經(jīng)完全融化,并要輕輕的混勻。對融化后的細(xì)胞凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。2、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細(xì)胞生長情況比較良好,比如說細(xì)胞需要處于對數(shù)生長期,并且凍存的時(shí)候存活率大于90%。3、在使用細(xì)胞凍存液期間,為了保證可以發(fā)揮較佳的效果,建議將細(xì)胞凍存在液氮之中,這...
細(xì)胞凍存中的注意事項(xiàng):細(xì)胞凍存開始時(shí),要溫好相應(yīng)的培養(yǎng)基和相應(yīng)的試劑,以及計(jì)數(shù)耗材,避免操作過程中手忙腳亂。用移液管吹打相應(yīng)的胞液時(shí),要保證移液管在液面以下吹打,管內(nèi)要有液體,防止產(chǎn)生相應(yīng)的氣泡,氣泡的張力會(huì)影響細(xì)胞的活率和生存狀態(tài)。計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)要保證取胞液時(shí)也要混勻,這個(gè)過程比較重要,細(xì)胞不混勻,計(jì)數(shù)不準(zhǔn),此外吹打應(yīng)該輕柔,避免細(xì)胞在吹打的過程中出現(xiàn)了相應(yīng)的死亡。凍存離心用50ml離心管比較好,加凍存液吹打混勻比較方便,離心后不能過多地晃動(dòng)離心管。當(dāng)離心管液體較多的時(shí)候,可以直接傾倒,不要磕,多余的液體較好用泵吸出比較好。凍存支數(shù)少的情況,用泵頭輕柔吹打,避免出現(xiàn)氣泡,凍存支數(shù)多用移液管吹打。...
細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:當(dāng)溫度進(jìn)一步下降,細(xì)胞內(nèi)外都結(jié)冰,產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑,則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因?yàn)槔鋬霰Wo(hù)劑容易同溶液中的水分子結(jié)合,從而降低冰點(diǎn),減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷,細(xì)胞得以在較低溫條件下保存。在復(fù)蘇時(shí),一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫,細(xì)胞內(nèi)外不會(huì)重新形成較大的冰晶,也不會(huì)暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過長的時(shí)間,從而無冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生,凍存的細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。冷凍保護(hù)劑對細(xì)胞的冷凍保護(hù)效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復(fù)溫速率有關(guān)。而且不同的冷凍...
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。在過去的幾十年中,科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細(xì)胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉(zhuǎn)移使其達(dá)到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲(chǔ)存時(shí)間一般比較短,不能滿足時(shí)間跨度大的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的需求。且這樣人力和時(shí)間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來了不穩(wěn)定性。無血清細(xì)胞凍存液用于其他類型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的儲(chǔ)存。濟(jì)南正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠...
無血清細(xì)胞凍存液是一種無血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存液操作簡便,無需程序降溫,可在-80度或液氮中長期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力,穩(wěn)定保持細(xì)胞特性,以及細(xì)胞多能性,并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過動(dòng)物直接注射實(shí)驗(yàn)檢測,包括靜脈注射,皮下注射途徑,無明顯細(xì)胞毒性,動(dòng)物安全性非常高。細(xì)胞存儲(chǔ)中對細(xì)胞凍存更有特殊要求。石家莊...
無血清細(xì)胞凍存液,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動(dòng)物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。復(fù)蘇細(xì)胞:1.將細(xì)胞凍存管由液態(tài)氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時(shí)可準(zhǔn)備培養(yǎng)基、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。2.于生物安全柜內(nèi),直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融,使細(xì)胞團(tuán)塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基,再將化凍的細(xì)胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細(xì)胞。4.倒去上清液,以新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。5.隔天更換新鮮培養(yǎng)基,并觀察細(xì)胞存活狀況。細(xì)胞保藏中心,用于細(xì)胞株的...
通用細(xì)胞凍存液(無血清)的簡介:隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,除了原代培養(yǎng)之外,人工開發(fā)出來的細(xì)胞系的保存越來越重要。細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成,減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷,從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲得稀釋,稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜,這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Wo(hù)劑稀釋以后,該濃度一般不會(huì)對細(xì)胞造成毒性損傷。通用細(xì)胞凍存液(無血清)主要由培養(yǎng)基、DMSO等組成,不含血清,是一種經(jīng)典的無菌凍存液。用于各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系、雜交瘤細(xì)胞等的凍存。無血清細(xì)胞凍存液可用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存...
