鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜。I型膠原蛋白分布非常普遍,是主纖維束的主要成分。長(zhǎng)沙鼠尾膠原服務(wù)電話含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 (均需要無菌、 預(yù)冷) 10mg/L 酚紅用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠...
鼠尾膠原包被培養(yǎng)板:胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團(tuán)塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 (均需要無菌、 預(yù)冷) 10mg/L 酚紅用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠...
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無鼠尾膠原時(shí),前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,不宜封接;有鼠尾膠原時(shí),前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,易于封接和長(zhǎng)時(shí)間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。杭州正規(guī)鼠尾膠原哪家便宜一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)將無組織纖維...
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,為鼠尾膠原蛋白、聚乙烯醇、殼聚糖、水制成的凍干止血材料,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?1-10% 0. 2-5% 0.2-2%,余量為水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,余量的水。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級(jí)大鼠鼠尾。鼠尾膠原醋酸溶解:不建議用過濾的方法無菌化。無錫成都鼠尾膠原鼠尾膠原包被培養(yǎng)板:胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國(guó)外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到 的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的 材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞 懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下 皮膚后.以 消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液. 用梯度離...
利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。 方法 通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構(gòu)成膠原纖維。然后,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6 d,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。 結(jié)果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2 d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化;礦化6 d后,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。 結(jié)論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分...
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用,同時(shí)它也是一種天然的黏附劑,當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,制備細(xì)胞爬 片時(shí),可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通 過本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾膠原將其固定于 培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料: 大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理 鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容: 1、制備鼠尾膠原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。前庭毛細(xì)胞...
鼠尾膠原包被培養(yǎng)板:胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團(tuán)塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31...
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,其中每 3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋。這樣的螺旋稱為 3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。制備鼠尾膠原:吸取上清,分裝成小瓶,4℃保存。寧波鼠尾膠原價(jià)格鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:兩...
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用;(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目; (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,期間不斷攪拌,防止凍結(jié)成塊,得到膠原溶脹液; (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50: I?100: 1,在4°C,48?74小時(shí)酶解,期間間歇性攪拌; (5)將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白...
鼠尾膠原的提取步驟:配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液(用鹽酸將其PH值調(diào)至7.5) 取鼠尾,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,置于生理鹽水中,稱重,再倒掉生理鹽水,酒精中浸泡20分鐘 離心膠原溶液,(1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液離心,(8000rpm 5min) 其上清,留絮狀沉 10.將絮狀沉淀物置于三蒸水中,用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮狀沉淀物,加入消毒過的攪拌 子,冷房攪拌數(shù)天,得絮狀膠原。 注意所有和膠原有關(guān)的操作都在冰上進(jìn)行\(zhòng) Rat ...
一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,其特征在于,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理,再用雙氧水溶液殺酶;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,然后用乙酸溶液溶脹,把溶脹后的切片分散攪拌,然后用濾網(wǎng)過濾,除去雜質(zhì)及不溶脹物,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液;(2)手術(shù)縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機(jī)的紡絲液貯罐中,用氮?dú)鈹D壓入含有pH=8-11、質(zhì)量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,再經(jīng)過假捻器加捻,合股后再進(jìn)入含有pH=9-11、質(zhì)量濃度為0.8-1.2...
鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M 的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,這時(shí)候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。 ...
膠原蛋白的適用征狀:1、由于工作勞累,睡眠不足形成的皮膚晦暗無光、發(fā)黃、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2、由于年齡、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂、皺紋、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,大量沉積皮膚表面,肌膚不能及時(shí)代謝出異常黑色素,形成各種色斑。4、由于長(zhǎng)期戶外活動(dòng)及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷,過早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥、脫皮、、毛孔粗大等不良癥狀。5、由于內(nèi)分泌功能紊亂,皮膚膚質(zhì)差、皮膚發(fā)油、發(fā)暗,易長(zhǎng)青春痘留下的色印、色素沉著等。6、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題。7.長(zhǎng)期電腦旁工作,電腦輻射造成脫發(fā),內(nèi)分泌紊亂問題。利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自...
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化鉀 100 mL,用1 mol/L 氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,倒入0.5 mL自組裝液,室溫放置20 min。予自組裝液自組裝24 h。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培養(yǎng)皿中,將自組裝24 h的膠原浸泡在戊二醛中。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10 mmol/L 二水氯化鈣+150 mmol/L氯化鈉+50 mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國(guó)外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到 的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的 材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞 懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下 皮膚后.以 消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液. 用梯度離...
鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導(dǎo)。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,We...
鼠尾膠原蛋白提取、分離、純化方法的建立及鑒定:通過對(duì)鼠尾進(jìn)行剝離獲得鼠尾腱,用Tris-HCl緩沖液、胃蛋白酶處理獲得鼠尾膠原蛋白原液、反復(fù)使用氯化鈉溶液進(jìn)行分級(jí)鹽析、醋酸溶液復(fù)溶進(jìn)行鼠尾膠原蛋白的純化.超純水透析除去無機(jī)鹽類獲得純化的鼠尾膠原蛋白。通過SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳、氨基酸含量分析等技術(shù)手段鑒定.結(jié)果 本研究建立的方法可以獲得高純度的鼠尾膠原蛋白,純度達(dá)到電泳純.與國(guó)外進(jìn)口的商業(yè)化鼠尾膠原蛋白產(chǎn)品相比無差異。研究了提取、分離、純化參數(shù)對(duì)得率、純度的影響,建立了較優(yōu)的鼠尾膠原蛋白提取條件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解時(shí)間:72 h,鹽析濃度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.0...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優(yōu)點(diǎn):1、本發(fā)明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產(chǎn)效率, 同時(shí)避開了使用其他設(shè)備帶來的成本上升問題。2、本發(fā)明專利生產(chǎn)的止血材料(止血海綿),其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明其具有非常好的止血效果。也可應(yīng)用于內(nèi)臟出血。具有廣闊的應(yīng)用前景。3、本發(fā)明制備的止血材料具有可完全被人體吸收,與出血?jiǎng)?chuàng)面一接觸,其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血?jiǎng)?chuàng)面上,外面則形成連續(xù)的壓迫干層。啟動(dòng)凝血因子。同時(shí),聚乙烯醇為成膜材料,兩種的協(xié)同效應(yīng)形成了一種理想的止血狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。青島鼠尾膠原哪里買膠原蛋白的功效:1...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng):三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 (均需要無菌、 預(yù)冷) 10mg/L 酚紅用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠...
膠原蛋白分離提純實(shí)驗(yàn)方案:提取鼠尾膠原蛋白的實(shí)驗(yàn)步驟: 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對(duì)初步處理的鼠尾腱進(jìn)行 酶解, 持續(xù)一段時(shí)間待混合物變成無色、 透明、 粘稠液體后即可在 4℃, 5000g 的離心力下離心 20min, 收集上清即為粗制鼠尾膠原蛋白原液。 2、將一定濃度的氯化鈉溶液加入其中,持續(xù)攪拌直至白色絮狀沉淀 從溶液中析出,繼續(xù)加入氯化銨直至沉淀不在析出為止,4℃,5000g 的離心力下離心 20min 后獲得白色沉淀。 沉淀物加入一定濃度的醋酸 溶液中溶解。 3、將溶解后的鼠尾膠原蛋白溶液繼續(xù)反復(fù)進(jìn)行鹽析處理,重復(fù)步驟 2 的過程 2~4 次。 _x000c_鼠尾膠原蛋白...
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,余量的水。2.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級(jí)大鼠鼠尾。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于劑型為創(chuàng)可貼。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于劑型為噴霧劑。方法制作鼠尾膠原,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。上海正規(guī)鼠尾膠原廠家鼠尾膠原:含細(xì)胞三維膠原...
鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預(yù)冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul生友鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O。然...
鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法。各個(gè)材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,采用冷凍干燥工藝制備。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收、容易引起機(jī)體過敏、止血效果差等缺點(diǎn),本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,生物相容性好;止血效果快,具有很強(qiáng)的親水性;同時(shí)可啟動(dòng)血小板的凝聚,一旦血小板凝聚,就可形成血栓,進(jìn)而促使血漿結(jié)塊阻止血流。同時(shí),膠原表面的特定區(qū)域可以與細(xì)胞表面存在的類似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,可以起到防止腸粘連的功效。一種基于鼠尾膠原蛋白:各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?% 2% 1%,余量的水。上海...
鼠尾膠原蛋白等實(shí)驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用:干細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等多種「難伺候」的細(xì)胞,以及一些組織在體外培養(yǎng)時(shí),需要在模擬體內(nèi)環(huán)境的細(xì)胞外基質(zhì)中生長(zhǎng),膠原蛋白和纖粘蛋白正是細(xì)胞外基質(zhì)的主要組成部分,富含 1 型膠原蛋白大鼠尾部也成了實(shí)驗(yàn)室用膠原蛋白的較主要來源。鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的。它可以用于監(jiān)測(cè)小鼠血液成分的變化,確認(rèn)小鼠是否患上了 糖尿病或者某些治好能夠改變小鼠的血糖等。比起心臟和眼部取血,實(shí)驗(yàn)用鼠尾尖取血的取血量較小,但取血之后,小鼠還能繼續(xù)下一步建模或者實(shí)驗(yàn),完全沒有性命之憂。制備鼠尾膠原:將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中...
鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響:目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對(duì)照,培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài),進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)并描繪細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,比較不同基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞的增殖作用。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,細(xì)胞增殖速度較普通組快,細(xì)胞形態(tài)、活力和長(zhǎng)勢(shì)比普通組更佳,促進(jìn)增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結(jié)論鼠尾膠原可促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠。鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。濟(jì)南鼠尾膠原產(chǎn)品...
鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。上海鼠尾膠原直銷廠家一種基于鼠尾膠原蛋白:1.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優(yōu)點(diǎn):1、本發(fā)明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產(chǎn)效率, 同時(shí)避開了使用其他設(shè)備帶來的成本上升問題。2、本發(fā)明專利生產(chǎn)的止血材料(止血海綿),其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明其具有非常好的止血效果。也可應(yīng)用于內(nèi)臟出血。具有廣闊的應(yīng)用前景。3、本發(fā)明制備的止血材料具有可完全被人體吸收,與出血?jiǎng)?chuàng)面一接觸,其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血?jiǎng)?chuàng)面上,外面則形成連續(xù)的壓迫干層。啟動(dòng)凝血因子。同時(shí),聚乙烯醇為成膜材料,兩種的協(xié)同效應(yīng)形成了一種理想的止血狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。制備鼠尾膠原:按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液。太原鼠尾膠原供應(yīng)商鼠尾膠原簡(jiǎn)介:鼠尾I型膠...