復(fù)蘇方:法1)從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4)清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5)加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6)鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系,原代細(xì)胞。...
無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無動(dòng)物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細(xì)胞,無需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上。無血清快速細(xì)胞凍存液,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存。廣州無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價(jià)無血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品優(yōu)勢:1.化學(xué)成分明確,無任...
血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng),血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿比較大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。在冰袋...
含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問題:1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時(shí)耗力。3.含血清,細(xì)胞污染(細(xì)菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是:將細(xì)胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱長期保存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:即用型,無需現(xiàn)配,即...
細(xì)胞凍存時(shí)間和操作步驟:1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液,通常細(xì)胞凍存液含10%的DMSO,或者是甘油、10-20%的小牛血清;、取對數(shù)生長期細(xì)胞,并且還需要用PBS進(jìn)行清洗,需要注意在這里要丟棄掉舊的細(xì)胞凍存液;3.去除PBS,加入適量的胰蛋白酶,以覆蓋住培養(yǎng)皿表面為宜,然后把單層生長的細(xì)胞消化掉;然后離心1000rpm5min時(shí)間;4、去除胰蛋白酶,加入凍存培養(yǎng)液,輕輕吹打使細(xì)胞的分布變得均勻,調(diào)節(jié)細(xì)胞較終的密度為5×106/ml-1×107/ml,需要注意這是較佳的細(xì)胞密度;5、將細(xì)胞裝入凍存管之中,每管的含量應(yīng)該保持在1~1.5ml之間。在凍存管上標(biāo)明細(xì)名稱、時(shí)間、操作者;6、較后要說的就是...
含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問題:1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時(shí)耗力。3.含血清,細(xì)胞污染(細(xì)菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是:將細(xì)胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱長期保存。反復(fù)吹吸混勻后,分裝于細(xì)胞凍存管中,每管500...
永生化的細(xì)胞系往往相當(dāng)健壯,因此,使用實(shí)驗(yàn)室自制的凍存培養(yǎng)基,效果也不錯(cuò)。典型的配方是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細(xì)胞中的一些水,以防止冰晶形成,刺穿細(xì)胞。據(jù)賽默飛世爾科技的較深科學(xué)家RhondaNewman介紹,DMSO還能防止細(xì)胞在冷凍期間發(fā)生收縮,而后在解凍時(shí)又變得腫脹。血清,這種富含營養(yǎng)成分的物質(zhì),直接支持細(xì)胞?!爱?dāng)細(xì)胞處于這種營養(yǎng)豐富的環(huán)境時(shí),它們能夠更好地復(fù)蘇。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢:因不含血清,批次間差異小。青島無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家細(xì)胞凍存:細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培...
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。無血清細(xì)胞凍存液使用方法:取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中。珠海無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可...
細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng):1.為保持細(xì)胞較大存活率,一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度為-1℃~12℃/分鐘,當(dāng)溫度下降達(dá)-25℃時(shí),下降速度可增至-5~-10℃/分鐘,到-100℃時(shí)則可迅速凍入液氮中。因此要適當(dāng)掌握凍存物下降入液氮中的速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促冰晶形成。3.初次凍存者在下降凍存時(shí),宜先用細(xì)木棒伸入罐中探測液面位置,然后需用溫度計(jì)與凍存物并行的辦法,以觀測下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關(guān)系,當(dāng)已掌握以上各參數(shù)和凍存技術(shù)熟練后,光按下降時(shí)間和下降距離便可獲理想凍存效果。將分裝好的細(xì)胞凍存管,直接置于-80 度冰箱過...
無血清凍存液注意事項(xiàng):1、請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細(xì)胞,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。無血清凍存液特性:1.不含動(dòng)物成分。2.不需回溫,完全即用型。3.適合各種動(dòng)物細(xì)胞。4.適合無血清培養(yǎng)細(xì)胞與含血清培養(yǎng)細(xì)胞。5.復(fù)蘇細(xì)胞存活率高。無血清凍存液用途:1、無血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。2、細(xì)胞保藏中心,無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株的長期保存。3、科研高校,無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株凍存。4、無血清...
永生化的細(xì)胞系往往相當(dāng)健壯,因此,使用實(shí)驗(yàn)室自制的凍存培養(yǎng)基,效果也不錯(cuò)。典型的配方是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細(xì)胞中的一些水,以防止冰晶形成,刺穿細(xì)胞。據(jù)賽默飛世爾科技的較深科學(xué)家RhondaNewman介紹,DMSO還能防止細(xì)胞在冷凍期間發(fā)生收縮,而后在解凍時(shí)又變得腫脹。血清,這種富含營養(yǎng)成分的物質(zhì),直接支持細(xì)胞。“當(dāng)細(xì)胞處于這種營養(yǎng)豐富的環(huán)境時(shí),它們能夠更好地復(fù)蘇。無血清細(xì)胞凍存液使用方法:緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。武漢無血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”,這樣可以較...
無血清快速細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色:1.高安全性,完全使用醫(yī)藥品等級原料進(jìn)行生產(chǎn),不含動(dòng)物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。2.細(xì)胞存活率高,無批次差異。3.完全凍存液配方,可直接使用,方便簡捷,可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程(省時(shí)、省力、省錢)。無血清細(xì)胞凍存液:凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上。合肥無血清細(xì)胞凍存液使用方法...
細(xì)胞凍存:細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),而且細(xì)胞一旦離開活的開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。原理:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造...
凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注:DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細(xì)胞凍存液,使用方便,復(fù)蘇率高。注意冷凍保護(hù)劑DMSO的品質(zhì):DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色,以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓。上海無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):凍存細(xì)胞系以備將來之用時(shí),必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用...
血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng),血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿比較大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。根據(jù)凍...
復(fù)蘇方:法1)從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4)清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5)加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6)鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系,原代細(xì)胞。...
細(xì)胞凍存:就凍存細(xì)胞而言,為了防止細(xì)胞在溫度下降時(shí)產(chǎn)生胞內(nèi)細(xì)微冰晶,其溫度的下降不能太快。標(biāo)準(zhǔn)的操作是每一分鐘下降一度。有以下三種建議:(1)優(yōu)先推薦使用程控降溫儀。(2)其次,加有異丙醇的細(xì)胞凍存盒,基本上也可以保證每分鐘1℃左右的降溫速度;(3)還有一些普遍的簡易凍存方法。如4℃半小時(shí),-20℃半小時(shí),然后-80℃過夜,再放入液氮;用泡沫盒(裝15mL離心管的那種)加一個(gè)保鮮袋,直接放在-80℃凍存;也可以用紗布做成袋子,將細(xì)胞懸掛在液氮上方,隔天轉(zhuǎn)入液氮;在凍存管外面包上棉花,直接放在-80℃冰箱就能夠達(dá)到緩慢降溫的效果;有的時(shí)候如果確實(shí)比較緊急的話,向96孔凍存盒的內(nèi)部加滿自來水,再將...
細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,在復(fù)溫時(shí),大量水分會(huì)因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)...
凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注:DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細(xì)胞凍存液,使用方便,復(fù)蘇率高。注意冷凍保護(hù)劑DMSO的品質(zhì):DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色,以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。無血清細(xì)胞凍存液:降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量。濟(jì)南無血清細(xì)胞凍存液價(jià)格細(xì)胞凍存:細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種...
隨著細(xì)胞治理以及細(xì)胞儲(chǔ)存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。凍存要求發(fā)生改變,因?yàn)閮龃婕?xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用,所以凍存液成分由原來血清變?yōu)闊o血清,無動(dòng)物源成分,凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或藥物需求。隨著細(xì)胞凍存數(shù)量增加,凍存流程簡化也成為必然趨勢,因此無血清非程序降溫凍存液應(yīng)運(yùn)而生。目前針對細(xì)胞治理領(lǐng)域,推出一款即用型的無血清細(xì)胞凍存液,這款產(chǎn)品是細(xì)胞凍存研究的革新,主要具有幾大特點(diǎn),凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細(xì)胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、等間充質(zhì)干細(xì)胞,免疫細(xì)胞以及大多數(shù)細(xì)胞系凍存。同時(shí)該款所有成分均使用藥用級原料配制而...